李国栋
- 作品数：11 被引量：16H指数：3
- 供职机构：北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 肿瘤相关抗原CHP2促进HEK293细胞在裸鼠腹腔内的转移被引量：3
- 2009年
- 目的:研究肿瘤相关抗原CHP2对HEK293细胞在裸鼠腹腔内转移能力的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:通过Boyden小室法检测CHP2转染细胞和对照细胞的体外转移能力。对BALB/c裸鼠进行腹腔接种,观察裸鼠体内的成瘤与组织浸润情况并进行HE染色。利用RT-PCR方法检测HEK293细胞中部分转移相关分子的基因表达水平。结果:CHP2增强HEK293细胞在体外穿过Matrigel胶的侵袭能力,同时显著加速HEK293细胞在裸鼠腹腔内的成瘤速度并促进肿瘤对腹腔主要脏器的浸润。CHP2上调转移相关分子骨桥蛋白(osteopon-tin,OPN)在HEK293细胞中的表达,但对基质金属蛋白酶MMP2的表达没有明显影响。结论:CHP2显著增强HEK293细胞在体外及裸鼠腹腔内的转移能力,OPN表达上调可能参与CHP2对HEK293细胞的转移促进作用。
- 钱晓萍孙秀媛李国栋张毓陈慰峰
- 关键词：肿瘤转移
- DNA印迹法和实时定量PCR法在端粒长度测定中的应用比较被引量：4
- 2013年
- 目的:分析并比较测量端粒长度的DNA印迹法和实时定量PCR法在细胞衰老实际研究中的性能。方法:从不同代数(population doublings,PDs)的正常人成纤维细胞(2BS)中提取基因组DNA作为测试样本;对测量端粒长度的DNA印迹法和实时定量PCR法进行优化,以点杂交的方式分析地高辛配基标记检测系统的特异性和灵敏度;分别用两种方法反复测定同一样本的平行样或不同样本并分析比较两种方法测量端粒的分辨率和精确度。结果:实际测量端粒时,地高辛配基标记检测系统虽可检测出小于1μg的基因组DNA,但最优样本量为4～5μg;DNA印迹法的分辨率约为150 bp,实时定量PCR法的分辨率约为300～400 bp,前者可分辨代龄相差少至2 PDs的2BS细胞端粒长度的差异,而后者只能分辨代龄相差5 PDs以上的端粒差异;实时定量PCR法重复测量误差超过10%,远大于DNA印迹法的2.5%(P<0.001)。结论:地高辛配基标记的DNA印迹检测系统完全适用于测量端粒长度,且性能优于实时定量PCR法,但后者方便快捷,可高通量处理样本,所以在细胞衰老研究中,应根据具体情况合理选择相应方法。
- 高凌云李国栋童坦君
- 关键词：端粒印迹法DNA实时定量聚合酶链反应地高辛配基衰老
- 白细胞介素-6参与肿瘤相关抗原HCA520对HEK293细胞的促增殖作用被引量：1
- 2005年
- 目的:研究肿瘤相关抗原HCA520对HEK293细胞增殖的影响,获得HCA520生物学功能的初步提示。方法:构建pcDNA3 HCA520 flag真核表达载体转染HEK293细胞并建立稳定转染细胞系,利用MTT实验观察HCA520对HEK293细胞增殖速率的调节。通过RT PCR检测可能参与HCA520对HEK293细胞增殖促进作用的相关分子,并用3 (4, 5 二甲基2 噻唑) 2, 5 二苯基溴化四唑(MTT)实验进一步验证目标分子对HEK293细胞增殖的作用。结果:MTT实验结果显示HCA520显著提高HEK293细胞的增殖速率,HCA520上调白细胞介素6在HEK293细胞中的表达,后者部分参与HCA520对HEK293细胞的促增殖作用。结论:HCA520对HEK293细胞的增殖具有促进作用,并推测可能通过促进细胞恶性增殖在肿瘤发生中发挥作用。
- 钱晓萍李国栋韩克军陈慰峰
- 关键词：HEK293细胞白细胞介素-6肿瘤相关抗原促增殖作用细胞恶性增殖MTT实验
- 基于ARCH噪声的双线性建模
- 在非线性时间序列分析中有两个非常令人感兴趣的模型:双线性模型和ARCH模型.由于具有非常强的实际应用背景,所以现在ARCH模型是人们讨论的热点之一.但是对于双线性模型而言,到目前为止,几乎所有的文献都离不开噪声是独立同分...
- 李国栋
- 关键词：非线性时间序列ARCH平稳解
- 不同鼠龄小鼠脾细胞对过氧化氢诱导DNA损伤的修复能力被引量：1
- 2011年
- 目的观察青年鼠和老年鼠脾细胞对过氧化氢(H2O2)诱导DNA损伤的修复能力的差异。方法通过S1核酸酶消化实验,对比分析两组小鼠脾细胞在H2O2刺激前后单链DNA的比例及修复程度。通过非程序性DNA合成(UDS)实验观察脾细胞在H2O2刺激后的切除修复水平。结果两组小鼠脾细胞的单链DNA含量与处理前相比均有明显提高,但修复后,青年鼠单链DNA含量的下降比例(13.4%)显著大于老年鼠(6.8%)(P<0.05)。UDS实验表明,两组小鼠均在DNA损伤大约12 h后达到修复高峰,但老年鼠的绝对修复水平大约只有青年鼠的1/3(P<0.01)。结论青年鼠和老年鼠脾细胞对H2O2刺激具有类似的敏感性,但DNA的修复能力随小鼠的增龄显著降低。H2O2通过加速DNA损伤的积累从而促进细胞衰老。
- 李国栋阎雪冬童坦君张宗玉
- 关键词：过氧化氢脾细胞DNA修复
- 延缓衰老相关的小分子物质研究进展被引量：4
- 2010年
- 筛选、研究具有延缓衰老作用的小分子物质,对于发现新的治疗衰老相关性疾病及肿瘤等的有效靶点、开发新型药物、促进人类健康具有重大的现实意义.同时更重要的是,可以这些小分子物质为切入点,对衰老、肿瘤等生命现象的具体分子机制进行深入研究,这对于分子生物学等相关生命科学研究的发展具有重要的推动作用.总结了近一二十年来发现的一些具有代表性的可延缓衰老的小分子物质,并重点论述了其作用的分子机制.
- 高凌云李国栋童坦君
- 关键词：衰老SIRT1晚期糖基化终末产物TOR热量限制
- CHP与钙调神经磷酸酶的活性调节被引量：3
- 2004年
- 作为惟一受Ca2 + 调节的蛋白磷酸酶 ,钙调神经磷酸酶 (CN)在多种生物学过程中发挥关键性的调控作用 ,包括T细胞活化 ,记忆的形成 ,心肌肥大的发生 ,细胞周期调控等 .CN的丝 /苏氨酸蛋白磷酸酶活性受Ca2 + /Calmodulin等诸多生物因子的共同调节 ,其中钙调神经磷酸酶B亚基同源蛋白 (CHP)是最近研究较多的CN调节分子之一 .近年来CN的研究进展主要体现在其生物学功能 ,相关信号传导通路及活性调节等方面 .
- 李国栋王月丹陈慰峰
- 关键词：钙调神经磷酸酶活性调节CHP细胞生物学
- 人肿瘤相关抗原CHP2(HCA520)的功能分析
- 李国栋
- 人胚肺二倍体成纤维细胞衰老过程中Wnt信号抑制因子DKK4的表达被引量：1
- 2010年
- Dickkopf家族蛋白DKK4是经典Wnt信号通路的抑制因子.为研究其在人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)复制性衰老过程中的作用机制及生理学意义,使用Wnt/β-联蛋白通路的激活剂氯化锂(LiCl)和抑制剂DKK1作用于2BS,同时利用免疫荧光技术分析衰老过程中细胞因子的定位.结果显示,在2BS复制性衰老的过程中,DKK4表达水平下降,而这种下降是β-联蛋白/TCF介导完成的.而在衰老过程或较高的过氧化物水平下,细胞核内转录因子FoxO4增多.由此得出结论:在衰老过程中,β-联蛋白/TCF下游靶基因DKK4表达下调,降低了对经典Wnt通路的抑制,使胞内β-联蛋白处于较高水平.较高水平的β-联蛋白在高过氧化物的微环境中,与FOXO家族转录因子相互作用,激活其下游靶基因,促进了衰老的发生发展.
- 崔明李国栋童坦君
- 关键词：WNT信号通路
- 人胚肺成纤维细胞复制性衰老的基因表达变化被引量：1
- 2012年
- 目的检测人胚肺成纤维细胞(2BS细胞)复制性衰老过程中的基因表达变化,并试图寻找细胞衰老的标志性基因。方法利用cDNA芯片对比检测28代龄和64代龄的2BS细胞基因表达谱,通过RT-PCR对挑选的9个差异基因在7个不同代龄2BS细胞中的表达进行验证分析。结果和年轻细胞相比,衰老2BS细胞有117种基因的变化幅度在2倍以上,46种基因在2.5倍以上;细胞衰老过程中下调的基因主要是细胞周期相关基因,上调基因主要参与细胞应激反应和蛋白分泌等过程;9个差异基因的RT-PCR验证结果与芯片结果基本一致。结论基因芯片是研究细胞衰老基因表达和调控网络的重要工具,可用于衰老特征性基因的筛选。
- 李国栋马宏童坦君张宗玉
- 关键词：细胞衰老基因芯片基因表达
