李克秀 作品数:5 被引量:15 H指数:2 供职机构: 长春工业大学化学与生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
野生大豆核基因组Mb级DNA的制备与酶切 2011年 以野生大豆黄化幼苗为材料提取其细胞核DNA,经LMP包埋并用蛋白酶K裂解其中的核蛋白后,采用脉冲电泳回收2 Mb左右细胞核DNA。用HindⅢ对回收细胞核DNA进行部分酶切并用脉冲电泳回收酶切后的DNA片段,经电洗脱、浓缩和透析后DNA溶液浓度可达10 ng.μL-1。连接转化检测结果表明:该DNA可用于后续野生大豆基因组可转化人工染色体(TAC)文库的构建和基因组分析。 李晓玲 李克秀 赵洪锟 董英山关键词:野生大豆 脉冲电泳 星星草和朝鲜碱茅组织培养体系的建立 被引量:10 2010年 分别以星星草和朝鲜碱茅成熟胚为外植体,建立组织培养体系。结果表明,星星草和朝鲜碱茅成熟胚在MS+300 mg/L CH+4.0 mg/L 2,4-D+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH5.8)培养基上,愈伤组织诱导率可分别达到53.3%和46.7%。经MS+300 mg/LCH+1.0 mg/L 2,4-D+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH5.8)继代培养基中继代培养后,星星草和朝鲜碱茅胚性愈伤组织在MS+300 mg/L CH+1.0 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH5.8)分化培养基上,分化率分别达到了82.5%和75.7%。两种牧草再生苗生根移栽后成活率均可达到95%以上。 李晓玲 李克秀 于晓明关键词:星星草 朝鲜碱茅 成熟胚 可转化人工染色体(TAC)文库载体DNA的制备 2011年 对可转化人工染色体(TAC)pYLTAC747NH/sacB文库载体DNA的制备条件进行了较系统的摸索和研究。结果表明,该文库载体经碱裂解法提取、QIAGEN Plasmid Mini kit纯化后,可获得较纯净的载体DNA。对其闭环载体DNA分别用不同酶量的Hind III酶切处理,经琼脂糖凝胶电泳检测得出其最佳Hind III完全酶切条件为2 U Hind III/μg闭环载体DNA、37℃酶切30 min;分别用0.5 MBU和1 MBU HK脱磷酶/μg对其线性载体DNA进行脱磷处理,经电泳和载体自连产物电转化检测表明其适宜的完全脱磷条件为1 MBU HK脱磷酶/μg线性载体DNA,30℃脱磷1 h;将所制备的线性载体DNA与λDNA/Hind III酶切片段进行连接,连接产物转化频率较高,其电转化大肠杆菌DH10B感受态细胞频率可达到9.6×108。 李晓玲 李克秀 赵洪锟 赵茂林 董英山关键词:酶切 脱磷 ‘霍巴'海棠组培快繁技术研究 被引量:5 2011年 以‘霍巴'海棠(Malus‘Hopa')的茎尖和带腋芽的幼嫩茎段为外植体,建立了比较高效的‘霍巴'海棠组培快繁体系。结果表明:‘霍巴'海棠茎尖及茎段外植体在MS+6-BA0.1mg/L+IAA 0.2mg/L+3%蔗糖+0.48%琼脂(pH 5.8)培养基上生长状况较好;将其组培苗在WPM+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+ZT 0.01mg/L+3%蔗糖+0.48%琼脂(pH 5.8)培养基上继代培养40d左右,继代增殖系数均可达到3.0左右;再经1/2 WPM+NAA0.8mg/L+1.5%蔗糖+0.48%琼脂(pH 5.8)培养基生根壮苗后,移栽成活率可达97.5%。 裴轶琨 李晓玲 李克秀 李毅丹关键词:快速繁殖 野生大豆核基因组可转化人工染色体(TAC)文库的构建 高质量的载体DNA和大片段基因组DNA是植物大片段基因组文库构建的两个基本要素,二者将对后续连接转化反应效率及插入片段长度起到关键性决定作用。本实验选用野生大豆黄化幼苗为材料,以可转化人工染色体(transformati... 李克秀关键词:野生大豆 可转化人工染色体 基因组文库 文献传递