李一松 作品数:8 被引量:45 H指数:4 供职机构: 东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 黑龙江省科技攻关计划 国家科技支撑计划 黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
乳中主要致病菌分子生物学快速检测技术 姜毓君 张英华 赵宁 崔英俊 郭鸰 王喜波 张莉 刘伟 李一松 吕琦 毕宇涵 课题来源和背景:“乳中主要致病菌分子生物学快速检测技术”为黑龙江省青年科学技术专向资金项目(项目编号:QC05C55),起止年限为2005年1月至2007年12月,目前已经按照合同要求提前完成了预期目标。本项目是针对原料...关键词:关键词:致病菌 牛乳 乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素的PCR检测 介绍了PCR技术在检测乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素方面的研究进展,并对其今后的发展方向和前景进行了展望. 李一松 相丽 霍贵成 姜毓君关键词:葡萄球菌 肠毒素 PCR检测 乳制品 文献传递 食品中单核细胞增多李斯特菌的快速检测 被引量:11 2006年 单核细胞增多李斯特菌是一种能引起人畜共患病和食源性疾病的致病菌。本文简述了单增李斯特菌的特性和毒力因子,介绍了从分子生物学和免疫学发展起来的核酸探针杂交、PCR、ELISA、免疫传感器等快速检测方法。这些快速检测方法与传统检测方法相比不仅缩短了检测时间,提高了检测效率,还提高了检测方法的灵敏度和特异性,对于单增李斯特菌的检测具有良好的应用前景。 闫冰 李一松 霍贵成 姜毓君关键词:分子生物学 免疫学 乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素的PCR检测 被引量:1 2006年 介绍了PCR技术在检测乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素方面的研究进展,并对其今后的发展方向和前景进行了展望。 李一松 相丽 霍贵成 姜毓君关键词:金黄色葡萄球菌 肠毒素 PCR 优化金黄色葡萄球菌基因组DNA的提取方法 被引量:6 2009年 为提取金黄色葡萄球菌DNA,比较了酶解法、丙酮-酶解法、玻璃珠机械法等破壁方法,确定玻璃珠破壁法为最优提取方法。该方法无需对样品进行增菌,可直接从乳品中提取金黄色葡萄球菌DNA。 任晓东 李一松 姜毓君关键词:金黄色葡萄球菌 DNA提取 PCR Taqman探针实时PCR检测金黄色葡萄球菌的研究 被引量:1 2008年 建立了Taqman探针实时PCR方法,针对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测。研究所设计的引物具有良好的特异性,而且Taqman探针实时PCR方法检测sea基因的灵敏度高,最低检出限为69 fg,并且该方法可在8 h内完成人工污染乳中金黄色葡萄球菌的检测,最低检出限为83 cfu/mL。研究所建立的方法具有特异性强、灵敏性高及操作简便等优点,适宜于牛乳中金黄色葡萄球菌污染的调查及监测。 李一松 韩希妍 赵凤 曲妍妍 周艳秋 李彬 姜毓君关键词:TAQMAN 实时PCR 牛乳 金黄色葡萄球菌 SYBR Green I荧光定量PCR检测乳中携带sea基因金黄色葡萄球菌的研究 被引量:17 2008年 金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的一种常见的致病菌,而其产生的肠毒素A是乳及乳制品食物中毒事件的主要原因。本研究建立了SYBR Green I荧光定量PCR方法对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测。该方法能快速、稳定地在8h内完成对乳中金黄色葡萄球菌的检测,对人工污染乳中金黄色葡萄球菌检测的最低检出限为83CFU/ml。 李一松 王明娜 吕琦 张光辉 闫冰 相丽 姜毓君关键词:金黄色葡萄球菌 荧光定量PCR SEA基因 SYBR RT-PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A基因 被引量:12 2009年 金黄色葡萄球菌是引起细菌性食物中毒的重要病源菌之一,尤其是肠毒素。国内外由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食物中毒屡屡发生。目前,国内检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素仍采用传统的方法,其操作繁琐、检测时间较长,通常需要3-5 d才能完成,且灵敏度较低。本研究缩短食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的检测时间,针对PCR检测的灵敏性、特异性,建立了检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法,为检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素提供了技术支持。分别采用TRIZol法和热酚法提取金黄色葡萄球菌总RNA并进行比较研究,在此基础上反转录获得cDNA,用特异引物对sea基因进行扩增,并优化PCR反应条件,获得理想的sea基因阳性扩增条带。结果表明,热酚法在总RNA提取方面优于TRIZol法,改进PCR反应时间和循环次数,最终初步建立RT-PCR检测金黄色葡萄球菌A基因的方法。 姜毓君 李一松 相丽 毕宇涵 赵凤关键词:金黄色葡萄球菌 SEA基因 RT-PCR