刘庆堂
- 作品数：65 被引量：217H指数：8
- 供职机构：河南省农业科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 三聚氰胺快速检测试纸条和试纸卡
- 本发明公开了一种三聚氰胺快速检测试纸条和试纸卡。试纸条含有衬板、样品垫、金标结合垫、纤维素膜、吸水垫，试纸条两端粘贴有保护膜，金标结合垫为吸附三聚氰胺金标抗体的玻璃纤维棉，在纤维素膜上有用三聚氰胺－载体蛋白偶联物印制的隐...
- 张改平邓瑞广职爱民杨艳艳王自良刘庆堂杨继飞柴书军赵东
- 文献传递
- 检测猪繁殖障碍性病毒传染病病原的试纸条
- 本实用新型公开了可检测猪繁殖障碍性病毒传染病病原的试纸条，它包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层，该吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成，在纤维素膜层上标记有一个含有抗猪/小鼠Ig...
- 张改平肖治军李学伍邓瑞广杨艳艳杨继飞赵东王爱萍邢广旭柴书军刘庆堂
- 文献传递
- 一步检测猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒抗体的试纸条
- 本发明公开了一种一步检测猪细小病毒、猪乙型脑炎病毒抗体的试纸条，该试纸条含有支撑层、吸附层和保护层，吸附层从测试端依次为样品纤维层、吸附金标物纤维层、纤维素膜层和吸水材料层；吸附金标物纤维层吸附有胶体金标记的SPA或胶体...
- 张改平肖治军邓瑞广李学伍杨艳艳杨继飞赵东王爱萍邢广旭柴书军刘庆堂
- 文献传递
- 二氟沙星单克隆抗体的研制及其免疫学特性的鉴定被引量：4
- 2008年
- 采用改进的碳二亚胺法,将半抗原二氟沙星(DIF)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(O-VA)偶联,制备得到二氟沙星全抗原DIF-BSA和DIF-OVA。采用紫外(UV),凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-DIF免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备二氟沙星单克隆抗体(DIF mAb),并对其效价、亲和力和特异性等进行鉴定。结果表明,BSA与DIF偶联成功,分子结合比为1:4.7,筛选出1H10、2F12、4D8共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:5.12×102、1:3.2×101、1:2.56×102,腹水效价分别为1:2.56×105、1:1.28×105、1:6.4×104。同种亚型分别为IgG1、IgG1、IgG2a,亲和常数(Ka)分别为2.94×1010L/mol、1.72×1010L/mol和1.35×1010L/mol。亲和力最高的1H10对DIF的IC50为2.2ng/ml,单抗与其他氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应。通过试验获得高效价、敏感、特异的mAb,适用于动物性食品中DIF的残留检测的免疫学试验。
- 李彬彬邓瑞广侯玉泽张改平王自良赵东刘庆堂柴书军
- 关键词：二氟沙星人工免疫原单克隆抗体免疫学特性
- 磺胺二甲氧嘧啶单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定被引量：5
- 2008年
- 用重氮化法将SDM(磺胺二甲氧嘧啶)偶联于载体蛋白BSA和OVA,合成免疫原BSA-SDM和包被原OVA-SDM,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE进行鉴定;用BSA-SDM免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌SDM mAb细胞株,用体内诱生腹水法制备SDM mAb;对SDM mAb的效价、亲和性、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果表明,BSA-SDM人工抗原制备成功,分子结合比约为1∶12.1;筛选出1B43、D9、4E1共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1∶3.2×102、1∶5.12×102、1∶8.1×102,腹水分别为1∶2.56×105、1∶2.56×1051、∶5.12×105,4E1亲和常数(Ka)为1.25×1010L/mol;4E1株对SDM的IC50为16.64ng/ml,与磺胺-6-甲氧嘧啶交叉反应率为5%,与其他磺胺类药物无交叉反应性。本试验获得了抗SDM高价、敏感、特异的mAb,可用于SDM残留检测的免疫学试验。
- 刘宣兵鲁晓翠张改平杨小保侯玉泽邓瑞广刘庆堂职爱民宋春美
- 关键词：磺胺二甲氧嘧啶单克隆抗体免疫学特性
- 特布他林人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备被引量：3
- 2010年
- 合成并鉴定特布他林(Terbutaline,TBL)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源TBL多克隆抗血清。分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,分别合成免疫抗原BSA-TBL和包被抗原OVA-TBL,并采用紫外分光光度法和SDS-PAGE进行鉴定,通过动物免疫试验获得鼠源多抗血清,并使用ELISA和阻断ELISA的方法对多抗血清进行了鉴定。结果表明半抗原TBL分别和载体蛋白BSA及OVA偶联成功;受免6只小鼠效价均达1×10-4以上,且1号小鼠多抗血清抗TBL的IC50为55.88ng/mL。试验成功合成了TBL人工抗原,并生产了高效价、高敏感性的鼠源多克隆抗血清,为TBL单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了坚实的基础。
- 职爱民王磊刘庆堂胡骁飞杨苏贞柴书军邓瑞广张改平
- 关键词：特布他林人工抗原
- 特布他林杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备与鉴定被引量：2
- 2012年
- 分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,用BSA-TBL免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-TBL包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原进行冲击免疫;无菌手术取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合建立分泌TBL单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备TBL mAb,并对TBL mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示,免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-4;融合后筛选出4C08-G5和3H3-A02共2株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×105和1∶1.02×106;4C08-G5株分泌的抗体对TBL的IC50为5.25ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于3%。本试验获得了抗TBL mAb,为TBL残留免疫检测方法的建立奠定了坚实的基础。
- 杨艳艳职爱民刘庆堂李靓李青梅柴书军胡骁飞邓瑞广张改平
- 关键词：特布他林杂交瘤单克隆抗体
- 泰乐菌素残留快速检测试纸条
- 本实用新型公开了一种泰乐菌素残留快速检测试纸条。试纸条底层为支撑层，中间层吸附层固定在支撑层上，外层保护膜固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为纤维层，吸附金标抗体纤维层，纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，其中在纤维素膜层上...
- 张改平赵东邓瑞广李学伍杨艳艳肖治军王选年王自良邢广旭杨继飞柴书军刘庆堂罗俊郝慧芳王丽腾蔓
- 文献传递
- 瘦肉精多残留联检试纸卡及其制备方法
- 本发明公开一种“瘦肉精”多残留分析的金标层析检测试纸卡，包括塑料支撑物和试纸芯，试纸芯由样品垫、金标物结合垫、层析膜和吸水垫依次粘贴到衬板上制成，金标物结合垫为吸附有二～五种混合金标抗体的玻璃纤维棉，金标抗体为胶体金标记...
- 职爱民胡骁飞张改平邓瑞广李孟顺杨继飞刘庆堂赵东邢广旭柴书军杨艳艳李青梅滕蔓
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- 附红细胞体病快速诊断试纸条
- 本发明涉及一种附红细胞体病快速诊断试纸条，包括底层的支撑层、中间层的吸附层和外层的保护层，吸附层固定在支撑层上，吸附层从测试端依次为纤维层、吸附金标二抗纤维层或金标抗原纤维层、纤维素膜层及吸水材料层；在所述的纤维素膜层上...
- 肖治军张改平王爱萍杨艳艳邓瑞广李学伍赵东邢广旭杨继飞柴书军刘庆堂
- 文献传递
