朱可彤
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学生命科学学院疫苗研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白的表达及纯化
- 2006年
- 目的获得高纯度的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白。方法以Vif/VR1012质粒为模板,PCR扩增出Vif-ΔN28基因并插入pRSETB质粒。将构建的原核表达载体Vif-ΔN28/pRSETB以及已有的Cullin5-N138/pRSETB质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,产物经Ni-NTA离子纯化柱纯化、复性。结果所表达的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白约占各自菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度均可达90%以上。结论已成功构建了Vif-ΔN28原核表达质粒,并在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性的纯化的Vif-ΔN28和Cullin5-N138蛋白。
- 张文艳楼朝平朱可彤张帆姜春来吴永革于湘晖孔维
- 关键词：人免疫缺陷病毒
- HIV-1 Vif与ElonginC蛋白在大肠杆菌中的共表达被引量：1
- 2008年
- 目的在大肠杆菌中共表达HIV-1Vif与ElonginC蛋白。方法PCR扩增ElonginC基因全长DNA片段,克隆入pMDT-easy载体,经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切后,与质粒pRSETB连接,构建质粒pRSETB-ElonginC。将质粒pMRI-Vif转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达菌株,再将此菌株制备成感受态细胞,用pRSETB-ElonginC质粒转化该细胞,经1mmol/L IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果质粒pRSETB-ElonginC经NdeⅠ/BamHⅠ双酶切,可切出约3000和400bp的2条片段,测序证明质粒构建正确。在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白,该蛋白具有良好的抗原特异性。结论在大肠杆菌中共表达了Vif与ElonginC蛋白。
- 朱可彤王小丹杜娟郭博孔维于湘晖
- 关键词：人类免疫缺陷病毒-1
- MMP-28催化结构域的表达和复性
- 本文对MMP-28催化结构域的表达和复性进行了研究。文章将含有MMP-28蛋白表达质粒的大肠杆菌经异丙基硫代-β-D半乳糖苷诱导，在大肠杆菌中得到高效表达，表达产物主要以包涵体的形式存在。超声裂解细胞提取包涵体，采用SD...
- 朱可彤
- 关键词：生物化学金属蛋白酶蛋白表达
- 文献传递
- HIV-1 Vif基因的克隆与原核表达被引量：1
- 2008年
- 目的克隆HIV-1Vif基因编码区序列,并在原核细胞中表达。方法构建原核表达载体pMRI,将Vif基因序列克隆至该载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,菌体裂解后获得特异性表达蛋白,用组氨酸标签特异性亲和树脂分离纯化该蛋白,并经SDS-PAGE及Westernblot鉴定。结果表达质粒pMRI-Vif经双酶切,可见约600bp的Vif基因片段,测序结果证明质粒构建正确。在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了可溶性Vif蛋白,纯化后经凝胶自动扫描分析,纯度达85%以上,蛋白浓度约为1g/L。纯化产物具有良好的抗原特异性。结论在大肠杆菌中高效表达了可溶性Vif蛋白。
- 朱可彤杜娟王小丹郭博孔维于湘晖
- 关键词：人类免疫缺陷病毒1型基因克隆原核表达
- 以Vif为靶点的HIV-1肽类抑制剂的设计合成与作用机理研究
- 朱可彤
- 关键词：HIV-1病毒VIFAPOBEC3G
- 文献传递
