目的探讨微孔板法、实时荧光PCR熔解曲线技术(简称“熔解曲线法”)、多色巢式实时荧光定量PCR技术(简称“Xpert法”)和罗氏药物敏感性试验(L-J药敏试验,简称“比例法”)用于快速筛查耐多药结核病(MDR-TB)的临床价值。方法从医院信息系统(hospital information system,HIS)连续收集2014年7月至2018年3月重庆市公共卫生医疗救治中心收治的确诊为结核病,且具有微孔板法、比例法、熔解曲线法、Xpert法检测MTB对利福平、异烟肼耐药性诊断结果的2792例患者资料;其中微孔板法、比例法采用阳性分离菌株检测,熔解曲线法和Xpert法采用患者标本直接检测。纳入同时具有微孔板法和比例法耐药性检测结果的1488例患者作为研究对象,其中341例行微孔板法+比例法+Xpert法检测利福平耐药性,87例行微孔板法+比例法+熔解曲线法检测利福平耐药性,66例行微孔板法+比例法+熔解曲线法检测异烟肼耐药性。以比例法为标准,采用SPSS13.0软件分别计算微孔板法、熔解曲线法、Xpert法检测利福平和(或)异烟肼耐药性的敏感度、特异度、符合率、Kappa值等。结果以比例法为标准,微孔板法、Xpert法、熔解曲线法检测利福平耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值分别为97.2%(731/752)、96.9%(713/736)、96.9%(731/754)、97.1%(713/734)、97.0%(1444/1488)、0.94,97.2%(140/144)、94.9%(187/197)、93.3%(140/150)、97.9%(187/191)、95.9%(327/341)、0.92,97.1%(33/34)、84.9%(45/53)、80.5%(33/41)、97.8%(45/46)、89.7%(78/87)、0.79;微孔板法和熔解曲线法检测异烟肼耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值分别为94.8%(751/792)、95.7%(667/697)、96.3%(751/780)、94.2%(667/708)、97.9%(1418/1448)、0.91,97.3%(36/37)、86.2%(25/29)、90.0%(36/40)、96.2%(25/26)、92.4%(61/66)、0.84。结论微孔板法、熔解曲线法、Xpert法检测利福平和(或)�
目的对重庆地区耐多药结核患者结核分枝杆菌进行基因分型,明确该地区基因类型的特征和流行情况。方法连续收集重庆市公共卫生医疗救治中心和重庆市第十二人民医院结核内科2013年7月至2015年3月753例临床诊断为耐多药结核患者的痰液或其他体液,采用液体培养法分离培养分枝杆菌,采用PCR方法对分枝杆菌分离株进行菌种鉴定,并使用多位点数目可变串联重复序列分析(multiple locus variable number of tandem repeat analysis,MLVA)方法进行基因分型。采用Bionumerics Version 3.0和phyloviz软件进行各基因位点的多态性和成簇分析。结果共分离培养出538例耐多药分枝杆菌菌株,经PCR鉴定确认结核分枝杆菌有503例(95.8%),非结核分枝杆菌有35例(4.2%)。北京家族型470例(93.4%,470/503),非北京家族型33例(6.6%,33/503)。503例分枝杆菌菌株共分为348个基因型,其中267例患者分离株为单一基因型,其余236例菌株可归入81个簇,成簇率为30.8%。北京家族型有76个簇,成簇率为30.8%,成簇比例为35.9%,非北京家族型有5个簇,成簇率为30.3%,成簇比例为33.3%。不同特征的耐多药结核人群对结核分枝杆菌北京基因型菌株易感因素分析:感染北京基因型菌株与性别无显著性关联(χ~2=2.68,P>0.05);与年龄呈显著性关联(χ~2=784.00,P<0.05)。结论重庆地区耐多药结核分枝杆菌的基因型存在明显的多态性,北京基因型占绝对优势;不同特征耐多药结核人群感染北京基因型菌株与性别无关,与年龄相关。
目的探讨实时荧光核酸恒温扩增检测技术（simultaneous amplification and testing，SAT）辅助诊断肺外结核的价值。方法收集2016年1月至2017年12月期间重庆市公共卫生医疗救治中心结核科、普通外科与骨科收治的482例患者肺外样本（主要为病变部位的脓液或手术取出物），根据患者病历记录的临床诊断分为肺外结核（试验组，433例）和排除结核病的其他疾病（对照组，49例）。所有标本同步采用培养法（联合罗氏培养法和BACTECMGIT960液体培养法两种方法，只要其中一种培养阳性就视为“培养法”结果为阳性）和SAT检测结核分枝杆菌，并对培养法阳性、SAT检测结果阴性的标本进行菌种鉴定。分别与培养法、患者临床诊断比较，并分析SAT检测的敏感度、特异度和临床辅助诊断肺外结核的价值。采用SPSS13．0软件进行分析，计数资料采用χ2检验，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果试验组127例培养法阳性的标本中TB-SAT检测阳性107例，阴性20例；306例培养法阴性的患者中Tt-SAT检测阳性73例，阴性233例。对照组1例标本培养法阳性、TB-SAT检测阴性，其余48例标本培养法与TB-SAT检测均为阴性。以培养法为标准，SAT检测MTB的敏感度、特异度分别是83．6％（107／128）、79．4％（281／354）。与患者临床诊断相比，则培养法的敏感度、特异度分别为29．3％（127／433）、98．0％（48／49）；SAT检测MTB的敏感度、特异度分别为41．6％（180／433）、100．0％（49／49）。培养法检测阳性率为29．3％（127／433），SAT法检测阳性率为41．6％（180／433），两者检测阳性率比较，差异有统计学意义（χ2=14．17，P〈0．05）。结论SAT检测技术辅助诊断肺外结核具有方便快速、检出率高、敏感度和特异度高等优势，具有较高的临床价值。
