吴柳
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 生物质转化微生物资源的开发利用研究
- 在自然界中，微生物是生物质如纤维素、淀粉等的主要降解者，微生物产生的酶如纤维素酶、淀粉酶在生物质降解中起重要作用，生物质的有效转化利用对解决人类面临的能源危机、化石资源不断枯竭、环境污染日益加剧等问题具有重要意义。
- 张政王修坤吴柳段承杰刘君梁唐纪良马庆生冯家勋冼亮罗雪梅农清栋徐强胜杨齐周青鸟梁艳铃卢业飞
- 关键词：微生物基因筛选菌种资源
- 哈茨木霉A25-2纤维二糖水解酶Ⅰ基因的克隆及其编码催化功能域的序列在绿色木酶HP35-3中的表达被引量：1
- 2013年
- 本研究从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)A25-2总RNA中利用RT-PCR的方法扩增到其纤维二糖水解酶Ⅰ基因的cDNA序列,并对该基因编码的氨基酸序列进行分析,得到cbhⅠ基因中编码催化功能域的序列。将催化功能域编码序列克隆到表达载体pCP-GH中,用PEG-CaCl2介导的原生质体转化方法将重组质粒转化到绿色木霉(Trichoderma viride)HP35-3中,筛选得到12个转化子。以p-NPC为底物,测定了该12个转化子的酶活力,获得比活力最高的转化子Tv/CD Hl-CBM-5,其纤维二糖水解酶活力是HP35-3的3.8倍。SDS-PAGE分析表明,绿色木霉表达了导入的含A25-2纤维二糖水解酶Ⅰ催化功能域的编码序列。
- 卢业飞吴柳秦秀林冯家勋刘君梁
- 关键词：哈茨木霉绿色木霉原生质体
- 十字花科黑腐病菌中一个与趋化性相关基因的突变分析被引量：3
- 2015年
- 十字花科作物黑腐病,又称为野油菜黄单胞菌野油菜变种(Xanthomonas campestris pv.campestris,简称Xcc),该细菌是引起十字花科作物等植物发生黑腐病的病原菌,同时该细菌也是人们研究寄主与病原微生物相互作用的具体分子机理的模式菌之一。在Xcc 8004菌株基因组中,XC_2304编码的产物为一个趋化性蛋白。由于细菌的趋化性在病原学方面的意义是非常重要的,为评估XC_2304的功能,本研究利用p K18mob Sac B对XC_2304进行缺失突变,获得缺失突变体DM2304。植株试验发现,突变体DM2304对寄主植物的致病力下降约30%,其互补菌株CDM2304的致病力基本恢复至野生型水平,这表明XC_2304与Xcc致病力有关。利用毛细管法检测DM2304对18种物质的趋化性,结果表明突变体对木糖、苯丙氨酸、精氨酸、蔗糖以及核糖的趋化性比野生型弱。运动性分析发现,DM2304在含有0.3%、0.6%琼脂的NYGA板的游动性稍微降低,表明XC_2304与游动性有关。而DM2304的胞外纤维素酶、胞外蛋白酶、胞外淀粉酶、EPS产量、HR与野生型菌株相比均没有明显差异。本研究为十字花科黑腐病菌中其它与趋化性相关基因提供实验思路,对病原菌如何趋利避害的机制的研究具有一定的意义。
- 丘献娟吴柳陈正培陆光涛
- 关键词：十字花科黑腐病菌趋化性
- 哈茨木霉HP37-4纤维二糖水解酶Ⅰ基因的克隆及表达被引量：1
- 2013年
- 从哈茨木霉(Trichoderma harzianum)HP37-4中克隆得到纤维二糖水解酶Ⅰ基因的全长DNA序列,并从HP37-4总RNA中通过RT-PCR扩增得到该基因全长cDNA序列。序列测定分析表明该基因含有3个外显子和2个内含子,编码含505个氨基酸的多肽。利用生物信息学方法对该蛋白质的结构进行了分析,推测了其主要功能区的位置及结构特征。将该基因cDNA序列克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达该基因。SDS-PAGE分析表明该基因能在大肠杆菌中过量表达,但以不溶性的包涵体形式存在,经包涵体变性和多肽复性后,纯化得到了表达的重组蛋白。
- 吴柳张政卢业飞秦秀林刘君梁冯家勋
- 关键词：哈茨木霉纤维二糖水解酶基因克隆
