张庆林 作品数:73 被引量:389 H指数:11 供职机构: 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 理学 更多>>
高效液相色谱法分析微生物代谢物埃博霉素B的含量 被引量:4 2008年 目的建立检测黏细菌纤维堆囊菌发酵液中代谢物埃博霉素B(EpoB)含量的方法。方法用高效液相色谱法测定EpoB的含量,色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-水(60:40),流速为1.0mL/min,进样量为3pL,检测波长为247nm。结果平均回收率为99.55%,RSD为1.94%(n=9),精密度试验表明,日内RSD为0.94%(n=5),日间RSD为1.98%(n=5),EpoB在0.625~10mg/mL浓度范围内呈线性关系。最低检测限为1.25μg/mL。结论此法可以用于检测代谢产物的含量,具有良好的准确度和精密度。 王延亮 卢育新 丁小军 王赫 张庆林关键词:粘细菌 高效液相色谱 天然镇痛活性成分研究进展 被引量:4 2006年 天然镇痛活性成分一直是药物研发的热点之一。随着对海洋生物、微生物研究的深入和扩展,发现了许多结构新颖,活性独特的新型天然镇痛活性成分。本文综合了国外文献报道,按结构类型对新发现的天然镇痛活性成分进行分类,综述其研究现状。 匡岩巍 张庆林关键词:镇痛 活性成分 高通量分离纯化技术在天然产物化学中的应用 被引量:4 2006年 天然产物具有极大的化学多样性和复杂性。加快天然产物的纯化速度对快速建立天然产物库及新药研发具有重要意义。采用各类色谱技术快速制备天然产物库以满足高通量筛选的需要,利用色谱与光谱联用技术,将分离纯化及结构信息联系在一起,最终达到高效、快速地从天然产物资源中发现新型结构的活性天然产物的目的。本文对几种高通量技术做一综述。 黄麟 张庆林关键词:高通量筛选 固相萃取 高功率微波对大鼠脑组织氧化应激的影响 被引量:6 2015年 目的观察不同剂量高功率微波(high power microwave,HPM)辐照对Wistar大鼠脑组织的损伤作用及氧化应激的影响,为建立微波辐射氧化损伤动物模型及抗辐射药物的评价提供依据。方法将80只健康成年雄性Wistar大鼠按析因设计随机分为16组,辐射平均功率密度分别为0、10、30及100 m W/cm2;取材时间分别为6 h、1、3及7 d。照射组照射时间为6 min。分别于各取材时间点活杀动物并取脑组织,采用比色法测量大鼠脑组织丙二醛(MDA)含量、蛋白质羰基含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果各辐射组MDA、蛋白质羰基含量基本随着辐射剂量的升高而升高,随取材时间的延长而降低。各辐射组SOD、GSH-px、CAT活性基本随辐射剂量的升高而降低,随取材时间的延长先降后升。结论微波辐射能引起大鼠脑组织的氧化应激反应,主要表现在大鼠脑组织脂质和蛋白质氧化损伤以及抗氧化物酶活性降低,且与辐射剂量、取材时间有一定的依赖性。 郑文 王长振 彭瑞云 王水明 王丽峰 邹勇 李海娟 智维佳 胡向军 张庆林关键词:高功率微波辐射 脑组织 氧化应激 丙二醛 离子交换高效液相色谱法分析质粒pUDKH 被引量:6 2004年 采用阴离子交换高效液相色谱法监测重组质粒pUDKH的生产过程和该质粒产物中超螺旋pUDKH的比例。所用的色谱条件为:色谱柱TSKgelDNA NPR(4 6mmi d ×75mm);流动相体系由20mmol/LTris HCl(pH8 8)和1mol/LNaCl组成,梯度洗脱方式。分析结果表明:质粒产物中超螺旋pUDKH含量达95%(质量分数)以上时,检测不到残留的核糖核酸(RNA)。高效液相色谱法检测质粒pUDKH产物及其生产过程的灵敏度高、试样用量少,分辨率高。 刘佳 张庆林 毕建进 王晓娜 龚萍 哈小琴 王正平 吴祖泽关键词:肝细胞生长因子 超螺旋 生产过程 聚乙二醇修饰小分子药物的研究进展 被引量:3 2015年 以高聚物作为载体,携带各种活性化合物组成药物释放系统,在现代医疗中发挥了巨大的作用。高分子偶联物不仅可以改变药物的药动学特征,还可以通过偶联特异性的物质使药物具有主动靶向性。目前研究最广泛的高分子载体是聚乙二醇。聚乙二醇通过与肽链、抗体、酶等活性化合物偶联,可以提高药物溶解度,延长循环半衰期,减少非特异性摄取,增加靶向性。已有很多聚乙二醇修饰的药物上市,也有很多尚处于临床研究阶段。大部分聚乙二醇化药物的临床研究表明,聚乙二醇修饰的药物确实可以提高药效、降低毒副作用。但关于聚乙二醇修饰小分子药物的设计依然需要进一步研究和完善。我们主要讨论聚乙二醇修饰小分子药物的设计和应用。 张海艳 王堃 胡春生 邹云鹏 杨晓曦 张庆林关键词:小分子药物 聚乙二醇 靶向 质粒超螺旋比例对其细胞转染效率及表达的影响 被引量:13 2005年 检测质粒开环、闭环比例不同时对其细胞转染效率及表达的影响。构建携带人肝细胞生长因子基因的质粒(pcDNA3-HGF)及携带LacZ报告基因的质粒(pcDNA3-LacZ),用核酸纯化试剂盒提取开环、闭环比例不同的质粒,然后用LipofectAMINE介导它们分别转染NIH3T3细胞,采用X-Gal染色和ELISA法分别观察转染效率和表达活性。结果表明,用超螺旋比例分别为85.45%和48.44%的质粒pcDNA3-LacZ转染生长旺盛的NIH3T3细胞,48h检测转染效率分别为23.4%±3.8%和9.3%±2.5%,前者约是后者的2.5倍。用超螺旋比例分别为93.28%和40.53%的质粒pcDNA3-HGF转染1×106NIH3T3细胞,ELISA法检测48h细胞培养上清中HGF的表达量分别为46.5±6.3ng和25.6±4.2ng,前者是后者的1.8倍。初步认为质粒开环、闭环比例不同对其细胞转染效率及表达有一定影响,超螺旋比例高时其转染效率及表达量较高。 哈小琴 吴祖泽 张庆林 吴彬 吕同德关键词:质粒 超螺旋 转染效率 新型鳞片状聚合物修饰硅胶填料固定化酶的制备及其在蛋白质组鉴定中的应用 被引量:7 2012年 利用原子转移自由基聚合法制备了鳞片状聚合物修饰的硅胶填料,将其作为一种新型的固定化酶载体,实现了蛋白酶的高密度固定,从而明显缩短了复杂蛋白质样品的酶解时间。使用标准蛋白质对固定化酶的酶解效率进行了考察,结果表明:鳞片状聚合物修饰的新型固定化酶硅胶填料具有较高的酶解效率,酶解标准蛋白质1 min后,鉴定到肽段的氨基酸序列覆盖率可达95%以上。将该固定化酶硅胶填料成功应用于大肠杆菌全蛋白质的酶解,从2 min酶解肽段的混合物中鉴定到的蛋白质数量超过同样条件下溶液酶解12 h的结果。另外,该固定化酶硅胶填料可以重复使用,其酶解效率具有良好的稳定性和重现性;该固定化酶具有较好的样品回收率,因而可以应用于蛋白质组学研究中。 宋子凤 张庆林 张养军 秦伟捷 钱小红关键词:蛋白质组学 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体与肿瘤治疗 被引量:2 2008年 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2 ligand,Apo-2L)是1995年发现的TNF超家族的新成员。它的最大特点是可以选择性诱导肿瘤细胞和转化细胞发生凋亡,但对正常组织和细胞没有显著毒性效应。本文从TRAIL的结构、受体、凋亡机制及其在肿瘤治疗中的应用等方面对其进行了介绍。TRAIL很可能在肿瘤治疗方面发挥重要作用。 张霄翔 纪文婷 张庆林关键词:受体 凋亡 抗肿瘤 重组质粒pVAX1-PENK大规模制备研究 2013年 目的:建立质粒pVAX1-PENK的大规模制备2--艺。方法:对大肠杆菌工程菌DH5α-pVAX1-PENK进行补料发酵,利用自行发明的连续碱裂解过程对菌体进行裂解,经超滤浓缩后,用Sepharnse 6 Fast Flow层析柱分离DNA与RNA,再经Plasmidselect Xtra层析柱分离超螺旋质粒DNA与开环或线性质粒DNA,最后经Source 15Q层析柱精制质粒DNA。结果:发酵获得质粒pVAX1-PENK的产率为182mg/L,经碱裂解及层析分离后,最终制备的质粒DNA超螺旋比例大于98%,总回收率为60.5%,纯度(D260nm/D280nm)为1.8~2.0。结论:建立的质粒DNA生产工艺可以制备大量高纯度的质粒DNA,并避免了使用动物源性的酶及有毒试剂。 蔡珍珍 胡春生 卢育新 程晓晨 柳伟 张庆林关键词:发酵 分离纯化