汪千力
- 作品数：15 被引量：43H指数：5
- 供职机构：复旦大学公共卫生学院公共卫生安全教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家科技重大专项上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 犬肾细胞系、人喉表皮癌细胞、非洲绿猴肾细胞混合培养检测常见呼吸道病毒和肠道病毒被引量：5
- 2011年
- 目的建立犬肾细胞系（MDCK）、人喉表皮癌细胞（Hep-2）、非洲绿猴肾细胞（Vero）混合培养以分离常见呼吸道病毒和肠道病毒，为临床检测主要呼吸道、肠道病毒提供新方法。方法采用MDCK、Hep-2和Vero制备混合瓶，接种甲型流行性感冒（流感）病毒、乙型流感病毒、腺病毒和肠道病毒71型流行株污染的咽拭子，观察细胞病变效应，以及采用单克隆荧光抗体、RT—PCR和PCR鉴定。结果对应不同病毒，敏感细胞系出现明显的细胞病变效应，荧光抗体检测可见特异的绿色荧光颗粒，PCR产物电泳结果可见不同的目的片段。结论混合细胞瓶一次可以分离培养多种常见呼吸道病毒和肠道病毒，通过后续的特异性检测手段即可检测，比直接检测标本抗原、核酸的检出率高。该方法有利于推动临床病毒性疾病的诊断。
- 高颖阳姜晨彦蒋露芳汪千力居丽雯
- 关键词：肠道病毒属细胞系
- 2011年上海地区健康儿童血清肠道病毒71型免疫水平检测被引量：5
- 2013年
- 目的 了解2011年上海地区不同年龄儿童血清肠道病毒71型（EV71）中和抗体水平.方法 收集2011年7月至8月不同年龄健康儿童血清,采用微量中和试验方法检测儿童血清EV71中和抗体水平.正态分布的计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用卡方检验.结果 93份0～8周岁健康儿童血清中,EV71中和抗体阳性率为58.1％（54/93）,中和抗体几何平均效价（GMT）为1∶14.48.0～6个月婴儿血清EV71中和抗体阳性率为87.5％（21/24）,GMT为1∶29.56;2～3周岁儿童血清EV71中和抗体阳性率为3.7％（1/27）,GMT为1∶4.21,均低于0～6个月组婴儿（x2 =36.37,t=7.58;均P＜0.01）;5～6周岁儿童血清EV71中和抗体阳性率为83.3％（20/24）,GMT为1∶21.74,均高于2～3周岁组（x2=23.90,t=-6.004;均P＜0.01）;7～8周岁儿童血清EV71中和抗体阳性率为66.7％（12/18）,GMT为1∶20.76,与5～6周岁组间差异均无统计学意义（x2 =1.58,t=0.597;均P＞0.05）.男童血清EV71中和抗体阳性率为62.7％（32/51）,GMT为1∶16.23;女童血清EV71中和抗体阳性率为52.4％（22/42）,GMT为1∶12.61;不同性别儿童血清EV71中和抗体阳性率和GMT比较,差异均无统计学意义（x2=1.02,t=0.881;均P＞0.05）.结论 2～3周岁儿童EV71中和抗体水平显著低于0～6个月婴儿和5～8周岁儿童,是EV71感染的高危儿童群体.
- 朱雯居丽雯蒋露芳申惠国汪千力姜庆五
- 关键词：手足口病肠道病毒属儿童
- 实时细胞动态监测的流感病毒株耐药性研究被引量：4
- 2011年
- 目的:了解实时细胞动态监测(RTCA)系统,由细胞病变导致金电极板电阻抗变化的研究;评价磷酸奥司他韦对上海地区不同亚型流感流行株体外抗病毒效果。方法:随机选取2009年-2010年上海地区流感不同亚型流行株,采用实时细胞动态监测(RTCA)系统和传统倒置显微镜观察细胞CPE方法,检测磷酸奥司他韦的抗病毒效果。结果:实时细胞动态监测(RTCA)系统通过病变细胞引起电极板的电阻抗变化的观察,结果连续、实时、客观、可信;磷酸奥司他韦对研究中选取的14株上海地区不同亚型流感流行株有抑制病毒感染细胞的效果。结论:实时细胞动态监测系统比较于传统观察CPE方法,获取的实验信息实时、客观、敏感,但是实验费用昂贵。磷酸奥司他韦(达菲)对上海地区不同亚型流感病毒具有较好的体外抗病毒效果。
- 汪千力居丽雯蒋露芳张文宏高颖阳姜庆五
- 关键词：流感病毒奥司他韦无标记
- 郑州市流感和呼吸道合胞病毒感染住院病例的抗生素使用及合理性评估被引量：1
- 2022年
- 目的描述河南省郑州市流感和呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染住院病例的抗生素使用情况,评估抗生素使用的合理性。方法采用前瞻性病例系列研究,2018年11月—2019年11月在河南省儿童医院与郑州市中心医院分别纳入儿童和成人急性呼吸道感染住院病例,收集人口学和临床资料,采集呼吸道标本,使用Real-time PCR法检测流感病毒和RSV,分析流感和RSV感染病例合并细菌感染、抗生素使用及其合理性。结果共检出669例流感和RSV感染住院病例,38.4%(252/656)合并细菌感染,13例无法判断细菌感染情况。97.9%的病例住院期间使用抗生素,第三代头孢菌素(77.0%)、大环内酯类(20.3%)、青霉素和β-内酰胺酶抑制剂复合制剂(15.5%)、喹诺酮类(9.9%)和碳青霉烯类(7.9%)为常用的种类。从入院到使用抗生素的时间间隔为1.0(1.0,1.0)d,抗生素使用持续时间为6.0(5.0,8.0)d。抗生素用药频度和总费用分别为2.4(1.3,6.0)DDDs和369.7(210.6,1154.0)元/人。在655例使用抗生素的病例中,37.7%为合理使用,60.3%为不合理使用。结论郑州市流感和RSV感染住院病例抗生素使用的范围广、强度大、费用负担重,预防性或无指征用药等抗生素不合理应用普遍存在,抗生素管理仍待加强。
- 郭金鑫汪千力林莉张华任凌霜成怡冰张天琛梁露高延秋陈秋生金志鹏刘瑞华连鸿凯王江涛余宏杰
- 关键词：流感病毒呼吸道合胞病毒抗生素
- 一种分离培养多种病毒的方法
- 本发明属生物技术领域，涉及一种分离培养多种病毒的方法。尤其是用于分离培养多种病毒的MHV混合细胞液氮保存方法；本方法中，采用MEM冻存液，通过T75细胞瓶制备混合细胞MHV单层细胞，经EDTA-胰酶消化，直接悬浮于冷冻保...
- 居丽雯蒋露芳汪千力朱雯姜庆五
- 文献传递
- 上海地区2010年冬季甲型H1N1流行性感冒病毒株变异分析被引量：2
- 2012年
- 目的了解上海地区2010年冬季人群甲型H1N1流行性感冒（流感）病毒流行株基因及抗原的变异。方法采集2010年12月至2011年1月间上海地区哨点医院流感样患者咽拭子标本137份，接种犬。爵细胞（MDCK），分离流感病毒，直接免疫荧光法（DIF）鉴定流感病毒型，RT—PCR鉴定甲型H1N1，对部分甲型H1N1流感病毒株进行血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）、病毒聚合酶（PB2）片段全基因测序，分析基因及氨基酸位点变异。结果共分离到53株人流感病毒，48株为甲型H1N1流感病毒，按简单随机抽样法抽取19株测序。HA进化树分析发现，与2010年6月前分离的甲型H1N1毒株比较，绝大部分不位于同一主干上；HA蛋白的氨基酸位点分析显示，部分毒株在抗原决定位点上发生变异。NA蛋白酶活性中心及周围相关位点氨基酸组成保守，未检测到耐奥司他韦和扎那米韦的变异位点。PB2蛋白第627位和701位点分别是谷氨酸和天冬氨酸，仍是禽源流感病毒特征，但第677位点出现E677G突变。结论2010年冬季上海地区人群甲型H1N1流感病毒流行株与之前春夏季分离株比较已经有一定变异，出现了一些抗原漂移和在哺乳动物宿主内的适应性进化。
- 高颖阳居丽雯汪千力蒋露芳熊海燕朱雯姜庆五
- 关键词：抗原
- 混合细胞瓶对临床标本中流行性感冒病毒和肠道病毒的分离检测
- 2012年
- 目的比较犬。肾细胞系（MDCK）、人喉表皮癌细胞（Hep-2）和非洲绿猴肾细胞（Vero）制备的MHV混合细胞与相应单一敏感细胞株对流行性感冒（流感）病毒、肠道病毒的分离结果。方法流感样患者咽拭子标本接种MHV混合细胞和MDCK细胞，手足口病患儿咽拭子或粪标本接种MHV混合细胞和Veto细胞，观察病毒致细胞病变效应（CPE），采用多重反转录一聚合酶链反应（mRT-PCR）检测甲、乙型流感病毒和肠道病毒。结果MDCK和Vero细胞的CPE较MHV混合细胞明显。138份流感病毒接种MHV混合细胞，分离出34株流感病毒，分离率为24．6％；MDCK细胞分离出流感病毒39株，分离率为28．3％。MHV混合细胞与MDCK细胞流感病毒分离率比较，差异无统计学意义（X2=1．92，P〉0．05）。32株肠道病毒接种MHV混合细胞，分离出肠道病毒9株，分离率为28．1％；Vero细胞分离出12株肠道病毒，分离率为37．5％。MHV混合细胞与Vero细胞肠道病毒分离率比较，差异无统计学意义（X2=3．00，P〉0．05）。结论MHV混合细胞CPE不如单一细胞易于观察；MHV混合细胞适用于生物性突发公共卫生事件中，可分离培养临床标本中甲型、乙型流感病毒和表现为呼吸道症状的肠道病毒。
- 汪千力熊海燕申惠国居丽雯蒋露芳蔡韵姜庆五
- 关键词：正黏病毒科肠道病毒细胞分离
- 常用手消毒剂对人肠道病毒71型灭活效果的研究被引量：3
- 2012年
- 目的了解常用手消毒剂对人肠道病毒71型(HEV71)的灭活效果。方法采用悬液定量试验法进行试验观察。结果 A类消毒凝胶和B类手部消毒液分别作用1min和5min,对HEV71灭活对数值均>3.0;C类医用复方手消毒剂分别作用1min和5min,对HEV71灭活对数值均>4.0;自制乙醇甘油消毒液作用1min,对悬液内HEV71灭活对数值达5.5。结论目前市场销售常用手消毒剂对人肠道病毒均能达到消毒效果,自制乙醇甘油(77%乙醇、2%甘油)手部消毒液对人肠道病毒的杀灭效果理想。
- 朱雯王琰熊海燕蒋露芳徐洁汪千力居丽雯
- 关键词：人肠道病毒71型消毒剂灭活效果
- 介质表面的肠道病毒71型在不同气候条件下存活情况调查被引量：8
- 2012年
- 目的了解介质表面污染的肠道病毒71型（EV71）在不同温、湿度条件下的存活能力。方法将滴度为1×10^5半数组织培养感染剂量（TCID50）的EV71株均匀滴加在灭菌的塑料、橡胶、木块和布片介质表面，置人不同温、湿度气候条件的人工气候箱中，一定时间后回收介质表面病毒，回收液接种Vero细胞，观察致细胞病变效应（CPE）；每日监测不同气候条件下介质表面病毒存活情况。结果病毒在4种介质表面回收率为89％～93％；暴露在不同温、湿度条件下介质表面的EV71存活时间不同，在20℃、湿度80％的气候条件下病毒存活时间最长；塑料表面的病毒滴度在24h后下降lgTCID50值约为4，布片和木块表面的病毒滴度在72h后下降lgTCID50值约为4．5，72h后至少下降lgTCID50值为3．89。结论介质表面污染EV71存活时间受温、湿度气候条件影响，模拟的4种气候条件中，温度低、湿度高的条件病毒存活时间长；EV71在布片、木块表面的存活能力强于合成材质塑料表面。
- 蔡韵蒋露芳史妍李玉欣汪千力居丽雯姜庆五
- 关键词：手足口病肠道病毒A型
- 流感监测中流感病毒优势株在犬肾细胞系(MDCK细胞模型中竞争性复制的意义被引量：1
- 2013年
- 目的通过流感病毒优势株在犬肾细胞系(Madin-Daby canine kidney cells,MDCK)细胞中竞争性复制,探讨季节性流感流行株感染、复制能力强弱对主导流行株的贡献。方法在对2011年至2012年上海市闵行区季节性流感监测中,监测到流感样病例775例,确诊流感病例119例。选取2012年1月至2月流感病例中分离的3株B型和3株A/H3N2亚型流感流行株,两两交叉配对成9组,共同感染MDCK,细胞培养上清液抽提核酸,mRT-PCR扩增特异性产物。结果有7组共感染组合中A/H3N2(210bp)电泳条带逐渐变强、B型条带(390bp)逐渐变弱至第3代完全消失,2组中A/H3N2与B的条带至第3代均明亮。结论流感病毒共感染竞争性复制结果与当时人群流感监测中优势株转换相符。该方法为探讨可能引起主导流行株在人群中变迁的原因提供了研究思路。
- 汪千力居丽雯蒋露芳申惠国熊海燕朱雯蔡韵姜庆五
- 关键词：流感监测B型流感病毒共感染
