卫艳萍
- 作品数：23 被引量：22H指数：2
- 供职机构：焦作市人民医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省科技攻关计划国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微RNA-133a-3p靶向调控转化生长因子-β1/Smad3对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2022年
- 目的探讨微RNA(miR)-133a-3p靶向调控转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad3对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法选择2020年2月至2021年2月焦作市人民医院皮肤科收治的瘢痕疙瘩患者29例为研究对象,手术切取瘢痕疙瘩组织及其周围正常皮肤组织,分离培养瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)和正常皮肤组织成纤维细胞(NF)。取对数生长期KF细胞,随机分为空白对照组、miR-阴性对照(NC)组、miR-133a-3p组、miR-133a-3p+pcDNA3.1组、miR-133a-3p+pcDNA3.1-TGF-β_(1)组;空白对照组细胞不做任何转染,miR-NC组细胞转染miR-NC,miR-133a-3p组细胞转染miR-133a-3p mimic,miR-133a-3p+pcDNA3.1组细胞共转染miR-133a-3p mimic和pcDNA3.1,miR-133a-3p+pcDNA3.1-TGF-β_(1)组细胞共转染miR-133a-3p mimic和pcDNA3.1-TGF-β_(1)。实时荧光定量聚合酶链反应法检测组织和细胞中miR-133a-3p和Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(collagen Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。应用TargetScan数据库通过生物信息分析预测miR-133a-3p与TGF-β_(1)的3′非翻译区(3′-UTR)存在结合位点,构建含有预测结合位点的野生型(Wt)和突变型(Mt)TGF-β_(1)3′-UTR片段的荧光素酶报告基因载体,分别将用脂质体2000包裹的Wt TGF-β_(1)或Mt TGF-β_(1)报告基因载体与miR-133a-3p mimics或miR-NC共转染入KF细胞,将转染后的细胞设为miR-NC+Wt TGF-β_(1)组、miR-133a-3p+Wt TGF-β_(1)组、miR-NC+Mt TGF-β_(1)组、miR-133a-3p+Mt TGF-β_(1)组,双荧光素酶检测试剂盒检测4组细胞双荧光素酶活性。Western blot检测空白对照组、miR-NC组、miR-133a-3p组KF细胞中TGF-β_(1)、Smad3蛋白的相对表达量。结果瘢痕疙瘩组织中miR-133a-3p相对表达量显著低于正常皮肤组织(t=18.988,P<0.05)。KF细胞中miR-133a-3p相对表达量显著低于NF细胞(t=18.679,P<0.05)。miR-133a-3p组细胞中miR
- 卫艳萍谢彤阳王廷廷张宁宁
- 关键词：瘢痕疙瘩
- 针对Cox-2基因siRNA载体构建和沉默效应被引量：2
- 2007年
- 目的构建针对人Cox-2基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察RNA干扰对肺癌细胞Cox-2基因表达的沉默作用。方法设计Cox-2靶向的发夹状siRNA,依据设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSINsi-hU6载体,转化扩增后进行序列测定。用脂质体包裹转染人肺癌细胞NCI-H446,采用RT-PCR检测Cox-2基因mRNA表达的变化。结果把针对Cox-2基因的siRNA的双链寡核苷酸片段克隆入pSINsi-hU6载体,经过酶切鉴定与测序,结果正确;RT-PCR检测显示,Cox-2基因的表达水平明显降低。结论成功构建出显著沉默细胞Cox-2基因表达的siRNA载体。
- 赵国新徐慧丹赵新合冯龙卫艳萍胡军
- 关键词：RNA干扰COX-2RT-PCR
- miR-320及下游靶基因survivin在银屑病皮损中的表达被引量：2
- 2016年
- 目的检测寻常性银屑病皮损中miR-320及其下游靶基因survivin mRNA的表达水平。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测40例寻常性银屑病患者皮损及40名健康对照皮肤中miR-320、survivin mRNA的表达水平,运用双荧光素酶报告实验验证survivin是miR-320的靶基因。miR-320和survivin表达水平两组间比较采用t检验,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivin表达的相关性采用Pearson相关分析。结果与健康对照皮肤相比,寻常性银屑病皮损中miR-320表达量为对照组的(0.561±0.11)倍,表达明显下调(t=3.06,P<0.05);survivin mRNA表达量为对照组的(2.034±0.26)倍,表达水平明显上调(t=3.35,P<0.05);双荧光素酶报告实验结果提示survivin是miR-320的靶基因,寻常性银屑病皮损中miR-320与survivin mRNA呈负相关(r2=0.634,P<0.05)。结论 miR-320可能通过调控其下游靶基因survivin的异常表达参与寻常性银屑病皮损的形成过程。
- 卫艳萍张如幸史四季刘秀琴赵林栋
- 关键词：银屑病SURVIVIN
- 建立作用于CCR5启动子的药物筛选方法及初步应用
- 背景和目的:获得性免疫缺陷综合征(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染引起的。HIV...
- 卫艳萍
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征药物筛选萤光素酶活性检测
- 文献传递
- 人趋化因子受体5基因的克隆及原核表达
- 2008年
- 目的:构建人趋化因子受体5(CCR5)原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达。方法:从健康人外周血单个核细胞提取总RNA,以RT-PCR获得CCR5基因全长1059bp的完整编码序列;将其克隆入载体pGEM-T中,经限制性内切酶和菌落PCR分析并测序;再将阳性重组子中的CCR5片段与表达载体pQE80L连接并转化大肠杆菌DH5α,进行诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定。结果:SDS-PAGE和Western Blot分析表明,在30℃以IPTG诱导获得相对分子质量为41000的CCR5重组蛋白表达带,诱导4h后此蛋白表达量约为全菌总蛋白的25%。结论:成功获得人CCR5重组蛋白。
- 赵国新靳静冯龙马云云卫艳萍赵国强
- 关键词：趋化因子受体5基因克隆
- 人趋化因子受体5基因5′侧翼区功能分析
- 2008年
- 目的:分析人趋化因子受体5(CCR5)基因5′侧翼区的调控序列。方法:构建CCR5基因不同长度5′侧翼区的萤光素酶报告基因载体,分别转染入Jurkat细胞中,检测分析其萤光素酶活性。结果:CCR5基因5′侧翼区-1006bp至-1bp、-804bp至-1bp、-586bp至-1bp和-478bp至-1bp区段的pGL3重组质粒在Jurkat细胞中能表现出明显的萤光素酶活性。结论:CCR5基因5′侧翼区-478bp至-1bp序列中存在基因转录的主要上调元件。
- 靳静赵国新冯龙马云云卫艳萍赵国强
- 关键词：趋化因子受体5报告基因
- 人CXCR4基因启动子萤光素酶报告载体的构建及鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的构建并鉴定人CXCR4基因启动子萤光素酶报告载体,为AIDS的靶向基因治疗奠定基础。方法利用PCR技术扩增人CXCR4基因启动子的核心片段,克隆至含新霉素抗性的萤光素酶表达载体pGL3-neo,构建含CXCR4启动子的萤光素酶表达载体pGL3-neo-CXCR4,重组子经双酶切、PCR及测序鉴定。再将构建的载体用脂质体转染体外培养的Jurkat细胞株,检测萤光素酶的表达活性。结果扩增得到CXCR4基因启动子序列,克隆入pGL3-neo-CXCR4的CXCR4基因启动子序列与GenBank报道的一致,实验组(pGL3-neo-CXCR4组)萤光素酶的表达活性为869 159.0±62 618.8,与空白组(未转染组)的464.2±44.0和对照组(pGL3-neo组)的39 088.4±3867.9相比,差异有统计学意义(F=1415.124,P均<0.05)。结论成功构建了含人CXCR4基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3-neo-CXCR4。
- 卫艳萍马云云何婷玉冯龙郭文涛赵国强
- 关键词：CXCR4启动子
- 司库奇尤单抗治疗中重度斑块状银屑病临床观察被引量：2
- 2022年
- 目的观察司库奇尤单抗治疗中重度斑块状银屑病的临床效果及不良反应。方法中重度斑块状银屑病患者27例,给予司库奇尤单抗注射液每次300 mg,于第0、1、2、3、4周各注射一次,后每4周一次,共12周。并于第0、4、8、12周,记录患者银屑病皮损面积和严重度指数(psoriasis area and severity index,PASI),同时观察治疗期间27例患者出现的不良反应。结果27例患者均接受了12周的规律治疗。第4周13例达PASI 75,5例达PASI 90;第8周24例达PASI 75,16例达PASI 90;第12周26例达PASI 75,22例达PASI 90。所有患者治疗期间均未发生严重感染性疾病或恶性肿瘤等严重不良反应,1例发生轻症上呼吸道感染,表现为咳嗽、咳痰,给予抗感染及对症治疗后好转。结论司库奇尤单抗治疗中重度斑块状银屑病起效迅速,效果较好,不良反应较少且轻微。
- 张宁宁王廷廷谢彤阳卫艳萍
- 关键词：银屑病生物制剂
- 人舌癌Tca8113核外体对树突状细胞诱导CTL杀伤活性的影响
- 2008年
- 目的:探讨人舌癌Tca8113细胞核外体(exosomes)体外诱导外周血来源的树突状细胞(dendritic cell,DC)对CTL杀伤活性的影响。方法:抽取健康成人外周血,分离单核细胞,经贴壁获得树突状细胞前体细胞,在体外先后加入GM-CSF、rhIL-4、LPS和/或exosomes诱导培养9d,获得成熟DC;而未贴壁细胞经rhlL-2诱导培养,获得T淋巴细胞。设置舌癌Tca8113组和对照EC9706组,每组再根据效应细胞不同分为A组:Tca8113细胞核外体致敏的DC与T淋巴细胞共培养组;B组:未经致敏DC与T细胞共培养组;C组:单纯T细胞组。结果:A、B、C组效应细胞对Tca8113细胞株的杀伤活性分别为(78.56±2.26)%、(50.34±6.21)%、(26.47±3.52)%。A与B组、A与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),A组效应细胞对EC9706杀伤活性为(51.18±5.31)%,与对Tca8113的杀伤活性相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人舌癌Tca8113核外体能增强DC-CTL效应细胞对舌鳞癌Tca8113细胞株特异性的杀伤活性。
- 郑红卫艳萍赵国强董子明
- 关键词：树突状细胞CTL
- 伴持久性色素斑块的成人Still病一例
- 2021年
- 56岁男性患者,反复高热,胸腹部持久性色素斑块伴瘙痒7个月。皮肤科情况:胸腹部见大致对称分布的色素沉着性苔藓样斑块。皮损组织病理示:表皮角化过度伴角化不全,棘层轻度肥厚,棘层上部可见散在角化不良细胞,真皮浅层可见嗜色素细胞及色素颗粒。诊断:伴持久性色素斑块的成人Still病。
- 王廷廷张宁宁卫艳萍
