呼莹
- 作品数:16 被引量:149H指数:5
- 供职机构:中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金:国家攀登计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体对K562细胞在裸鼠体内生长的影响被引量:5
- 2002年
- 目的观察人慢性粒细胞白血病细胞转导抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体基因后,对其在裸鼠体内生长的影响。方法应用基因重组技术构建逆转录病毒载体MSCV-ibE-IRES-eGFP,将胞内抗体基因转导K562细胞,观察胞内抗体的表达和细胞内c-ABL及BCR/ABL蛋白酪氨酸激酶活性的变化;将表达胞内抗体的细胞与对照组K562细胞及转导空载体的细胞分别移植裸鼠,动态观察肿瘤的生长。结果获得表达胞内抗体基因的细胞模型:K562-ibE,其靶蛋白酪氨酸激酶活性明显受抑。移植裸鼠后第14,21,28天肿瘤体积均小于对照组的1/2。结论转导抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的细胞在裸鼠体内生长明显受抑制,这可能与胞内抗体显著抑制细胞内BCR/ABL蛋白酪氨酸激酶活性,阻断BCR/ABL信号途径,促进细胞凋亡,降低了细胞的体内致肿瘤性有关。
- 徐冬宋俊敏呼莹郭虹曹德骏汪萍刘辉赵春华
- 关键词:胞内抗体K562细胞BCR/ABL酪氨酸激酶裸鼠
- 具骨髓间充质干细胞表型的成体干细胞移植造血被引量:25
- 2002年
- 目的为了探索骨髓成体干细胞是否能重建超致死剂量射线照射后小鼠的造血功能。方法采用液体培养分离,培养,扩增雄性小鼠骨髓成体干细胞,作为供体细胞,将受体雌性小鼠预先经Cs 137全身照射850rad后在4h内从尾静脉输入细胞。受体小鼠分为5组,每组10只:a正常小鼠不经任何处理;b输入6×106cell/只(0.3ml)新鲜全骨髓;c输入6×106cell/只(0.3ml)去基质细胞的造血细胞;d输入6×106cell/只(0.3ml)经培养后的成体干细胞,输注细胞后第1天上、下午肌肉注射各一次Granulocyte colony stimulating factor(G-CSF)等细胞因子;e注射D-Hanks液0.3ml /只。观察各组小鼠的存活情况,小鼠在输注前查尾静脉血,计细胞总数、涂片、分类,输细胞后每周各组分别取小鼠肝、脾、股骨,固定作病理切片,另外一侧股骨冲出骨髓,计数一条股骨有核细胞数、涂片、测定colony forming unit-granulocyte/macrophage(GM-CFU)值。结果输全骨髓组外周血有核细胞和骨髓有核细胞数及GM-CFU值在输注后的第1,2周都高于单输成?
- 呼莹马丽马冠杰姜学英赵春华
- 关键词:骨髓重建造血间充质干细胞
- 亚全能干细胞群生物学特性及移植应用研究被引量:4
- 2004年
- 赵春华房伯俊韩钦史明霞张伟郑春梅陈磊李静曹莹刘艳宁郭虹呼莹杨少光马丽马冠杰姜学英薛社普
- 关键词:全能干细胞胎儿分化潜能多能干细胞人体干细胞
- 成体骨髓源多能间充质干细胞移植后参与体内组织再生与修复的研究
- 目的:探讨成体骨髓源多能间充质干细胞在康复医学中的应用前景。对象与方法:1、分离小鼠骨髓单个核细胞,经特殊培养基培养,获得Flk-1+骨髓源间充质干细胞;2、动物模型的建立:雌性C57BL/6小鼠致死量照射后移植同基因骨...
- 赵春华房佰俊邓为民韩钦廖联明史明霞张伟郭虹刘煌昊葛薇李长虹呼莹马丽马冠杰张玲曹莹李董杨少光刘杰文姜学英尤胜国
- 文献传递
- 造血干细胞联合骨髓间充质干细胞移植实验效果观察被引量:5
- 2006年
- 目的:对骨髓问充质干细胞(MSC)在造血干细胞移植后造血重建中的作用进行探讨。方法:分离培养水囊引产4~5个月龄胎儿来源的骨髓MSC和脐血CD34^+造血干/祖细胞(HSC),作为供体细胞。23只重症联合免疫缺陷(scm)小鼠作为受体,随机分成4组,^137Cs全身照射350cGy后,在4h内从尾静脉输入供体细胞。①阴性对照组:5只,不输入任何细胞。②阳性对照组:6只,单纯输入HSC5×10^6ml^-1。③实验Ⅰ组:6只,输入HSC5×10^6ml^-1和MSC5×10^6ml^-1。④实验Ⅱ组:6只,输入HSC5×10^6ml^-1和MSC5×10^6ml^-1输注后观察各组小鼠的存活情况;每周计数外周血单个核细胞(MNC)总数;移植后第7周,PCR检测外周血人体细胞DNA,并用流式细胞仪测定供体骨髓人源细胞嵌合比例。结果:阴性和阳性对照组小鼠均于10d内死亡,骨髓病理切片提示小鼠死于骨髓衰竭。实验Ⅰ、Ⅱ组小鼠均保持良好的生存状态,皮肤黏膜无溃烂、出血,毛发无缺损。实验Ⅰ、Ⅱ组外周血象逐渐回升,第3周,实验Ⅱ组外周血MNC数量(2.63±0.32)×10^9L^-1,高于实验Ⅰ组的(1.33±0.21)×10^9L^-1(P〈0.01),第5周即恢复正常水平。第7周,实验Ⅰ、Ⅱ组小鼠外周血均检测出供体细胞;实验Ⅱ组人源细胞嵌合比例为(7.41±0.79)%,高于实验Ⅰ组(5.11±0.07)%(P〈0.05)。结论:SCID小鼠致死剂量照射后.联合输入HSC和MSC可明显促进造血干细胞移植后造血重建,且不增加移植物抗宿主病的发生率。
- 汪萍呼莹姜学英马冠杰宋永平赵春华
- 关键词:骨髓间充质干细胞小鼠重症联合免疫缺陷造血重建嵌合
- 成体骨髓源多能间充质干细胞移植后参与体内组织再生与修复的研究
- 目的:探讨成体骨髓源多能间充质干细胞在康复医学中的应用前景.对象与方法:1、分离小鼠骨髓单个核细胞,经特殊培养基培养,获得Flk-1+骨髓源间充质干细胞;2、动物模型的建立:雌性C57BL/6小鼠致死量照射后移植同基因骨...
- 赵春华房佰俊邓为民韩钦廖联明史明霞张伟郭虹刘煜昊葛薇李长虹呼莹马丽马冠杰张玲曹莹李董杨少光刘杰文姜学英尤胜国
- 关键词:干细胞移植康复医学骨髓源间充质干细胞动物模型
- 文献传递
- 成人和胎儿骨髓间充质干细胞的比较研究被引量:60
- 2002年
- 目的 比较成人和胎儿骨髓间充质干细胞 (MSC)的表型和生物学性状差异 ,为临床选择使用MSC提供实验依据。方法 取正常人和胎儿骨髓单个核细胞 ,在SF培养基中进行MSC培养 ,测定生长曲线。电镜观察MSC形态 ,利用流式细胞仪进行MSC表型测定和细胞周期分析 ;SA方法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原和vWF因子表达 ;通过碱性磷酸酶染色、苏丹黑染色及骨钙蛋白和脂蛋白酯酶mRNA的表达等来检测细胞向成骨、成脂肪细胞分化情况。结果 从成人和胎儿骨髓中可培养出MSC ,并保持多向分化潜能。两者在细胞形态、生长特性、表面抗原表达等方面是相似的。胎儿骨髓MSC的扩增潜力及多向分化能力明显强于成人MSC。成人骨髓MSC的粘附功能则强于胎儿。结论 从成人及胎儿骨髓中可分离培养出MSC ,在体外有效扩增且保持其低分化状态和多向分化能力。胎儿MSC较成人MSC更原始 ,具有更大的多向分化和体外扩增潜能 ,可作为组织工程的种子细胞 ;而成人MSC支持造血、促进造血功能恢复和重建造血的功能则强于胎儿 ,具有更广泛的临床移植应用前景。
- 呼莹马丽马冠杰姜学英赵春华
- 关键词:成人胎儿骨髓间充质干细胞
- 亚全能干细胞群生物学特性及移植应用研究
- <正>近年来,人体干细胞因为其广阔的应用前景而备受重视。干细胞为能够稳定生存、增殖并具有保持多系分化潜能的原始细胞,可分化为人体二百多种组织细胞。根据分化潜能,将成体干细胞分为全能干细胞、多能干细胞及组织干细胞,本研究我...
- 赵春华房伯俊韩钦史明霞张伟郑春梅陈磊李静曹莹刘艳宁郭虹呼莹杨少光马丽马冠杰姜学英薛社普
- 文献传递
- 胰腺源间充质干细胞的分离与鉴定被引量:24
- 2002年
- 目的研究胎儿胰腺间充质干细胞的表型和生物学性状。方法取胎龄为4~5个月水囊引产胎儿,将胰腺细胞在SF(含2%FCS)培养基中培养。测定生长曲线、成纤维细胞集落(Colony Forming Unit-Fibroblast,CFU-F)形成实验,利用流式细胞仪对培养细胞进行表型测定,细胞周期分析,SA方法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原、von Willebrand Factor(vWF)因子表达,体外诱导分化实验。结果从胎儿胰腺可培养出间充质干细胞,并可诱导成骨、软骨、脂肪、肌肉和神经细胞分化。结论从胎儿胰腺可分离培养出间充质干细胞,在体外有效扩增且保持其低分化状态。
- 呼莹王秋英马丽马冠杰姜学英赵春华
- 关键词:胎儿胰腺间充质干细胞
- 小鼠真皮间充质干细胞的生物学特性及促进造血恢复的研究被引量:9
- 2003年
- 目的 了解小鼠真皮间充质干细胞 (DMSC)的生物学特性 ,探索在体外DMSC作为滋养层能否促进造血细胞的增殖、分化 ,以及体内输入DMSC能否促进照射动物造血恢复。方法 体外采用液体培养 ,分离、扩增雄性小鼠DMSC ,检测第 2~ 3代细胞的生长状态、周期、免疫表型 ,并进行光镜和电镜形态观察。用DMSC作滋养层 ,接种去基质细胞的造血干细胞 ,观察细胞数及CFU GM变化。将培养 2~ 3代的DMSC通过尾静脉输给预先经1 37Cs全身照射 5Gy的雌性小鼠 ,定期检测外周血和骨髓细胞总数及CFU GM变化。结果 小鼠DMSC为贴壁细胞 ,表现为成纤维细胞样 ,具有梭形、多角形等细胞形态 ,免疫表型分析 :CD4 5、CD34 、HL DR阳性细胞占 1%~ 3% ,CD4 4、CD1 375 %~ 95 %阳性 ,细胞周期检测显示 83%的细胞处于G0 G1 期。体外实验 ,实验组细胞总数及CFU GM值在第 3周明显高于对照组 ,DMSC能有效地支持造血细胞增殖、分化达 7周。体内试验 ,注射DMSC组外周血和一条股骨有核细胞数、CFU GM值第 2周都明显高于单纯照射组 ,第 4周实验组有Y染色体阳性表达 ,证明输入细胞在受体内增殖、分化。结论 DMSC具有干细胞特征 ,能促进照射小鼠造血恢复。
- 马丽呼莹马冠杰姜学英赵春华
- 关键词:生物学特性造血恢复真皮间充质干细胞骨髓