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人抗肌萎缩蛋白Dp71 shRNA载体构建与检测: 2014年; 目的:构建有效针对人Dystrophin Dp71基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,并验证其干扰效果。方法:设计合成3对针对人Dystrophin Dp71基因的和1对无同源性的siRNA片段,在两端和中间加上酶切位点和Loop环。将合成的DNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人Dp71基因的shRNA和空白对照载体。将各干扰载体和空白载体转染人正常胃黏膜上皮细胞(gastric epithelial cells,GES-1)和人支气管上皮细胞(human bronchial epithelium,HBE),Western印迹检测Dp71 shRNA真核表达载体的干扰效率。结果:酶切和测序验证均表明各Dp71-shRNA载体构建成功。将空载体及各Dp71 shRNA载体分别转染GES-1和HBEC,和空白细胞对照及shRNA空白载体组相比,3组Dp71-shRNA能够明显抑制Dp71蛋白表达,但是3组质粒的抑制效率有一定的差异,以Dp71 shRNA2对Dp71表达的干扰效率最强。结论:成功构建了3个有效针对人Dystrophin Dp71基因的shRNA干扰载体,3组质粒都能有效地抑制Dp71在GES-1和HBEC中的表达,其中以Dp71-shRNA2的抑制效率最高。; 谭思创陈志康曹小霞文俏程张蔚林曾庆仁谭斯品; 关键词：DYSTROPHIN

肝X受体-β在胃癌组织中的表达及其激动剂GW 3965对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响被引量：2: 2016年; 目的:探讨肝X受体-β(liver X receptor-β,LXR-β)在胃癌组织中的表达及其激动剂GW3965对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法:应用免疫组织化学法检测114例胃癌及其对应的114例癌旁组织中增殖相关基因LXR-β和转录活化因子4(activating transcription factor 4,ATF4)的表达;培养胃癌细胞SGC-7901,待GW3965激活LXR-β后,应用q RTPCR和Western印迹检测LXR-β下游基因三磷酸腺苷结合盒A1(ATP-binding cassette A1,ABCA1)和ATF4的表达,采用细胞增殖-毒性检测试剂盒检测细胞增殖情况;GW3965激活LXR-β后,利用ATF4短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)靶向沉默ATF4,检测细胞增殖情况。结果:LXR-β和ATF4在胃癌组织中的表达均显著低于其相应的癌旁组织(均P<0.05);GW3965激活LXR-β后,SGC7901细胞增殖明显受抑制,ABCA1和ATF4的表达明显上调(均P<0.05);sh RNA能显著抑制ATF4的表达,并阻断LXR-β激活后抑制细胞增殖的作用。结论:LXR-β在胃癌组织中呈低表达,活化的LXR-β可能通过ATF4抑制胃癌细胞的增殖。; 王然李瑞欣文俏程彭琨谭湘洲陈志康; 关键词：肝X受体胃癌

Dp71蛋白的短发夹RNA干扰质粒及其应用方法: 本发明公开了一种Dp71蛋白的短发夹RNA干扰质粒及其应用方法。首次成功构建了Dp71蛋白的短发夹RNA(Dp71-shRNA)干扰质粒，将其转染至肺腺癌细胞株A549中，构建稳定转染Dp71-shRNA质粒的细胞株。发...; 谭斯品谭思创陈志康谭晶文俏程; 文献传递

人FoxA1 shRNA载体构建与检测: 2014年; 目的构建有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,并验证其干扰效果。方法设计合成3对针对人FoxA1基因的和1对无同源性的shRNA片段,将合成的shRNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人FoxA1基因的shRNA和空白对照载体。将各干扰载体和空白载体转染人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901),Realtime RT-PCR和Western-blotting检测干扰载体的干扰效率。结果①酶切和测序验证均表明各shRNA载体构建成功。将空载体及各干扰载体分别转染人正常胃黏膜细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901)发现,和空白对照组相比,3组干扰载体能够从mRNA和蛋白表达水平明显抑制FoxA1的表达,但是3组质粒的抑制效率有一定的差异,以3号质粒对Foxa1的干扰效率最强。结论成功构建了三个有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,三组质粒都能有效地抑制FoxA1在GES-1细胞和SGC-7901细胞中的表达。; 文俏程张蔚林陈志康曹小霞陈子华谭思创肖献忠谭斯品

胃癌细胞奥沙利铂耐药与上皮-间质转化关系研究被引量：5: 2015年; 目的:探讨胃癌细胞奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药与上皮-间质转化(EMT)的关系。方法:采用逐步递增L-OHP浓度持续体外诱导人胃癌SGC-7901细胞,建立L-OHP耐药细胞系SGC-7901/L-OHP;通过形态学、群体倍增时间、药物敏感性检测确定SGC-7901/L-OHP成功建立;比较SGC-7901/L-OHP细胞与亲代细胞EMT相关标记物N-cadherin和E-cadherin表达差异。结果:经6个月诱导,L-OHP耐药细胞系SGC-7901/L-OHP成功建立,表现为该细胞的形态由上皮表型转变为间质样细胞表型;群体倍增时间较亲代细胞明显延长(P<0.05);L-OHP的IC50为亲代细胞的9.7倍。与亲代细胞SGC-790比较,SGC-7901/L-OHP细胞中N-cadherin m RNA和蛋白表达明显上调,E-cadherin m RNA和蛋白表达明显下调(均P<0.05)。结论:EMT可能是人胃癌细胞对L-OHP产生耐药的重要机制。; 文俏程陈志康陈子华王然袁伟杰; 关键词：胃肿瘤上皮-间质转化

EphA2与胃癌奥沙利铂耐药细胞EMT关系的初步研究: 背景:　　胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，化疗作为胃癌术后最有效的辅助治疗手段之一，在防治胃癌的复发与转移方面的作用举足轻重。奥沙利铂(Oxaliplatin，L-OHP)是继顺铂和卡铂之后的第三代铂类抗癌药，已逐渐成...; 文俏程; 关键词：胃癌奥沙利铂耐药细胞上皮-间质转化; 文献传递

手鳞状细胞癌小肠转移合并梗阻一例: 2013年; 患者男性,71岁,因＂反复腹胀腹痛4个月＂在当地医院以＂不完全性肠梗阻＂治疗,症状反复,2012年7月行胶囊内镜检查.因胶囊内镜一直未排出,症状加重于2012年8月29日转入我院.患者10年前因＂右手皮肤鳞癌＂行右手小指广泛切除,术后行氟尿嘧啶＋甲氨蝶呤化疗1次.3年前再次因＂皮肤鳞癌＂行右手掌侧皮肤广泛切除,右前臂带蒂皮瓣移植术（图1）.体检：上腹部及脐周轻压痛.人院后腹部X线片显示肠梗阻并脊柱侧弯.胸部CT、胃镜、PET-CT、肿瘤标志物检查均未见异常.诊断为肠梗阻,肿瘤可能性大.患者在全身麻醉下行剖腹探查,距回盲部约150 cm处一2 cm×2 cm灰白色质硬肿块致肠腔狭窄,梗阻近端肠管明显扩张,内可扪及胶囊内镜.; 李瑞欣陈子华文俏程陈志康; 关键词：不完全性肠梗阻鳞状细胞癌小肠转移胶囊内镜检查带蒂皮瓣移植术皮肤鳞癌

肝X受体激动剂GW3965对人结肠癌细胞奥沙利铂耐药的逆转作用及机制被引量：1: 2017年; 目的:探讨肝X受体(LXR)激动剂GW3965对人结肠癌细胞奥沙利铂(OXA)耐药的逆转作用及机制。方法:用OXA药物浓度持续递增法诱导人结肠癌HCT116细胞构建OXA耐药的人结肠癌HCT116/L-OHP细胞,比较HCT116/L-OHP细胞与其亲本HCT116细胞的生长情况,以及对不同浓度OXA作用的反应情况;检测HCT116/L-OHP细胞经GW3965处理48 h后OXA耐药性及自噬相关蛋白ATG-5、Beclin-1、p62、LC3的表达的变化。结果:成功构建人结肠癌耐OXA细胞HCT116/L-OHP,表现为HCT116/L-OHP细胞与亲本HCT116细胞比较,增殖能力有所减弱,但对OXA的耐药性明显增强(IC_(50):244.99μmol/L vs.10.05μmol/L,P<0.05),其耐药指数(RI)为24.45。不同浓度(10、20、30μmol/L)GW3965作用后,HCT116/L-OHP细胞对OXA的IC_(50)、RI均明显降低(均P<0.05),且呈浓度依赖性(IC_(50):199.49、114.71、87.32μmol/L;RI:19.89、11.40、8.69),3个浓度的逆转倍数分别为1.23、2.15、2.82;ATG-5、Beclin-1蛋白的表达明显降低,而p62、LC3-II蛋白的表达明显升高(均P<0.05),且均呈浓度依赖性。结论:LXR激动剂GW3965可逆转人结肠癌细胞对OXA的耐药,其机制可能与调节自噬相关蛋白表达水平有关。; 谭湘洲王然文俏程莫砚群吴瑞平陈志康; 关键词：结肠肿瘤孤儿核受体自噬

Dp71蛋白的短发夹RNA干扰质粒及其应用方法: 本发明公开了一种Dp71蛋白的短发夹RNA干扰质粒及其应用方法。首次成功构建了Dp71蛋白的短发夹RNA(Dp71‑shRNA)干扰质粒，将其转染至肺腺癌细胞株A549中，构建稳定转染Dp71‑shRNA质粒的细胞株。发...; 谭斯品谭思创陈志康谭晶文俏程; 文献传递

胃癌术后早期肠内营养的应用被引量：24: 2015年; 目的:观察早期肠内营养(EEN)支持治疗对胃癌患者术后康复的影响和作用,分析早期肠内营养支持的疗效及可行性。方法:将2008年11月—2011年6月收治的240例胃癌患者随机分为EEN组和肠外营养(PN)PN组,各120例。两组营养支持采用等热量、等氮量,分别于营养支持前后观测营养状况指标、临床指标和血生化指标的变化。结果:两组患者的手术方式、手术前后的体质量、血清前白蛋白、血清白蛋白等营养状况指标、肝、肾功能、血糖、电解质等血生化指标均无统计学差异(P>0.05);与PN组比较,EEN组静脉炎的发生率低(0 vs.3.4%)、平均住院费用低[(23 231±256)元vs.(30 752±783)元]、肛门排气时间及住院时间较短[(33.4±11.0)h vs.(56.2±15.1)h、(10.3±2.6)d vs.(12.1±3.1)d](P<0.05)。结论:与PN相比,EEN在改善胃癌患者术后营养方面具有同等效果,且具有胃肠功能恢复快、住院时间短、住院费用更低的优点,是一种安全、有效、更为合理的营养治疗方法。; 王然陈志康文俏程谭湘洲; 关键词：胃肿瘤肠内营养肠外营养

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文俏程

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