刘雪梅
- 作品数：107 被引量：615H指数：13
- 供职机构：北京中医药大学东方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 清脑滴丸下调HIF-1α/BNIP3表达拮抗氧糖剥夺/复氧诱导C6胶质细胞凋亡被引量：1
- 2019年
- 目的研究清脑滴丸对氧糖剥夺诱导C6胶质细胞损伤的HIF-1α/BNIP3以及细胞凋亡的影响及机制。方法采用氧糖剥夺/复氧方法建立C6胶质细胞损伤模型。细胞分为正常组、模型组、清脑滴丸组。采用Western Blot法检测各组HIF-1α、BNIP3、Cleaved Caspase-3蛋白表达,免疫荧光染色法观察各组HIF-1α、Cleaved Caspase-3的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果与正常组比较,模型组细胞活力降低(P<0.01),HIF-1α、BNIP3、Cleaved Caspase-3表达增加(P<0.01,P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与模型组比较,清脑滴丸1.25 g/L组细胞活力升高(P<0.05),HIF-1α、BNIP3、Cleaved Caspase-3表达和细胞凋亡率均降低(P<0.01,P<0.05)。结论清脑滴丸抑制C6胶质细胞凋亡的作用机制可能与通过下调HIF-1α和BNIP3过表达,降低Cleaved Caspase-3表达有关。
- 何芳曾子修张昕洋梁晓王凤丽刘雪梅
- 关键词：细胞凋亡缺氧诱导因子-1Α胶质细胞氧糖剥夺
- 醒脑液对PAP双转基因痴呆小鼠行为学及脑内Aβ_(40)、Aβ_(42)的干预作用被引量：5
- 2014年
- 目的:研究醒脑液早期干预对阿尔茨海默病模型APPswe/PS△E9双转基因小鼠行为学及脑内淀粉样蛋白代谢的影响。方法:将75只PAP双转基因小鼠随机随机分为空白对照组(模型组)、阳性对照组、用药高剂量组、用药中剂量组和用药低剂量组,每组各15只。15只遗传背景相同的转基因阴性的小鼠作为正常动物组。所试药物稀释至相同体积灌胃给药,正常动物组及空白对照组给以等体积蒸馏水灌胃,连续灌胃4个月。采用Morris水迷宫测定小鼠空间学习记忆能力,避暗箱测定其条件学习记忆能力。采用ELISA法测定淀粉样蛋白40、42(Aβ40、Aβ42)的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠的学习记忆能力均有所下降,同时大脑组织内Aβ40、Aβ42的含量均增加。与模型组比较,阳性对照组、用药高剂量组及用药中剂量组小鼠大脑组织内Aβ40含量下降。结论:醒脑液可以干预淀粉样蛋白的代谢过程,从而减少脑内毒性蛋白的产生,进一步改善阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆能力。
- 常富业单媛莉张云岭王新祥郑宏马涛刘雪梅阎妍
- 关键词：转基因小鼠
- 蛋白质组学技术分析缺血性脑卒中大鼠脑能量代谢相关蛋白
- 目的：采用蛋白质组学技术鉴定缺血性脑卒中大鼠脑组织与能量代谢相关蛋白,探讨这些蛋白与缺血性脑卒中的关系.方法：线栓法建立缺血性脑卒中大鼠模型,随机分为：假手术组组和缺血1.5 h再灌注72 h模型组,提取缺血半暗带皮层组...
- 王凤丽刘雪梅张昕洋郑宏张允岭
- 关键词：蛋白质组学缺血性脑卒中
- 内生火热之毒致病特性探讨被引量：9
- 2018年
- 内生火热之毒(火毒)既是病理产物又是致病因素,其致病特性,引起当今中医学界广泛的关注和研究。火毒是在脏腑生理功能失调,气血津液运化失常的病理状态下,风、热、痰、瘀等诸邪内生,酿化蕴结,从热从火化生成毒,这是一个从量变到质变的过程。火毒一旦形成,除具有毒邪致病酷烈暴戾之性,突出特点是造成机体形质败坏,成为重大疾病临床突发、突变、进展,难治性疾病迁延恶化、难治难愈、难以逆转的主要原因和关键环节。
- 张昕洋刘雪梅陈志刚
- 关键词：致病特性
- 醒脑液对PAP双转基因痴呆小鼠脑内中性内肽酶基因和蛋白表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨中药醒脑液(XNY)对PAP双转基因痴呆小鼠大脑组织中中性内肽酶(NEP)基因和蛋白表达的影响。方法:分别采用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术观测正常对照组、模型组、西药对照组、XNY高剂量组、XNY中剂量组和XNY低剂量组小鼠大脑组织中NEPmRNA和NEP蛋白的表达。结果:与模型组相比,XNY高剂量组脑内NEP mRNA含量表达上调(P<0.01);XNY高剂量组和中剂量组NEP蛋白含量表达增加(P<0.01)。结论:醒脑液对双转基因痴呆小鼠大脑组织中NEP mRNA和NEP蛋白表达有较好的调控作用,说明醒脑液对防治老年性痴呆能起到良好效果。
- 张子洋常富业张允岭王新祥郑宏马涛刘雪梅闫妍单媛莉
- 关键词：中性内肽酶
- 利开灵对脑出血后大鼠脑水肿水通道蛋白-4表达的影响被引量：13
- 2011年
- 目的研究利开灵对脑出血后脑水肿的保护作用及可能的作用机制,进而探讨开通玄府、利水解毒法在脑出血后脑水肿中的作用。方法采用Rosenberg法改良后建立胶原酶诱导大鼠脑出血模型(n=9),造模后每隔12 h给予利开灵浓煎剂灌胃,于12、24、48、72 h每组3只灌注固定后取大鼠脑组织做常规HE染色,观察各组大鼠病理变化;每组6只对新鲜脑组织取材,W esternblotting方法检测脑组织水通道蛋白-4(AQP4)含量。结果在病理形态学方面,各时间点模型组大鼠较假手术组大鼠血肿区可见大量红细胞浸润,神经细胞坏死,无正常脑组织结构。利开灵组大鼠病理改变明显轻于各时间点的模型组大鼠。脑出血12、24、48、72 h模型组较相应时间点假手术组脑组织AQP4蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),除脑缺血12 h利开灵组外,其他时间点利开灵组较相应时间点模型组脑组织AQP4蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),初步得到脑出血12 h到72 h模型组脑组织AQP4蛋白表达的曲线,在12 h脑组织AQP4蛋白表达较低,在24 h表达较高持续到72 h,72 h模型组脑组织AQP4蛋白较12 h模型组升高(P<0.05)。结论利开灵通过对脑组织AQP4蛋白表达的调节,减轻脑出血后神经细胞肿胀,减轻脑水肿,有效保护脑组织。
- 闫妍张允岭常富业王新祥刘雪梅郑宏黄启福
- 关键词：脑出血脑水肿水通道蛋白-4利开灵
- 利开灵对脑出血大鼠脑组织CD14、TLR4 mRNA表达的影响被引量：10
- 2011年
- 目的:探讨脑出血后大鼠出血局部脑组织CD14、TLR4 mRNA表达的变化规律,并观察利开灵对其影响。方法:采用Rosenberg法改良后建立大鼠脑出血模型,并根据脑出血不同时点(12、24、48、72h),用RT-PCR方法动态观察假手术组、模型组、利开灵组大鼠出血局部脑组织CD14、TLR4 mRNA的表达,并观察利开灵对神经功能缺损体征及出血局部脑组织相应病理改变的影响。结果:模型组各时点CD14、TLR4 mRNA均明显升高,在48h达最高(P<0.01,P<0.05);同时发现利开灵可明显改善脑出血后神经功能缺损体征及出血局部脑组织病理形态损伤,并下调CD14、TLR4 mRNA过高表达。结论:CD14/TLR4信号通路可能参与了脑出血后病理损伤过程,利开灵对出血局部脑组织CD14、TLR4 mRNA表达有较好的调控作用,这可能是利开灵改善脑出血后脑水肿的作用机制之一。
- 傅晨张允岭常富业王新祥刘雪梅郑宏陶冶闫妍黄启福
- 关键词：利开灵脑出血白细胞分化抗原14TOLL样受体4
- 健脾益肾通络方对MPTP诱导的帕金森病小鼠肠道菌群与短链脂肪酸的调节作用被引量：1
- 2024年
- 目的探讨健脾益肾通络方(JYTR)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病小鼠肠道菌群组成和短链脂肪酸的影响。方法将成年雄性C57BL/6小鼠随机分成3组:空白组、MPTP组、MPTP+JYTR组,每组15只。采用爬杆、悬挂、横梁实验评估运动情况。采用免疫荧光法检测纹状体酪氨酸羟化酶(TH)的表达。采用蛋白印迹法检测纹状体和结肠中α-突触核蛋白(α-syn)的表达。采用16S核糖体RNA(16S rRNA)基因测序评估肠道菌群的变化。采用气相色谱质谱法(GC-MS)分析小鼠粪便短链脂肪酸的水平。最后对差异菌群和短链脂肪酸进行相关性分析。结果与MPTP组相比,MPTP+JYTR组小鼠悬挂评分增加(P=0.040),爬杆时间和横梁行走时间显著缩短(P=0.042、P<0.001);纹状体TH表达显著增加(P=0.045),纹状体、结肠中α-syn表达显著减少(P=0.011、P=0.037);肠道菌群alpha多样性、beta多样性显著改变;门水平方面拟杆菌门丰度增加(P=0.003),厚壁菌门、疣微菌门丰度均显著减少(P=0.001、P=0.011);科水平方面毛螺菌科丰度显著升高(P=0.001),嗜黏蛋白阿克曼菌科、丹毒丝菌科丰度均显著降低(P=0.008、P=0.004);短链脂肪酸中乙酸、丙酸水平均显著增加(P=0.014、P=0.010)。相关性分析显示爬杆时间、悬挂评分、横梁时间均与肠道菌群、短链脂肪酸存在相关性。结论JYTR可以通过调节肠道菌群失调和改善短链脂肪酸水平起到治疗帕金森病的作用。
- 郭春艳刘雪梅李艾洵张瑜周晶张允岭陈宝鑫
- 关键词：帕金森病肠道菌群短链脂肪酸
- 基于miR-335/ROCK2轴探讨补肾启智方对OGD/R损伤HT22细胞焦亡与应激颗粒的影响
- 2024年
- 目的:探讨补肾启智方通过调控微小RNA-335(microRNA-335,miR-335)靶向Rho家族相关蛋白激酶2(Rho associated protein kinase 2,ROCK2)蛋白,对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤HT22细胞焦亡与应激颗粒的影响。方法:取对数生长期的HT22细胞,随机分为空白组、模型组、补肾启智方组、miR-335抑制组、空病毒对照组、补肾启智方+miR-335抑制组。除空白组外,其余各组细胞均建立OGD/R损伤模型。采用CCK-8法检测细胞存活率,qRT-PCR法检测细胞miR-335 mRNA表达水平,Western blot检测细胞ROCK2、T细胞胞内抗原1(T cell intracellular antigen 1,TIA1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(c-Caspase-1)、消皮素D-N(gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清液白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)水平。结果:与空白组比较,模型组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.05)。与模型组比较,补肾启智方组细胞存活率、miR-335 mRNA水平升高,miR-335抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.01)。与空病毒对照组比较,miR-335抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.01)。与miR-335抑制组比较,补肾启智方+miR-335抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平升高,TIA1蛋白表达水平降低(P<0.01)。与模型组比较,补肾启智方组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平降低,TIA1蛋白表达水平升高,而miR-335抑制组细胞上述蛋白的表达趋势与之相反(P<0.05)。与空病毒对照组比较,miR-335抑制组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平�
- 傅晨巩俐王翎沣马承平刘雪梅
- 关键词：卒中后认知障碍ROCK2
- 补肾开窍方通过调控ERK1/2和铁死亡治疗糖尿病合并缺血性卒中机制研究
- 2024年
- 目的:采用网络药理学和分子对接、动物实验探讨并验证补肾开窍方治疗糖尿病合并缺血性卒中的分子作用机制。方法:雄性SD大鼠48只,随机分为假手术组12只和造模组36只,造模组大鼠第1天和第4天分别腹腔注射1%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,50 mg·kg^(-1))各1次,第14天采用大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立糖尿病合并缺血性卒中模型大鼠。将造模组大鼠随机分为糖尿病MCAO模型组(STZ+MCAO)、补肾开窍方高剂量组(18.7 g·kg^(-1))、补肾开窍方低剂量组(9.4 g·kg^(-1)),实验第7天糖尿病造模成功后开始给予中药,每天灌胃1次,连续8 d。TTC法测量大鼠脑缺血体积;Garcia JH法检测大鼠神经功能缺损程度;干湿重法测定脑含水量。明确补肾开窍方治疗糖尿病合并缺血性卒中的疗效。随后从TCMSP、HERB、GeneCards、OMIM、Disgenet数据库筛选补肾开窍方的活性成分和靶点,采用Cytoscape 3.8.0软件构建成分-靶点-通路关联网络;利用STRING数据库进行蛋白质互作(protein-protein interaction,PPI)网络分析,Metascape数据库进行基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析与京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路富集分析;采用分子对接软件对活性成分与核心靶点进行验证。随后采用免疫荧光染色法检测大鼠缺血侧皮层中p-ERK1/2表达,Western blot法检测p-ERK1/2、ERK1/2、GPX4、SLC7A11的蛋白表达。结果:动物实验结果显示,与假手术组相比,STZ+MCAO组大鼠血糖显著升高(P<0.01),神经功能评分显著降低(P<0.01),脑缺血体积和脑含水量显著增加(P<0.01),补肾开窍方高、低剂量组可逆转上述变化。网络药理学筛选得到活性成分436种,预测得到补肾开窍方的潜在靶点219个,PPI分析表明RELA、STAT3、ERK1、ERK2、JUN等为核心靶点。GO和KEGG分析显示补肾开窍方的作用机制可能与MAPK信号通路密切相关。分子�
- 刘孟涵傅晨刘云婷巩俐杨小蕊刘雪梅
- 关键词：缺血性卒中糖尿病ERK1/2网络药理学分子对接
