李洪涛
- 作品数：8 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术更多>>
- 鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性研究被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性。方法:首先用纸片扩散法检测64株临床鲍曼不动杆菌对8种抗菌药物的敏感性;将其分为A组(0～2种抗生素耐药)、B组(对3～5种抗生素耐药)和C组(对6～8种抗生素耐药);检测64株临床鲍曼不动杆菌对罗丹明6G的外排情况,筛选出罗丹明6G外排明显增加的菌株;并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测主动外排泵基因AdeABC的表达水平。结果:64株鲍曼不动杆菌中有4株对0～2种抗生素耐药(A组),对3～5种抗生素耐药的有33株(B组),对6～8种抗生素耐药的有27株(C组);多重耐药组鲍曼不动杆菌罗丹6G外排明显增高,外排程度A组
- 周秩权夏忠弟李乐李洪涛邓俊范志茹叶亚菲
- 关键词：鲍曼不动杆菌主动外排泵多重耐药
- HIV-1 Tat真核表达载体的构建及在Huh-7细胞中表达
- 2008年
- 目的构建1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)反式激活因子(Tat)基因真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞中的有效表达。方法以含有HIV-1全长基因的质粒pNL4-3为模板,通过PCR扩增HIV-1tat第一外显子,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入真核表达质粒pCDNA3.1(+),构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入人体肝癌细胞系Huh-7细胞。RT-PCR检测其基因转录情况,Westernblot鉴定其是否能够表达相应的目的蛋白质。结果成功扩增了Tat基因,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,RT-PCR和Westernblot方法证实该质粒能在Huh-7真核细胞中有效表达HIV-1Tat目的蛋白质。结论成功构建了HIV-1Tat基因的真核表达质粒载体,并在Huh-7细胞中表达,为在Huh-7细胞模型中研究Tat的功能奠定了基础。
- 李洪涛刘水平谭宇蓉李乐周秩权
- 关键词：HUH-7细胞
- 结构域Ⅰ缺失的丙型肝炎病毒5′NCR调控荧光素酶基因的表达被引量：1
- 2007年
- 目的:分析丙型肝炎病毒(HCV)5′端非编码区(NCR)的结构域Ⅰ序列在其翻译启动活性中的作用。方法:以质粒pCMVN CRluc为模板,PCR扩增分别得到缺失5′端20nt和43nt的HCV 5′NCR片段,并分别替换pCMVNCRluc中的完整HCV 5′NCR,构建结构域Ⅰ缺失的HCV 5′NCR调控萤火虫荧光素酶(luc)基因表达的真核表达质粒(pCN1-d1、pCNl-d2)。以脂质体方法转染人肝癌细胞株HepG2,用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶相对于内参考的海肾荧光素酶表达活性,同时采用RT-PCR方法检测转染后细胞中萤火虫荧光素酶基因的相对表达水平。结果:酶切和测序结果表明,各重组质粒构建成功。各重组质粒转染细胞后luc mRNA的相对表达水平与pCMVNRluc相比差异无显著性(P＞0．05);pCNl-dl、pCNl-d2表达的荧光素酶活性与pCMVNCRluc差异无显著性(P＞0．05)。结论:HCV 5′NCR的5′端20nt和43nt序列缺失不影响它的翻译启动活性。
- 杨滔赵俊琴刘水平李洪涛李建华
- 关键词：丙型肝炎病毒荧光素酶
- 一种超高温陶瓷及铜化物改性C/C复合材料的快速制备方法
- 本发明公开了一种超高温陶瓷及铜化物改性C/C复合材料的快速制备方法，复合材料由超高温陶瓷、铜化物、热解炭及炭纤维增强体组成；制备方法包括以下步骤：(1)以超高温陶瓷粉末和炭纤维为原料，采用粉末与炭纤维预制体混编方法制备超...
- 杨鑫刘忠国左远名李洪涛黄启忠
- 丙型肝炎病毒5’端非编码区结构域Ⅱ在其翻译启动活性中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的分析丙型肝炎病毒（HCV）5’端非编码区（NCR）的结构域Ⅱ序列（nt44—118）在其翻译启动活性中的作用。方法用PCR扩增技术获得缺失5’端118nt的截短型HCV5’NCR片段，并以之替换萤火虫荧光素酶（Fluc）真核表达质粒pCMVNCRluc中的完整HCV5’NCR，构建截短型HCV5’NCR调控Fluc基因表达的真核表达质粒pCNl-d3。将pCNl-d3、pCMVNCRluc和pCMVNCRluc缺失HCV5’NCRntl-43后的重组质粒pCNl-d2以脂质体方法分别转染人肝癌细胞株HepG2，用双荧光素酶报告基因检测系统检测Fluc相对表达活性，RT-PCR检测FlucmRNA的相对表达水平。结果酶切和测序结果表明，重组质粒构建成功。各质粒转染细胞后FlucmRNA的相对表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）；pCNl—d2表达的荧光素酶活性与pCMVNCRluc差异无统计学意义（P〉0．05），pCN1-d3的Fluc活性显著低于pCMVNCRluc（P〈0．01）。结论HCV5’NCR的结构域Ⅱ（nt44—118）含有其发挥翻译启动功能的重要序列。
- 刘水平赵俊琴李洪涛杨滔
- 关键词：肝炎病毒荧光素酶
- 鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合酶基因在生物被膜内的表达及耐药分析被引量：14
- 2008年
- 目的:研究携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌在生物被膜状态和普通液相培养状态下Ⅰ类整合酶基因(Class Ⅰ integrase gene,intI 1)mRNA的表达,并分析Ⅰ类整合子阳性菌耐药情况。方法:收集鲍曼不动杆菌临床株,并经过基因扩增筛选出携带Ⅰ类整合子的阳性菌株。提取携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌在生物被膜和液相培养2种生长状态下的总RNA,采用半定量RT-PCR方法分析2种生长状态下细菌的Ⅰ类整合酶表达情况。并用纸片扩散法对携带Ⅰ类整合子的临床分离鲍曼不动杆菌进行药敏试验。结果:携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌在生物被膜状态和液相培养状态下均有intI 1基因mRNA表达。但生物被膜生长状态下的intI 1mRNA表达量高于液相培养状态下表达量约4倍。在收集的64株鲍曼不动杆菌中有46株携带intI 1基因,而且Ⅰ类整合子基因盒阳性菌株的部分耐药率高于整合子基因阴性的菌株。结论:鲍曼不动杆菌在生物被膜状态intI 1mRNA的表达上调,Ⅰ类整合子在细菌耐药中发挥作用。提示整合子在生物被膜状态下可进行更活跃的基因捕获。
- 李乐夏忠弟胡朝晖周秩权李洪涛
- 关键词：鲍曼不动杆菌生物被膜RT-PCR
- HIV-1 Tat蛋白对HCV RNA复制和蛋白表达的影响
- 目的：人类免疫缺陷病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染成全球分布，二者传播途径相同，混合感染率极高，且互相影响临床结局，但其机制尚不清楚。HIV Tat蛋白是HIV重要的调控蛋白，不仅能反式激活HIV的转录，还能促...
- 李洪涛
- 关键词：免疫缺陷病毒丙型肝炎病毒蛋白表达分子机制
- 文献传递
- C/C-SiC-HfC复合材料的微观结构及力学性能研究
- 2022年
- 采用炭纤维和陶瓷粉末混编技术将HfC粉引入到炭纤维预制体中,制备了含有HfC超高温陶瓷粉末的炭纤维预制体;随后采用化学气相渗透(CVI)和先驱体浸渍裂解工艺(PIP)制备了密度高达1.94 g/cm^(3)的C/C-SiC-HfC复合材料,分析了复合材料的微观结构及力学性能。结果表明,制备的复合材料主要由C、SiC及HfC等物相组成,复合材料的平均弯曲强度达到了78.3 MPa,平均压缩强度为127.9 MPa;断裂过程中,断口处出现明显的裂纹扩展、纤维拔出及脱粘现象,从而使得材料呈现出一定的假塑性断裂特征。
- 李洪涛杨鑫黄启忠张泽巴开勋
- 关键词：基体改性力学性能
