刘雪芹
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水产品中河流弧菌分离株OmpU基因的克隆测序与生物信息学分析被引量：3
- 2013年
- 目的对河流弧菌(Vibrio fluvialis)水产品分离株OmpU基因进行克隆测序和生物信息学分析,为建立该菌的检测方法和研制疫苗奠定基础。方法从市售水产品中分离细菌,采用表型和分子鉴定方法确定其种属,并测定其致病性和药物敏感性。根据弧菌属OmpU基因的序列特点,设计引物扩增河流弧菌OmpU基因,将其克隆到T载体上,筛选重组质粒并对其进行序列测定及生物信息学分析。结果从水产品中分离的2个菌株(Vf1和Vf2)经鉴定确认为河流弧菌,它们均具有致病性,对15种测试抗菌药物敏感。2株河流弧菌OmpU基因全长分别为1 044和1 005 bp,含有1个开放性阅读框,分别编码由348和335个氨基酸组成的OmpU蛋白,该蛋白N端前22个氨基酸为信号肽。序列比对结果显示2株河流弧菌OmpU基因的核苷酸及其推导的氨基酸序列相似性分别为82.6%和81.2%。OmpU蛋白序列在6种弧菌种内和种间的相似性分别为81.4%～99.2%和71.2%～78.1%。表位预测结果显示河流弧菌OmpU蛋白的B细胞线性表位主要集中在第24～28、45～53、113～116、153～156、215～221和242～254位氨基酸区域,6种弧菌具有1个共同的抗原表位基序KDG-A-D-S。结论 OmpU蛋白是弧菌属中较为保守的一类功能蛋白,共同的抗原表位基序有望成为检测多种弧菌的靶标和研制多表位疫苗的靶位。
- 戚莉芳刘雪芹张婷婷李槿年
- 关键词：河流弧菌克隆测序生物信息学分析
- 拟态弧菌OmpU蛋白的黏附功能及所介导的致病作用被引量：12
- 2014年
- 为了探明拟态弧菌OmpU蛋白的黏附功能,利用同源重组技术敲除基因组中OmpU基因,并构建其互补株,再经组合PCR方法和序列测定,证实了OmpU基因的缺失和互补。对野生株、缺失株和互补株进行了遗传稳定性、生长特性、生化特性、细胞黏附性、致病性等方面比较研究。结果显示,缺失株具有遗传稳定性;在相同的培养条件下,与野生株相比,突变株的培养特性和生化特性没有明显变化,生长速率略减慢,对实验草鱼的毒力降低了4倍,对鲤上皮瘤细胞(EPC)的黏附能力显著降低,下降了66.6%,而互补株的黏附能力和毒力又得到恢复,与野生株无明显差异。研究首次确证了拟态弧菌OmpU蛋白具有黏附功能,OmpU蛋白通过黏附参与致病作用。
- 王薇胡丹丹李槿年刘雪芹
- 关键词：拟态弧菌黏附性毒力
- 拟态弧菌OMPU蛋白的黏附功能及其受体结合域的确定
- 拟态弧菌(Vibrio mimicus，Vm)是一种广宿主病原菌，可感染各种水产养殖动物引起腹水病，严重威胁我国水产养殖业的健康发展。细菌黏附是病原菌引发感染的关键起始步骤，其实质是细菌黏附素与宿主受体之间相互作用，使病...
- 刘雪芹
- 关键词：水产养殖业拟态弧菌间接免疫荧光技术
- 文献传递
