孙璐
- 作品数：15 被引量：38H指数：4
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 氯沙坦联合苯那普利对早期糖尿病肾病患者血浆APN及hs-CRP的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究苯那普利联合氯沙坦对2型糖尿病肾病患者血浆脂联素（APN）及高敏C反应蛋白（hs—CRP）的影响。方法选择我院心血管内科住院的早期2型糖尿肾病患者84例，随机分为苯那普利组（常规组）及苯那普利联合氯沙坦组（联合组）各42例。常规组给予苯那普利10—20mg／d，治疗6个月；联合组给予苯那普利10mg／d，联合氯沙坦50—100mg／d，治疗6个月。分别检测两组患者入院、治疗3和6个月的血浆APN、hs—CRP变化。结果治疗后两组血浆APN较前入院前明显升高，hs-CRP明显减低（P〈0．05）。治疗3及6个月后，联合组血浆APN水平较常规组明显升高，hs-CRP较常规组明显减低（P〈0．05）。结论双重RAS阻滞剂具有明显肾保护作用，可升高2型糖尿病肾病患者血浆APN水平，降低血浆hs—CRP水平。
- 常快乐王海昌孙璐廉坤陶凌
- 关键词：苯那普利氯沙坦糖尿病肾病APN尿蛋白
- 抗TNF-α中和抗体通过升高脂联素水平减轻小鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用被引量：2
- 2012年
- 目的:阐明心肌缺血/再灌注(MI/R)时,脂联素(APN)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系,以及使用中和抗体阻断TNF-α可否提高血浆APN,进而发挥心肌保护作用。方法:96只成年雄性C57小鼠和36只ob/ob小鼠均采用30 min缺血/再灌注(I/R)建立MI/R模型。96只C57小鼠分为假手术组、手术+盐水对照组及手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=32);36只ob/ob小鼠分为ob/ob假手术组、ob/ob手术+盐水对照组及ob/ob手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=12)。假手术或缺血20 min后,腹腔注射给予单次抗TNF-α中和抗体或盐水干预。分别采用ELISA检测TNF-α与APN血浆水平;小鼠心脏超声评估心脏LVEF;伊文氏蓝/TTC染色检测心脏梗死面积;以及TUNEL/Caspase-3活性检测观察心肌细胞凋亡。结果:血浆ELISA测定发现,MI/R后,小鼠血浆TNF-α水平在再灌后1 h即显著升高,后缓慢下降。注射抗TNF-α中和抗体可在再灌后1 h即中和TNF-α(P<0.01),同时在再灌注3 h、8 h、1 d及3 d后4个时间点,较给予盐水对照显著升高血浆APN(P<0.01)。通过小鼠心脏超声、伊文氏蓝/TTC染色和TUNEL/Caspase-3活性检测发现,与给予盐水的对照相比,腹腔注射抗TNF-α中和抗体可提高小鼠的心肌功能(P<0.05)、减少梗死面积(P<0.01)及心肌细胞的凋亡(P<0.01)。而在ob/ob小鼠中,通过以同样的实验方法证实,单次注射抗TNF-α中和抗体已不能提高血浆APN的含量,其减轻心肌损伤的作用同样被显著削弱,但给予APN球状片段仍可发挥心肌保护作用。结论:以抗TNF-α的中和抗体阻断TNF-α可逆转MI/R后血浆APN的降低并发挥心肌保护作用,提示抗TNF-α中和抗体发挥的心肌保护作用可能部分通过提高APN实现。
- 高超刘毅杨强孙璐杨璐陶凌王海昌
- 关键词：脂联素小鼠
- 脂联素通过APPL1减轻缺氧/复氧损伤诱导的心肌细胞凋亡被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨APPL1在脂联素(adiponectin,ANP)拮抗SD乳鼠心肌细胞(neonatal cardiomyocytes)缺氧/复氧(H/R)损伤中的作用。方法:分离SD乳鼠心肌细胞并培养。通过对培养的心肌细胞H/R损伤模拟缺血/再灌注(simulated ischemia reperfusion,SI/R)后,随机分为对照组、H/R组、H/R+APN组及H/R+APN+APPL1 RNAi组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的生存率,原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡,Westernblot检测APPL1蛋白的表达。结果:与对照组相比,H/R组吸光度值明显降低(P<0.01),凋亡指数(AI)显著上升(P<0.01)。与对照组和H/R组相比,H/R+APN组中APPL1的表达明显上升(P<0.05)。以RNAi抑制APPL1表达后,与H/R+APN组相比,H/R+APN+APPL1 RNAi组凋亡指数率(%)明显上升[(28.32±4.13)%vs.(9.78±2.16)%,P<0.01]。结论:APN可显著抑制H/R损伤诱导的心肌细胞凋亡,促进心肌细胞存活,其拮抗作用与上调APPL1蛋白的表达相关。
- 李冬冬张海锋孙璐张荣庆王海昌陶凌
- 关键词：脂联素心肌细胞乳鼠
- 白黎芦醇减轻Ⅱ型糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨白黎芦醇(RSV)减轻Ⅱ型糖尿病(T2DM)小鼠心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的作用及其机制。方法:采用喂养高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立T2DM小鼠模型。造模成功后立即给予RSV(10 mg/kg)每日1次灌胃,连续3周。实验分为正常假手术组、正常手术对照组、DM假手术组、DM手术对照组、RSV组、CpC组,每组20只。手术方式采用心脏冠状动脉左前降支结扎30 min、再灌注3 h或24 h。抑制剂组于术前1 h腹腔注射Compound C(20 mg/kg)。用TTC染色法检测心肌梗死(MI)面积,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,ELISA法检测caspase-3活性、血浆脂联素(APN)水平,Western blot法检测AMPK、p-AMPK及脂肪组织APN的含量。结果:喂养高脂饮食结合小剂量STZ能够成功建立T2DM小鼠模型。与DM手术对照组相比,RSV饲喂能够减轻T2DM小鼠MI/RI,减小MI面积、减少心肌细胞凋亡(P<0.01),降低caspase-3的活性(P<0.05)。RSV还能够上调脂肪组织APN表达,逆转T2DM小鼠低APN血症(P<0.01)。AMPK抑制剂Compound C可显著减弱RSV的心肌保护作用(P<0.05)。结论:RSV可通过逆转T2DM小鼠的低脂联素血症,在MI/RI时发挥对心肌的保护作用。
- 杨强王海昌高超冯世栋孙璐刘毅陶凌
- 关键词：白藜芦醇脂联素小鼠
- 脂联素与冠状动脉慢血流现象的关系被引量：1
- 2012年
- 目的探讨脂联素(APN)与冠状动脉慢血流现象(CSFP)之间的关系。方法采用校正TIMI帧计数(CTFC)将入选病例分为两组:CSFP组35例及对照组35例。所有患者均于冠脉造影术中肝素抗凝管取血浆5 ml,静置离心,-80℃冻存。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测APN水平。常规化验血常规、肝、肾功、血脂、血凝全套、空腹血糖、糖化血红蛋白。分析APN与CSFP之间关系。结果两组基线资料相当,冠脉CSFP组脂联素水平较对照组明显减低。结论 APN水平减低与CSFP密切相关。
- 常快乐王斌廉坤孙璐王海昌陶凌
- 关键词：冠状动脉慢血流脂联素冠状血管造影术动脉粥样硬化
- 阿托伐他汀联合尼可地尔治疗冠状动脉慢血流的临床研究被引量：10
- 2012年
- 目的通过对伴有胸痛症状的冠状动脉慢血流(CSF)患者临床资料进行分析,观察阿司匹林、尼可地尔及阿托伐他汀对CSF的疗效及血浆脂联素(APN)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的影响。方法经冠状动脉造影(CAG)诊断为CSF且伴有胸痛的患者35例,患者知情同意,给予阿司匹林100mg1次/d,尼克地尔5mg3次/d,阿托伐他汀20mg1次/晚。采取自身前后对照方法,观察治疗3个月后患者胸痛症状改善程度,以及APN及hs-CRP水平的变化。结果经治疗患者胸痛症状明显改善,有效率82%;经治疗血浆APN水平较前明显升高;hs-CRP水平较前明显减低,前后比较有统计学差异(P<0.05)。结论他汀联合尼可地尔对缓解CSF患者的胸痛症状疗效显著,可显著提高CSF患者的血浆APN水平,减低血浆hs-CRP水平。
- 常快乐王海昌孙璐廉坤陶凌
- 关键词：冠状血管C反应蛋白质阿托伐他汀钙慢血流
- 无标签人源性脂联素球状结构的表达、纯化与活性检测
- 2013年
- 目的:利用基因工程方法构建无标签人源性脂联素球状结构(gAd)基因的原核表达载体,并对重组蛋白进行诱导表达、纯化及鉴定。方法:从正常人脂肪组织里提取总RNA,反转录合成cDNA,经PCR扩增、酶切后连入pET-22b(+)载体构建重组质粒pET-22b(+)-gAd,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经低温、低浓度IPTG诱导使其可溶性表达,采用硫酸铵沉淀、凝胶过滤层析和阴离子交换层析三步分离纯化,得到不带任何标签的人源性gAd;运用SDS-PAGE、Western印迹、HPLC对重组蛋白进行鉴定,通过对AMP激活的蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平检测纯化蛋白的生物学活性。结果:构建了原核表达载体pET-22b(+)-gAd,实现了人源性gAd在原核细胞中的可溶性表达,纯化的蛋白经SDS-PAGE和Western印迹分析证实为gAd,HPLC分析蛋白纯度达到95%以上;通过对AMPK磷酸化水平的检测,证明纯化的gAd具有高生物学活性。结论:重组表达和纯化了无标签、高生物学活性的人源性脂联素球状结构,为其进一步的理论研究、生产开发奠定了基础。
- 张立剑孙璐李冬冬郭云萍王增禄刘毅张英起陶凌
- 关键词：表达纯化活性检测
- 重组人源性脂联素球状结构的表达、纯化与活性检测
- 2013年
- 目的:利用基因工程方法构建人源性脂联素球状结构(gAd)基因的高效原核表达体系,并对重组蛋白进行诱导表达、纯化、鉴定及活性检测。方法:从正常人脂肪组织里面提取总RNA,反转录合成cDNA,经PCR扩增、酶切后连入pET-22b(+)载体构建重组质粒pET-22b(+)-gAd,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。经诱导剂诱导后目的蛋白以包涵体形式产生,采用强碱促溶包涵体并用丙酮沉淀蛋白的方法进行复性和纯化,得到高纯度的人源性gAd。运用SDS-PAGE、Western blotting对重组蛋白进行鉴定,通过对蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平和对小鼠的心肌缺血再灌注损伤的保护作用来检测纯化蛋白的生物学活性。结果:成功构建了原核表达载体pET-22b(+)-gAd,实现了人源性gAd在原核细胞中的表达,并对形成的包涵体变性、复性和纯化,纯化出的蛋白经过SDS-PAGE和Western分析证实为gAd;通过对AMPK的磷酸化水平的检测和对小鼠的心肌缺血再灌注损伤的保护作用证明纯化出的gAd具有高生物学活性。结论:成功构建、表达和纯化了无标签、高生物学活性的人源性脂联素球状结构(gAd),为其进一步的理论研究、生产开发奠定了基础。
- 张立剑孙璐郭云萍李冬冬王增禄刘毅张英起陶凌
- 关键词：表达纯化心脏保护
- 血红素加氧酶-1基因转染对神经元损伤的保护作用被引量：4
- 2010年
- 目的观察腺病毒介导的血红素加氧酶-1(HO-1)基因转染大鼠后对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠随机分为4组:假手术对照组(SH)、生理盐水组(V)、空载体组(Ad)和Ad-HO-1转染组(HO)。后三组在缺血前3d于右侧脑室部分别注射20μl生理盐水、含1μl空载体腺病毒(1.0×1010plaque-formingunit/ml,PFU/ml)的生理盐水或含1μl重组HO-1腺病毒(1.0×1010PFU/ml)的生理盐水,连续注射3d后,采用右侧大脑中动脉栓塞法(MCAO)建立脑缺血再灌注模型。每组大鼠测定神经功能后,处死大鼠并取全脑标本,测定右脑梗死体积及细胞凋亡指标,荧光显微镜下观察脑组织荧光蛋白的表达情况,Western blot检测脑组织HO-1的表达。结果HO组中HO-1表达量明显高于Ad组和V组,Ad组和HO组可见有荧光蛋白表达,转染率为34.5%±3.4%。HO组神经功能显著优于Ad组和V组(P<0.001)。与SH组比较,V组、Ad组脑梗死体积、神经细胞凋亡明显升高。与V组及Ad组比较,HO组脑梗死体积显著减小(P<0.01)、神经元凋亡显著减少(P<0.01)。结论腺病毒携带的HO-1基因能有效的转染脑组织,并在脑内稳定表达;HO-1基因转染显著减轻脑缺血再灌注后神经细胞损伤。
- 孔滨陈礼刚孙璐董海龙陶凌费舟屈延
- 关键词：血红素氧化酶-1转染腺病毒
- 脂联素临床应用展望——疾病预防、诊断及预后评价的生物标志物及治疗靶点被引量：2
- 2012年
- 脂联素（adiponectin，APN）是迄今发现的惟一与体脂含量呈负相关的脂肪细胞因子。临床研究数据显示，血浆APN减少与糖尿病、心血管疾病等发生发展及预后紧密相关。血浆APN含量丰富、结构稳定，具有增敏胰岛素增敏、抗炎、保护和血管等多重作用。因此，APN不仅是有潜在临床应用价值的预防疾病及评价预后的生物标志物，而且有望成为糖尿病／代谢综合征及心血管疾病治疗的新靶点。然而，循环血液中APN半衰期短、浓度高、分子亚型复杂，为其临床应用带来挑战。本文就APN的生物学作用及临床应用前景作一综述。
- 廉坤张海锋孙璐陶凌
- 关键词：生物标志物预后评价治疗靶点脂联素疾病预防心血管疾病
