奎翔
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目云南省科技创新强省计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲/戊型肝炎重组抗原的表达、纯化及与传统甲肝疫苗免疫原性的比较被引量：1
- 2010年
- 目的比较基因工程重组抗原与传统疫苗的免疫原性;探讨同一载体表达不同抗原的能力和抗原间的相互作用。方法将编码甲型肝炎病毒Vp1aa24-171和戊型肝炎病毒ORF2aa431-615的重组表达质粒pBV220-EAAg342及pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL-21,筛选出高效表达的菌种进行目的蛋白的表达。用DEAE-sepharose FF和CM-sepharoseFF离子层析交换柱纯化表达重组蛋白,采用SDS-PAGE、Western blotting方法进行分析鉴定。用纯化的重组蛋白及传统甲肝疫苗灭活疫苗与减毒活疫苗免疫小鼠,比较特异性抗体的产生水平。结果表达的重组蛋白相对分子质量约为36000,表达量约占菌体总量的25%;且重组嵌合抗原EAAg342可以形成直径10～20nm的类病毒(virus-like particles,VLP)颗粒。Western blotting证实2种重组蛋白均能分别与甲型肝炎和戊型肝炎患者阳性血清发生特异性反应。免疫小鼠后可诱导产生高滴度的抗戊肝特异性抗体;而抗甲肝特异性抗体水平与传统甲肝疫苗相比较低。结论使用原核系统表达的甲/戊肝重组抗原能够高效表达,2种不同的融合蛋白均分别具有良好的抗原性和免疫原性,具有开发双价疫苗及同时诊断甲型戊型肝炎试剂盒的前景。
- 庞媛玉李鸿钧奎翔谢天宏张光明孙茂盛
- 关键词：甲型肝炎病毒戊型肝炎病毒免疫原性
- Neurturin基因的克隆及其在Vero细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的克隆Neurturin(NTN)基因,并在Vero细胞中表达。方法用RT-PCR方法扩增hNTN cDNA,并克隆至pcDNA3真核表达载体中,经Lipofectamine2000转染Vero细胞,挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及免疫荧光分析鉴定,并对转染后细胞的形态及生长状况进行分析。结果重组质粒pcDNA3/hNTN转染Vero细胞后获得了稳定表达克隆,且有目的蛋白表达,转染后细胞形态和生长特性发生了一定改变。结论获得了稳定表达NTN蛋白的Vero细胞株,为其移植并进行帕金森病猴基因治疗动物实验奠定了基础。
- 马开利孙茂盛施锐张莹杨芳奎翔谭振国李鸿钧
- 关键词：VERO细胞克隆帕金森病
- RNA干扰在乙型肝炎治疗研究中的进展
- 2007年
- 乙型肝炎(乙肝)一直是困扰医学界的一大难题,长期带毒使疾病迁延易导致肝硬化和肝癌的发生。传统的抗 HBV 治疗,并不能有效清除体内病毒。RNA 干扰现象的发现,引起了人们的浓厚兴趣。其高效性与高特异性为乙肝治疗带来了新的思路和希望。随着对 RNA 干扰了解的加深和新技术的开发,RNA 干扰用于治疗乙肝的研究取得了显著进展。本文试图总结近年来的研究成果,并展望未来可能的发展方向。
- 奎翔李鸿钧孙茂盛
- 关键词：RNA干扰
- SV40树突状细胞疫苗的制备及免疫效应研究
- 目的：建立外周血来源的猴树突状细胞体外培养扩增、诱导及鉴定的方法，制备SV40树突状细胞疫苗并对其免疫效应进行评价。方法：使用rhGM-CSF扩增猴单核细胞，使用rhIL-4诱导单核细胞向树突状细胞方向分化，使用SV40...
- 葛长勇易山李鸿钧张光明刘馨奎翔孙茂盛
- 关键词：SV40树突状细胞疫苗免疫效应
- 文献传递
- 甲/戊型肝炎病毒重组抗原基因的克隆及表达被引量：1
- 2008年
- 将甲肝病毒vp1编码基因（aa 24-171）和戊型肝炎病毒ORF2基因（aa 431-615）通过一段编码柔性甘氨酸链（Gly4 Ser Gly4）的基因片断连接,获得编码HAV/HEV融合蛋白基因（AEAg342）.将该融合基因插入质粒pBV220,构建表达质粒pBV220-AEAg342.将pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL21中进行表达,表达量约占菌体总量的20%,经离子交换层析纯化,目的蛋白纯度达90%以上.Western blot证实该蛋白能与甲肝及戊肝患者阳性血清发生特异性反映,为进一步开发双价疫苗和联合诊断试剂奠定了一定基础.
- 奎翔李鸿钧谢天宏张光明刘馨易山杨芳彭梅马开利孙茂盛
- 关键词：甲型肝炎病毒戊型肝炎病毒基因克隆
- 一种基因工程重组甲戊肝炎联合疫苗的制备方法
- 一种基因工程重组甲戊肝炎联合疫苗的制备方法，属于用基因工程制备疫苗的方法。本发明是将甲肝病毒（HAV）逆转录出全长cDNA插入携带T7启动子的转录载体，在2A-2B连接区顺序构建3甘氨酸肽链、多克隆位点及额外3C蛋白酶切...
- 李鸿钧奎翔孙茂盛周艳
- 文献传递
