吴济民
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
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- G蛋白偶联受体及其信号通路-2012年诺贝尔化学奖工作介绍被引量：4
- 2013年
- 2012年诺贝尔化学奖授予了罗伯特·莱夫科维茨（Robert J．Lefkowitz）和布莱恩·克比尔卡（Brian K.Kobilka），以表彰他们在G蛋白偶联受体研究中的杰出贡献。罗伯特·莱夫科维茨（图1）1943年出生于美国纽约。1962年在纽约的哥伦比亚学院获得学士学位；
- 吴济民李子健
- 关键词：G蛋白偶联受体诺贝尔化学奖信号通路
- HIP-55抑制异丙基肾上腺素诱导的心脏成纤维细胞ROS产生被引量：1
- 2013年
- 目的研究HIP-55在β-肾上腺素受体激动剂异丙基肾上腺素(Isoproterenol hydrochloride,ISO)诱导心脏成纤维细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生中的作用。方法分离培养乳大鼠心脏成纤维细胞,利用HIP-55腺病毒和HIP-55-shRNA腺病毒感染乳大鼠心脏成纤维细胞,获得过表达HIP-55或敲减HIP-55的心脏成纤维细胞。ISO刺激后,采用红色荧光探针dihydroethidium(DHE)以及绿色荧光探针二氯荧光黄双乙酸钠(2’,7’-dichlorofluoresce in diacetate,DCFH-DA)的方法检测细胞ROS的产生量。结果过表达HIP-55明显的抑制心脏成纤维细胞ROS的产生,相反敲减HIP-55明显促进心脏成纤维细胞ROS的产生。结论 HIP-55明显抑制ISO诱导的乳大鼠成纤维细胞的ROS的产生。
- 邢瑞杨承志吴济民鲁海燕吕志珍张幼怡李子健
- 关键词：Β-肾上腺素受体
- 异丙基肾上腺素诱导小鼠心脏成纤维细胞转分化的特征
- 2022年
- 目的 探讨异丙基肾上腺素(ISO)诱导原代成年C57小鼠心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的特征。方法 应用胶原酶法消化6~8周雄性C57小鼠心脏组织,分离并鉴定心脏成纤维细胞;在不同干预时间、传代数、血清浓度培养条件下,采用qPCR、蛋白质印迹法和固定细胞免疫荧光技术检测ISO(10μmol/L)刺激后成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白和纤连蛋白荧光强度、mRNA、蛋白表达水平。分析不同干预时间、传代数、血清浓度培养条件下ISO刺激时心脏成纤维细胞的转分化特点。结果 (1)较长干预时间(48 h)ISO处理可使成纤维细胞转分化标志物α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和纤连蛋白表达水平显著上调(P <0.05),而较短干预时间(24 h)ISO处理成纤维细胞转分化不显著(P> 0.05);(2)不同传代数心脏成纤维细胞对ISO刺激的反应不同,ISO刺激可以引起P1代和P2代心脏成纤维细胞转分化标志物表达水平显著上调(P<0.05),而培养到第3代和第4代,心脏成纤维细胞本身就已表现出了转分化;(3)血清浓度影响ISO引起的心脏成纤维细胞转分化,在0%和2%血清浓度下,ISO刺激引起转分化标志物表达水平上调(P <0.05),而在5%血清浓度下,ISO刺激心脏成纤维细胞与对照组相比转分化标志物表达水平差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 ISO刺激小鼠原代心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化时,在P1代和P2代用无血清或2%血清培养,ISO刺激48 h时,转分化标志物α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和纤连蛋白的表达最明显。
- 王蕊吴济民冯姗徐文丽陈显达赵明明曹宁王帅星张咪谷慧君肖晗张幼怡马克涛
- 关键词：异丙基肾上腺素心脏成纤维细胞转分化Α-平滑肌肌动蛋白纤连蛋白
- HIP-55基因缺陷对C57BL/6小鼠心血管系统生理功能的影响
- HIP-55 (hematopoietic progenitor kinase 1 [HPK1]-interacting protein of 55 kDa)也称为mAbp1或SH3P7,是一个包含多功能域的蛋白质.其结...
- 田爱炬杨承志吴济民张幼怡李子健
- 关键词：基因缺陷心血管生理功能
- HIP-55负调控p38 MAPK通路抑制异丙肾上腺素诱导的心脏纤维化
- 目的:研究HIP-55在β-肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素ISO诱导的心脏纤维化中的作用及机制。方法:体外分离培养乳大鼠的心脏成纤维细胞,利用HIP-55腺病毒和HIP-55shRNA腺病毒感染乳大鼠心脏成纤维细胞,获得...
- 邢瑞杨承志吴济民张幼怡李子健
- 异丙肾上腺素诱导FVB/N小鼠心脏肥大模型的建立被引量：5
- 2014年
- 目的:探索异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO,非选择性β-肾上腺素受体激动剂)诱导FVB/N小鼠心脏重塑的实验条件。方法:经皮下注射和埋泵控释两种途径给予FVB/N小鼠ISO诱导心脏肥大和纤维化,将每种给药途径的FVB/N小鼠随机分为ISO组和对照组。皮下注射给药途径:ISO组皮下注射ISO 14 d,对照组注射生理盐水;皮下埋泵给药途径:ISO组皮下埋泵控释给予ISO 14 d,对照组做假手术。两种给药途径ISO剂量均为30 mg/(kg·d)。采用心脏重量与胫骨长度比值(心胫比)、小动物超声心动图检测小鼠心室壁厚度等指标衡量心脏肥大程度。使用苦味酸-天狼猩红染色方法检测胶原沉积面积。结果:ISO皮下注射不能诱导FVB/N小鼠明显的心脏肥大和纤维化,且实验终点前有50%小鼠死亡。ISO皮下埋泵控释给药诱导FVB/N小鼠出现显著的心脏肥大,ISO组小鼠心胫比显著高于对照组[(10.60±0.40)mg/mm vs.(7.93±0.19)mg/mm,P<0.001],ISO组小鼠的左心室舒张末期后壁厚度显著高于对照组[(0.87±0.03)mm vs.(0.68±0.06)mm,P=0.0116],但ISO不能引起明显的心脏纤维化,小鼠全部存活。结论:ISO 30 mg/(kg·d)皮下埋微量泵2周可成功诱导FVB/N小鼠心脏肥大模型。
- 杨承志田爱炬孟增慧吴济民张幼怡郭丽君李子健
- 关键词：心脏肥大纤维化异丙肾上腺素动物小鼠
- 心肌细胞缺血缺氧早期释放巨噬细胞迁移抑制因子的机制
- 吴济民于海奕高娟王富华李刘宁张幼怡高炜王新宇
- 血管紧张素Ⅱ促进心脏成纤维细胞转分化的实验条件优化
- 2022年
- 目的:评估和优化血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心脏成纤维细胞(CFs)转分化模型的实验条件。方法:分别分离培养成年和新生C57BL/6小鼠的CFs,在完全培养液中培养至不同代数(P1~P4);无血清培养4 h后,更换为含不同浓度(0%、2%和5%)胎牛血清(FBS)的培养液,并给予AngⅡ(10-6mol/L)刺激不同时间(24和48 h)后,收集细胞样品;通过Western blot、细胞免疫荧光和qPCR技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)和纤连蛋白(FN)的表达水平,以评估CFs的转分化情况。结果:(1)培养代数:在培养不同代数的成年和新生小鼠CFs中,只有P1 CFs在AngⅡ刺激48 h后(无血清),α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05);(2)AngⅡ刺激时间:AngⅡ刺激24和48 h,无血清培养的成年小鼠P1 CFs中α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平均显著上升(P<0.05);P1新生小鼠CFs在无血清培养时,AngⅡ刺激48 h后细胞中α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平均显著上升(P<0.05);(3)培养液血清浓度:AngⅡ刺激48 h后,P1成年/新生小鼠CFs在含0%和2%FBS的培养液条件下,α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平显著上升(P<0.05)。结论:在含0%或2%FBS的培养液中,利用AngⅡ刺激24或48 h可以促进P1成年小鼠CFs出现显著的转分化,利用AngⅡ刺激48 h可以促进P1新生小鼠CFs出现显著的转分化。以上条件可作为细胞模型中研究CFs转分化较优的实验条件。
- 冯姗徐文丽吴济民王蕊赵明明曹宁陈显达王帅星张咪谷慧君张幼怡肖晗
- 关键词：心脏成纤维细胞转分化
