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刘诗琴: 作品数：12 被引量：36H指数：3; 供职机构：暨南大学更多>>; 发文基金：广东省教育部产学研结合项目湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生环境科学与工程轻工技术与工程生物学更多>>

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人N端脑钠肽前体(NT-ProBNP)单抗制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：5: 2016年; 目的获得人脑钠肽前体N端(NT-pro BNP)的高亲和力、高特异性的抗体,建立双抗体夹心ELISA法检测人血浆中NT-pro BNP。方法通过Discovery Studio4.0软件预测抗原表位,合成其表位肽偶联载体蛋白免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤细胞融合技术获得分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株,制备腹水型单抗。通过SDS-PAGE、ELISA等方法对获得的抗体性质进行鉴定,建立了双抗体夹心ELISA检测方法,并对120例临床血液样本中NT-pro BNP进行快速检测。结果获得6株能稳定分泌抗人NT-Pro BNP抗体的杂交瘤细胞株,其中4株单抗的腹水型效价高于1×10^(-6)。共筛选出4对能双抗夹心ELISA配对的抗体,其中Ab1与Ab5具有较高的灵敏度和较大的线性范围,其亲和力分别为1.0×10^(10)L/mol与5.9×109L/mol,检测线性范围:300~9 600 pg/ml。样本检测结果显示,自制试剂盒的阳性检出率为97.5%(78/80),阴性检出率为100%(40/40)。结论筛选获得1对高亲和力、高特异性的配对抗体,建立了双抗体夹心ELISA的检测方法,亦为新的快速免疫学检测方法的建立奠定了基础。; 刘诗琴黄建芳谈思怡邵晨晨向军俭; 关键词：双抗体夹心ELISA

bFGF单抗联合紫杉醇抑制MCF-7及MCF-7紫杉醇耐药株(MCF-7/Taxol)增效作用的分子机制: 2016年; 目的研究bFGF单抗联合紫杉醇（Taxol）抑制MCF-7细胞增殖、诱导细胞凋亡的分子机制;探讨bFGF单抗联合Taxol对耐药株MCF-7/Taxol的增效作用及机制。方法 CCK-8法检测bFGF单抗联合Taxol对MCF-7及MCF-7/Taxol增殖抑制率;流式细胞术检测二者联合对MCF-7、MCF-7/Taxol的凋亡作用;Western blot检测MCF-7及MCF-7/Taxol相关信号通路蛋白的表达变化。结果 CCK-8法检测结果显示bFGF单抗联合Taxol作用MCF-7、MCF-7/Taxol后对其增殖抑制率分别提高了13.40%~36.50%、9.56%~26.87%,联合能加强对细胞抑制作用。流式细胞术结果显示bFGF单抗联合Taxol作用MCF-7、MCF-7/Taxol后PI、FITC双阳性率分别提高了17.10%~23.20%、22.00%~22.70%,表明联合能加强对凋亡作用。Western blot结果显示MCF-7、MCF-7/Taxol中MabD9＋Taxol组能明显下调Raf-1、p-Erk、p-STAT3、Bcl-2、Caspase3,并上调p-JNK、Bax、cleavedCaspase3、cleaved PARP,其中Raf-1在MCF-7/Taxol中表达量较MCF-7明显下降。结论本研究揭示了bFGF单抗联合Taxol抑制MCF-7的如下机制：加强对Erk/MAPK通路的抑制,并加强上调p-JNK,下调p-STAT3的表达量,引起Bcl-2表达量下调,Bax表达上调,Caspase3、cleaved Caspase3、cleaved PARP表达变化引起细胞凋亡。且耐药株除具类似的抑制机制外,其Raf-1下调更加明显。; 邵晨晨黄建芳谈思怡刘诗琴向军俭; 关键词：紫杉醇 MCF-7

一种检测N端脑钠肽前体的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用: 本发明公开了一种检测N端脑钠肽前体的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用。所述杂交瘤细胞株3A2和4G8保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号分别为CCTCC NO：C201633和CCTCC NO：C201634，及其分泌...; 向军俭黄建芳刘诗琴

直接竞争ELISA检测大米样品中的重金属镉被引量：18: 2015年; 目的直接竞争ELISA方法检测大米样品中重金属镉。方法用纳米Ti O2对微波消解处理的大米样品中的重金属镉进行富集,通过比较不同p H值和不同洗脱体积来优化纳米Ti O2富集方法,再用直接竞争ELISA检测重金属镉的含量。结果在p H为9时,纳米Ti O2对重金属镉有良好的吸附性,20 mg/ml的EDTA·2Na可将纳米Ti O2吸附的镉定量洗脱。用纯化后的镉单克隆抗体建立直接竞争ELISA检测方法,并进行灵敏度和特异性分析,其灵敏度（IC50）为19 ng/ml,检测限（IC10）为2.1 ng/ml,检测范围（IC20~IC80）为3.6~98.2 ng/ml。用优化后的直接竞争ELISA对富集洗脱后的镉溶液进行检测,检测效果满足国家检测标准。结论本研究对6份市售大米样品采用微波消解和富集,通过直接竞争ELISA检测其镉含量,所得结果与仪器法测定结果一致,可用于实际样品的快速检测。; 刘艳梅钟辉黄建芳谈思怡刘诗琴邵晨晨向军俭; 关键词：重金属镉单克隆抗体

芒果多酚对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及机制被引量：3: 2013年; 用芒果多酚处理人宫颈癌细胞(Hela)后,采用MTT法检测细胞的存活率;Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期分布,同时用Western blot检测p53,p21,c-myc,cyclin D1蛋白质水平变化.结果显示:0.025,0.05,0.1,0.2,0.4 mg/mL的芒果多酚溶液能明显抑制Hela细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性;荧光染色后,大多数细胞内可以看见浓密的荧光颗粒,并出现核收缩;流式细胞术分析发现,与未处理组比较,芒果多酚作用后的G1期Hela细胞数显著增多,G2期细胞数逐渐减少;凋亡率明显高于对照组;Western blot检测显示芒果多酚上调p53,p21蛋白水平,下调c-myc,cyclinD1蛋白水平.以上结果表明芒果多酚能明显抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡.; 何丽芳罗秀云李玉中刘诗琴王芳宇; 关键词：HELA细胞凋亡

抗人肌红蛋白单克隆抗体的制备及应用被引量：3: 2015年; 目的制备高效价、高特异性的抗人肌红蛋白（MYO）单克隆抗体（m Ab）,建立ELISA双抗体夹心法检测人血清中MYO。方法用天然的MYO进行免疫,用杂交瘤技术获得稳定分泌抗人MYO m Ab的细胞株;制备腹水型m Ab,经亲和纯化后进行抗体特性鉴定;确定最佳配对组合并建立双抗体夹心ELISA一步法,对血清样本进行检测,并与进口试剂盒进行比较。结果共筛选出9株能稳定分泌m Ab的细胞株,其中2M1、3M4、5M7、10M4亲和纯化后效价达到（1.0-2.6）×10^6（A450约为1.0时的抗体稀释倍数）。抗体配对共筛选出3对能进行夹心配对的抗体（2M1/HRP-3M4、5M7/HRP-3M4、10M4/HRP-5M7）,其中5M7/HRP-3M4这个配对有较高的灵敏度和较大的线性范围;利用最佳配对组合5M7/HRP-3M4建立标准曲线,其线性范围为（25-1000）ng/m L,优于进口试剂盒的线性范围（25-500）ng/m L;样本检测结果显示,自制试剂盒的阳性检出率为95%（19/20）,阴性检出率为100%（40/40）。结论获得了2株高特异性,高亲和力的抗人MYO m Ab,建立了双抗体夹心ELISA一步法,为ELISA试剂盒的研制奠定了基础。; 杨全利刘诗琴谈思怡邵晨晨黄建芳向军俭; 关键词：细胞融合单克隆抗体 ELISA双抗体夹心法

人氮端脑钠肽前体(NT-ProBNP)单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立: 目的：获得人氮氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)高亲和力和高特异性的抗体，为建立NT-proBNP的免疫学检测方法奠定基础。方法：为制备针对NT-ProBNP特异表位的高特异性、高亲和力的抗体，运用Discover...; 刘诗琴邵晨晨谈思怡黄建芳郝代玲冯沛然向军俭; 关键词：单克隆抗体

芒果多酚的微波萃取及抑菌作用被引量：7: 2012年; 为探明提取芒果多酚最佳工艺条件及芒果多酚的抑菌作用,采用微波萃取法对芒果核多酚进行提取,并用滤纸圆片法测定其粗提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、伤寒杆菌的抑菌效果。结果显示,芒果多酚的最佳提取条件为乙醇浓度60%、料液比1∶30(g∶mL)、微波功率385 W、提取时间1min、抽提3次,在此条件下芒果多酚提取率达10.56%。芒果多酚溶液的抑菌效果为大肠杆菌>伤寒杆菌>金黄色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌,其对应的最低抑菌浓度为0.2mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL。结论:芒果多酚具有一定的抑菌能力,可用于食品贮存与加工。; 何丽芳罗秀云王芳宇李玉中刘诗琴; 关键词：微波萃取抑菌作用抑菌浓度

Taxol联合bFGF单抗抑制MCF-7的分子机制以及耐药机制的初步探究: 目的 :研究Taxol联合bFGF单抗抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞凋亡可能存在的分子机制。对Taxol联合bFGF单抗对耐药株MCF-7/Taxol机制进行初步探究。方法 :CCK-8法分别测定两种细胞对外加的b F...; 邵晨晨刘诗琴谈思怡冯沛然郝代玲黄建芳向军俭; 关键词：TAXOL; 文献传递

人氮端脑钠肽前体(NT-ProBNP)单克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立: 目的 :获得人氮氨基末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)高亲和力和高特异性的抗体,为建立NT-pro BNP的免疫学检测方法奠定基础。方法 :为制备针对NT-Pro BNP特异表位的高特异性、高亲和力的抗体,运用Dis...; 刘诗琴邵晨晨谈思怡黄建芳郝代玲冯沛然向军俭; 关键词：单克隆抗体; 文献传递

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