杨清俊
- 作品数:4 被引量:16H指数:2
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- 梓醇对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用被引量:7
- 2013年
- 目的:探讨梓醇对高糖诱导SH-SY5Y神经细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:将细胞随机分为对照组、凋亡组、梓醇组、梓醇保护组及甘露醇组。凋亡组用含50 mmol/L葡萄糖的培养液培养SH-SY5Y细胞48 h;梓醇保护组的培养液中分别加入1、2、4 mg/ml梓醇和50 mmol/L葡萄糖,培养48 h。通过MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst-33258染色观察细胞核形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中8-羟基脱氧鸟苷酸(8-hydoxydeoxyguanosine,8-OHdG)的含量。结果:与对照组相比,凋亡组细胞存活率明显降低;细胞凋亡率明显升高;Hoechst33258染色细胞核出现凋亡小体;上清中8-OHdG含量明显升高。与凋亡组相比,1,2,4 mg/ml梓醇保护组细胞存活率均明显升高;Hoechst33258染色发现细胞核形态明显改善,细胞核固缩减少;梓醇保护组细胞凋亡率及上清液中8-OHdG的分泌量均明显降低。结论:梓醇对高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与梓醇的抗氧化作用有关。
- 杨清俊李宗泽朱艳凌杨菁
- 关键词:梓醇高糖SH-SY5Y细胞8-OHDG
- 肌肽对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用被引量:5
- 2013年
- 目的探讨肌肽对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。方法 SH-SY5Y细胞用含葡萄糖50mmol·L-1的高糖培养液和肌肽0.6,3和15mmol·L-1的培养液培养48h,相差显微镜下观察细胞形态的变化;MTT比色法测定细胞存活率;Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;CDFH-DA探针法检测细胞中活性氧(ROS)的水平,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)的含量。结果与正常组(低糖培养基)相比,高糖组细胞存活率明显降低(P<0.01);Hoechst33258染色发现细胞核固缩裂解,呈凋亡特征性改变;细胞凋亡率、细胞中ROS的水平、上清液中8-OHdG的分泌量明显升高(P<0.01)。与高糖组相比,肌肽0.6,3和15mmol·L-1组细胞存活率明显升高(P<0.01);Hoechst33258染色发现细胞核核固缩裂解减少,形态明显改善;细胞凋亡率分别降低至(20.65±1.13)%,(14.95±0.64)%和(9.95±0.61)%(P<0.01);细胞中ROS的水平分别降低至(182±16)%,(168±15)%和(140±10)%(P<0.05);上清液中8-OHdG的分泌量均明显降低,分别为2.780±0.154,2.136±0.100和(1.864±0.151)μg·L-1(P<0.01)。单纯肌肽组的细胞存活率、细胞核形态以及细胞凋亡率与正常组相比无显著差异,细胞中ROS水平和上清液中8-OHdG的分泌量均有所降低,分别为(88±9)%和(0.380±0.023)μg·L-1(P<0.05)。甘露醇组的各项指标与正常组相比无显著差异。结论肌肽对高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与肌肽的抗氧化作用有关。
- 李宗泽杨清俊朱艳凌刘影杨菁李敏
- 关键词:高糖细胞凋亡肌肽8-羟基脱氧鸟苷酸
- 胰岛素降低海马谷氨酸和D-丝氨酸含量改善糖尿病大鼠空间学习记忆能力被引量:2
- 2013年
- 目的观察胰岛素对糖尿病(DM)大鼠空间学习记忆及海马组织中谷氨酸和D-丝氨酸含量的影响。方法采用尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠DM模型。注射STZ第3天建模成功后,大鼠sc给予胰岛素2 U·kg-1,每天1次,持续82 d。定期检测各组大鼠体质量及空腹血糖。第81天进行Morris水迷宫实验,检测大鼠学习记忆能力;实验结束后取海马组织,观察形态变化,并测定谷氨酸和D-丝氨酸含量。结果与正常对照组比较,DM模型组大鼠体质量明显减轻(P<0.01),血糖明显升高(P<0.01),逃避潜伏期明显延长,原平台象限游泳时间显著减少(P<0.01),海马组织中谷氨酸及D-丝氨酸的含量均显著升高(P<0.01)。胰岛素治疗组体质量增加,血糖含量恢复到正常水平。与DM模型组相比,胰岛素治疗组大鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),原平台象限游泳时间占总时间百分比显著增加(P<0.01);海马组织中谷氨酸和D-丝氨酸的含量也分别由DM模型组的(1.550±0.054)和(0.084±0.05)mg·g-1下降为胰岛素治疗组的(1.137±0.023)和(0.068±0.004)mg·g-1。结论胰岛素可以改善糖尿病大鼠空间学习记忆能力,这可能与其降低海马组织中谷氨酸和D-丝氨酸含量有关。
- 杨菁杨岳宋扬杨清俊李宗泽张永兴王洪新
- 关键词:糖尿病学习记忆海马谷氨酸D-丝氨酸
- 高糖对高钾刺激引起新生大鼠星形胶质细胞谷氨酸释放和再摄取的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探讨高糖对高钾刺激引起星形胶质细胞谷氨酸释放和再摄取的影响。方法胶质原纤维酸性蛋白免疫染色法鉴定培养的星形胶质细胞纯度。星形胶质细胞分别用含葡萄糖5,10,20和40 mmol.L-1的细胞外液培养1 h,然后加入氯化钾75 mmol.L-1,于0,1,2,3,4和5 min后分别取细胞培养液。用柱前邻苯二甲醛和N-异丁酰基-D-半胱氨酸衍生高效液相色谱法测定细胞培养液中谷氨酸含量。结果培养的星形胶质细胞纯度在95%以上。不同浓度葡萄糖的细胞外液孵育星形胶质细胞0,1和3 h细胞培养液中谷氨酸含量无明显变化。氯化钾75 mmol.L-1孵育1,2,3,4和5 min后,含葡萄糖10,20和40 mmol.L-1组细胞培养液中谷氨酸含量均比对应时间点含葡萄糖5 mmol.L-1组明显升高(P<0.01),葡萄糖5和10 mmol.L-1组谷氨酸含量在3 min达到峰值,葡萄糖20 mmol.L-1组4 min达峰值;葡萄糖40 mmol.L-1组3 min谷氨酸含量升高最明显,4 min短暂下降后5 min又明显升高。结论高糖能够促进星形胶质细胞谷氨酸的释放和抑制再摄取。
- 庞磊杨岳杨菁宋扬于涛杨清俊李宗泽王洪新
- 关键词:星形胶质细胞高钾高糖谷氨酸