林文平
- 作品数：18 被引量：30H指数：4
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- 兔脊髓损伤后脑红蛋白的表达变化及其意义
- 2011年
- [目的]探讨兔脊髓损伤(SCI)后脑红蛋白(Ngb)的表达变化规律及其意义。[方法]健康新西兰大白兔48只,随机分为8组,采用球囊压迫SCI模型,应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白质印迹(West-ern blot)检测伤段脊髓组织Ngb mRNA和蛋白的表达变化情况。[结果]Ngb在正常兔脊髓组织内表达,SCI后6 hNgb表达逐渐增强,伤后24 h达到高峰;随后逐渐下降但维持较高水平至损伤后72 h,伤后7 d Ngb表达接近正常水平。[结论]Ngb存在于正常的脊髓组织内,Ngb的高表达与SCI的时间密切相关,SCI后Ngb表达上调是机体内源性保护机制之一。
- 陈宣维林建华林文平陈飞韦超
- 关键词：脊髓损伤脑红蛋白实时荧光定量PCR蛋白质印迹
- HO-1基因过表达降低NLRP1表达对大鼠脊髓损伤的保护作用及机制研究
- 目的：观察腺相关病素(AAV)介导的血红素氧合酶-1(HO-1)基因过表达对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经功能恢复的影响，并探讨其可能机制。方法：制备HO-1腺相关病素载体并在SCI前7d注入实验大鼠脊髓组织。以实时荧光定...
- 林文平柯庆峰施进兴
- 关键词：血红素氧合酶-1脊髓损伤
- HO-1基因过表达阻断Cdc42-MLK3-MKK7-JNK3信号通路对大鼠脊髓损伤的抗凋亡作用
- 目的：观察腺相关病素(AAV)介导的血红素氧合酶-1(HO-1)基因过表达对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经功能恢复的影响,并探讨其可能机制。方法：将健康雄性SD大鼠用压迫损伤法构建大鼠SCI模型,随机分成4组：正常对照组(...
- 林文平柯庆峰施进兴王思远
- 关键词：血红素氧合酶-1脊髓损伤凋亡
- 腺相关病毒介导血红素加氧酶-1基因转移对大鼠脊髓损伤的保护作用被引量：3
- 2018年
- 目的观察血红素加氧酶-1（HO-1）过表达对脊髓损伤（SCI）后运动功能恢复的影响，并探讨其机制。方法96只健康雄性SD大鼠，应用完全随机法分为假手术组（Sham组）、单纯SCI组（SCI组）、空载体组[AAV-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）组]和HO-1过表达腺相关病毒载体组（AAV-HO-1组），采用重物压迫脊髓损伤模型；采用Basso-Beattie-Bresnahan （BBB）评分评估大鼠后肢运动功能；原位缺口末端标记法（TUNEL）检测脊髓组织细胞凋亡；荧光显微镜下观察EGFP表达；免疫荧光染色显示脊髓组织中神经元核性蛋白（NeuN）阳性细胞的表达；Western blot测定脊髓组织中HO-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）蛋白表达。结果SCI后1 d，可观察到AAV-EGFP组和AAV-HO-1组脊髓组织有EGFP表达；AAV-HO-1组与SCI组和AAV-EGFP组比较，凋亡细胞数量[分别为（21.50±8.02）%、（49.83±13.60）%、（44.83±11.74）%]、bax蛋白表达量（分别为1.15±0.19、1.96±0.24、1.77±0.30）明显减少，差异有统计学意义（分别为F＝30.630，P＝0.000；F＝29.900，P＝0.000），而AAV-HO-1组与SCI组和AAV-EGFP组比较，HO-1（分别为1.96±0.28、1.48±0.23、1.54±0.16）、bcl-2蛋白表达量（分别为0.69±0.13、0.35±0.11、0.29±0.10）明显增加，差异有统计学意义（分别为F＝23.900，P＝0.000；F＝68.140，P＝0.000）；SCI后7、14、21 d，AAV-HO-1组BBB评分[分别为（8.00±1.79）、（11.67±2.16）、（13.83±2.22）分]明显高于SCI组[分别为（5.17±1.94）、（6.17±1.72）、（7.50±1.97）分]和AAV-EGFP组[分别为（4.67±1.51）、（5.67±1.86）、（7.17±2.14）分]，差异有统计学意义（分别为F＝152.900，P＝0.000；F＝109.700，P＝0.000；F＝75.880，P＝0.000）。SCI后21 d，AAV-HO-1组（108.5±27.74）的NeuN阳性细胞较SCI组（50.00±20.93）和AAV-EGFP组（55.83±13.57）明显增加，差异有统�
- 林文平王思远郑煜晖柯庆峰施进兴肖丹蕊
- 关键词：脊髓损伤腺相关病毒血红素加氧酶-1基因治疗
- 胶原-壳聚糖/胶原-纳米羟基磷灰石仿生支架材料的制备及其生物相容性检测被引量：9
- 2012年
- 目的制备胶原-壳聚糖/胶原-纳米羟基磷灰石(collagen-chitosan/nano-hydroxyapatite-collagen-polylactic acid,Col-CS/nHAC-PLA)仿生支架材料,检测生物相容性,为其在骨软骨缺损修复中的应用奠定基础。方法以1,4二氧六环为溶剂,按8%质量浓度加入PLA和等量nHAC溶解,制备nHAC-PLA;用2%醋酸溶液配制浓度为2%的CS纯溶液及1%的Col纯溶液,以质量比(M/M)20∶1混合,倒入含nHAC-PLA的模具中,冷冻干燥成形制备Col-CS/nHAC-PLA仿生支架。行急性全身毒性实验、皮内刺激实验、热源实验、溶血实验、体外细胞毒实验、骨植入实验,评价其生物相容性。结果 Col-CS/nHAC-PLA仿生支架无急性全身毒性;皮内刺激实验示原发刺激指数为0分,为极轻微刺激;热原实验示3只实验动物体温升高均<0.6℃,体温升高总和<1.3℃,符合规定标准;溶血实验示平均溶血率为1.38%,符合≤5%标准。体外细胞毒性实验示材料浸提液不影响兔BMSCs增殖,毒性分级为Ⅰ级。骨植入实验显示支架材料与周边组织相容性好。结论 Col-CS/nHAC-PLA仿生支架材料具有良好生物相容性,有望成为较理想的组织工程骨软骨支架。
- 林建华赖建明林文平吴朝阳许胜贵
- 关键词：生物相容性
- β-干扰素对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的影响被引量：1
- 2017年
- 目的初步探讨β-干扰素对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的影响。方法 SD成年大鼠40只随机分成A组(脊髓损伤组)、B组(甲基强的松龙干预组)、C组(β-干扰素干预组)、D组(假手术组)各10只,用改良的Allen装置撞击大鼠脊髓胸9~10节段建立脊髓损伤模型,术后各组予相应干预处理。采用BBB评分、改良Tarlov评分和斜板实验方法观察大鼠行为学改变情况,于术后第1、3、7、14和21天对大鼠急性脊髓损伤后不同时段的脊髓神经功能进行评分。结果大鼠急性脊髓损伤后BBB评分、改良Tarlov评分和斜板实验分值均近0,随着时间进展评分逐渐升高,B、C组升高明显,干预治疗的B、C组与A组相比7d内无显著变化(P>0.05),14d时有显著变化(P<0.05);但B组与C组比较无显著变化(P>0.05)。结论β-干扰素应用有利于大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复,其作用机制需要进一步研究。
- 吴世强徐杰林文平
- 关键词：Β-干扰素脊髓损伤神经功能评分
- 兔激素性股骨头坏死血清中肿瘤坏死因子α（变化被引量：3
- 2010年
- 目的：通过建立兔激素性股骨头缺血性坏死（SANFH）动物模型，分析肿瘤坏死因子α（TNF—α）在SANFH中的变化。方法：将健康新西兰兔30只随机分成空白组和模型组，每组15只。模型组每只用马血清10·ml／kg耳缘静脉注射，2周后重复用药1次。在末次用药后2周以醋酸泼尼松龙7．5mg／kg腹腔注射，1次／d，连用3d。动物注射激素5周后测血清中TNF—α水平。结果：模型组兔血清TNF—α水平较空白组明显偏高（P〈0．01）。结论：血清TNF—α水平升高可能是SANFH发病的重要因素。
- 张楠心陈宣维林文平
- 关键词：股骨头坏死肿瘤坏死因子Α
- 兔骨髓基质干细胞体外培养的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的:研究兔骨髓基质干细胞(MSC)的体外分离、培养和增殖,探讨其生物学特性。方法:自兔髂骨抽取骨髓,采用密度梯度离心法分离纯化MSC,并培养、增殖。观察MSC的生长情况及形态学特点,绘制细胞生长曲线,同时计算贴壁率。结果:体外培养的兔MSC贴壁生长,呈长梭形,可增殖形成克隆;生长曲线为典型的S形曲线;MSC的贴壁率高,第3代培养14h贴壁率达90%以上。结论:用密度梯度离心法分离MSC是可行的。分离获得的MSC体外培养显示,MSC生长稳定,增殖速度快。MSC将是骨组织工程理想的种子细胞。
- 陈宣维林文平林建华
- 关键词：骨髓基质干细胞细胞培养
- 慢病毒介导兔脑红蛋白基因感染骨髓间充质干细胞的实验研究被引量：1
- 2011年
- [目的]构建携带兔脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)基因的重组慢病毒,感染兔骨髓间充质干细胞(bonemarrow mesenchymal stem cells,BMSCs),建立稳定表达兔Ngb的BMSCs/Ngb细胞。[方法]构建携带Ngb基因的重组慢病毒载体,在脂质体Lipofectamine 2000作用下转染293 T细胞,Real-time PCR检测慢病毒滴度;以Ngb重组慢病毒感染BMSCs,通过荧光表达法判定感染复数(multiplicities of infection,MOI),实时荧光定量PCR(real-time PCR)、蛋白质印迹(Western blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)判定感染后的BMSCs中Ngb的表达情况。[结果]构建Ngb重组慢病毒载体,经酶切及测序鉴定完全正确,能够转染293 T细胞并表达,滴度为2×108 TU/ml,Ngb重组慢病毒感染BMSCs最佳MOI值为100,且Ngb重组慢病毒感染BMSCs能持续稳定高水平表达Ngb mRNA和蛋白。[结论]成功构建Ngb重组慢病毒,并将Ngb基因稳定感染至BMSCs中,实现Ngb的持续稳定高水平表达,为Ngb基因修饰的BMSCs移植治疗脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的研究提供基础。
- 陈宣维林文平林建华
- 关键词：脑红蛋白慢病毒骨髓间充质干细胞脊髓损伤
- 兔激素性股骨头坏死血清中的血管内皮生长因子和肿瘤坏死因子a变化
- 2009年
- 目的通过建立兔激素性股骨头缺血性坏死（sANFH）动物模型，分析血管内皮生长因子（VEGF）和肿瘤坏死因子a（TNF—a）在SANFH中的变化。方法将健康新西兰兔50只随机分成空白组和模型组，每组15只。模型组每只用马血清10ml／kg耳缘静脉注射，2周后重复用药1次。在末次用药后2周以醋酸泼尼松龙75mg／kg腹腔注射，1次／d，连用3d。动物注射激素5周后测血清中VEGF和TNF-a水平。结果模型组兔血清VEGF水平较空白组明显偏低（P〈0.01），TNF-a水平较空白组明显偏高（P〈0.01）。结论血清VEGF水平降低及TNF—a水平升高可能是SANFH发病的重要因素。
- 陈宣维林文平
- 关键词：股骨头坏死肿瘤坏死因子A血管内皮生长因子
