崔建华
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Cdx2小分子干扰RNA对胃癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察Cdx2小分子干扰RNA（Cdx2-siRNA）对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响。方法设计合成针对Cdx2基因的siRNA寡核苷酸以及阴性对照siRNA。将人胃癌MGC-803细胞接种于培养板中，分为3组，正常对照组不作任何处理，Cdx2-siRNA组和阴性对照组分别用Lipofectamine^TM2000将Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA转染进细胞内。应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot技术检测转染24h时胃癌MGC-803细胞中Cdx2mRNA和蛋白的表达，应用噻唑蓝（MTT）比色法检测24、36、48、60、72h的细胞活力，应用克隆形成实验检测转染7d时MGC-803细胞增殖的变化，应用流式细胞仪检测转染24h时MGC-803细胞周期和细胞凋亡的变化。结果Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA成功转染进胃癌MGC-803细胞内；Cdx2-siRNA组Cdx2mRNA和蛋白的表达量分别为（0．07±0．01）和（0．15±0．02），明显低于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；Cdx2-siRNA组细胞活力和增殖能力下降，24、36、48、60、72h的吸光度值分别为（0．125±0．003）、（0．193±0．005）、（0．223±0．005）、（0．267±0．003）、（0．315±0．006），克隆形成数为（51．4±3．2），均明显低于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；而且，Cdx2-siRNA组细胞凋亡率为（12．5±0．6）％，G。／G，期比例为（73．1±7．8）％，明显高于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；阴性对照组和正常对照组比较，上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Cdx2-siRNA可抑制人胃癌细胞的活力和增殖能力，其机制与诱导细胞凋亡、使细胞周期停滞有关。
- 崔建华谢玉波王晓通肖强
- 关键词：胃癌RNA干扰CDX2增殖脱噬作用
- CDX2基因过表达促进胃癌细胞凋亡的分子机理研究被引量：3
- 2009年
- 目的:利用基因表达谱芯片技术筛选CDX2高表达的胃癌MGC803/CDX2细胞和对照组MGC803/EV细胞中差异表达的基因,探讨CDX2高表达促进胃癌细胞凋亡的分子机理。方法:Trizol一步法提取高表达CDX2的MGC803/CDX2细胞和对照组MGC803/EV细胞的总RNA,并纯化mRNA,反转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记的cDNA探针,与22k基因表达谱芯片进行杂交;采用LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行分析,把图像信号转化为数字信号,最后以差异为>2倍或<0.5倍的标准来确定差异表达基因。结果:在23238个基因中筛选出与细胞凋亡有关的差异性表达基因15条,其中8条基因表达上调和7条基因表达下调。结论:CDX2基因过表达促进胃癌细胞凋亡可能与这15条差异表达基因关系密切。
- 崔建华李雷谢玉波肖强
- 关键词：凋亡基因芯片CDX2差异基因
- 转录因子E2F-1 siRNA表达质粒的构建及对胃癌MGC803细胞的沉默效应被引量：1
- 2008年
- 目的:通过构建人E2F-1基因的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,探讨其对胃癌MGC803细胞中E2F-1基因表达的影响。方法:将设计合成的具有短发夹结构的人E2F-1基因siRNA寡核苷酸链退火形成双链,连接入经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后的pSilencer4·1-CMVneo表达质粒,并做酶切及测序鉴定。用脂质体把重组质粒转染至细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitativePCR)及蛋白印迹(western blotting)技术分别检测E2F-1mRNA及蛋白表达。结果:经酶切及测序鉴定,成功构建了E2F-1 siRNA表达质粒;它可显著抑制MGC803细胞中E2F-1基因mRNA及蛋白表达,与未转染组及阴性对照组细胞比较,分别降低了86·4%、86·1%和81·5%、79·6%。结论:pSilencer4·1-E2F-1重组质粒能抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1基因的表达,为进一步E2F-1基因的功能研究及胃癌治疗研究提供了实验基础。
- 尹永硕肖强谢玉波李雷王长青唐振勇马玉林崔建华
- 关键词：胃癌MGC803细胞E2F-1重组表达质粒
