刘勃
- 作品数：14 被引量：41H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 嵌合性硫代磷酸修饰的反义c-myc寡脱氧核苷酸对动脉平滑肌细胞增殖抑制作用的研究被引量：1
- 1999年
- 目的：探讨ｃ－ｍｙｃ基因表达在血管平滑肌细胞增殖信号传导通路中的作用和采用反义ｃ－ｍｙｃ寡脱氧核苷酸抑制血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的作用。方法：采用针对大鼠ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ包括ＡＵＧ在内的翻译起始区的前５个密码子的嵌合性硫代修饰的反义ｃ－ｍｙｃ寡脱氧核苷酸（ＡＳ－ＯＤＮ），以ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ导入ＳＭＣ后，通过细胞计数和３Ｈ－ＴｄＲ掺入观察其对ＳＭＣ增殖的抑制作用。结果：ｃ－ｍｙｃＡＳ－ＯＤＮ不仅对从静止状态刺激的ＳＭＣ增殖有抑制作用，而且对处于增殖状态的ＳＭＣ的增殖也有显著抑制作用，这种抑制作用可因加入正义ｃ－ｍｙｃＯＤＮ而减弱甚至消除，而且随着剂量的增加，抑制作用越来越明显。一次性应用ｃ－ｍｙｃＡＳ－ＯＤＮ可达到较持久的作用。而正义ＯＤＮ和错配ＯＤＮ对ＳＭＣ增殖无影响。结论：ｃ－ｍｙｃＡＳ－ＯＤＮ以剂量依赖和序列特异方式抑制ＳＭＣ增殖。ｃ－ｍｙｃ基因表达在ＳＭＣ增殖的信号传导通路中起重要作用。为采用ｃ－ｍｙｃＡＳ－ＯＤＮ抑制ＳＭＣ增殖的反义战略防治再狭窄研究奠定了基础。
- 王家宁胡大一马雅銮高天祥刘勃
- 关键词：C-MYC基因SMCMRNA
- 反义c-myc RNA对大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用
- 1998年
- 构建一个含1．53kb反义c－myc片段的逆转录病毒载体PAS-c-myc，将其通过Lipofectin导入PA317细胞并经G418筛选获得分泌病毒上清液的阳性克隆。病毒上清波感染血管平滑肌细胞（SMC）经G418筛选获得抗性克区。DNA印迹杂交证实了反义c-myc片段整合于SMC基因组中。RNA印迹杂交证实了反义c－mycRNA在SMC中得到了表达，且显著降低了SMC中c－mycmRNA的水平。蛋白印迹杂交证实了反义c－mycRNA抑制了c－myc蛋白的翻译。提示：c－myc基因表达在SMC增殖中起重要作用。
- 王家宁胡大一陈文彦高天祥刘勃
- 关键词：血管内皮平滑肌细胞内皮细胞增殖
- 反义c-myc寡脱氧核苷酸对大鼠腹主动脉损伤后内膜增生的影响被引量：3
- 1998年
- 目的观察大鼠腹主动脉损伤后内膜增生的影响，为采用反义ｃｍｙｃ战略防治再狭窄的早期临床试验奠定基础。方法将反义ｃｍｙｃ反义寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）通过ｐｌｕｒｏｎｉｃｇｅｌ缓释系统和Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染导入系统，将其作用于大鼠腹主动脉损伤后的血管外膜，饲养三周后，处死动物，对所取的血管节段进行组织切片和弹力纤维染色，在显微镜下进行形态观察和采用图像分析系统进行图像分析，计算出内膜／中膜（Ｉ／Ｍ）面积之比和Ｉ／Ｍ厚度之比，并进行统计学分析。结果通过形态观察和Ｉ／Ｍ面积和Ｉ／Ｍ厚度之比，发现反义ｃｍｙｃＯＤＮ明显抑制了内膜增生，而且随着反义ｃｍｙｃＯＤＮ剂量的增加，其对内膜增生的抑制作用更加明显，而正义ｃｍｙｃＯＤＮ和错配ｃｍｙｃＯＤＮ与对照组相比，对内膜增生无影响。结论反义ｃｍｙｃＯＤＮ以剂量依赖性和序列特异性方式抑制了新生内膜的形成。
- 王家宁胡大一刘克英刘克英刘克英
- 关键词：血管内膜增生反义C-MYCODN
- 不同浓度的金属硫蛋白对离体豚鼠乳头肌缺氧、复氧电生理特性的影响被引量：1
- 1997年
- 为探讨金属硫蛋白（MT）对豚鼠乳头肌缺血再灌注损伤所致心律失常的影响，利用标准玻璃微电极技术，采用缺氧及复氧豚鼠乳头肌模型，模拟体内缺血再灌注损伤，观察不同浓度MT对豚鼠乳头肌电生理特性的影响。结果显示低浓度的MT（0．002mmol／L）对正常及缺氧和复氧豚鼠乳头肌的动作电位（AP）有关参数及自律性均无影响；中等浓度的MT（0．02mmol／L）仅使正常乳头肌的AP复极达50％时程（APD50）缩短24％（P＜0．05），但使缺氧乳头肌的AP复极达20％时程（APD20）、APD50和AP复极达90％时程（APD90）分别缩短68％、56％和43％（P均＜0．01），并使静息电位（RP）、AP幅值（APA）和0相最大上升速率（Vmax）分别增加30％、30％和45％（P均＜0．01）；高浓度的MT（0．1mmol／L）使正常豚鼠乳头肌的APD20、APD50和APD90分别缩短57％、54％和50％（P均＜0．01），并且RP、APA及Vmax分别下降22％（P＜0．05）、28％（P＜0．01）和29％（P＜0．05），而使缺氧豚鼠乳头肌的APD20、APD50和APD90分别延长92％、78％和50％（P均＜0．01），对RP、APA及Vmax无明显影响。在复氧期间，0．02mmol／L的MT可使自律性的发生率从77．8％降至55．6％（P＜0．05）；而0．1mmol／L的MT则使自律性的发生率从77.8％降至22．
- 李淑敏刘勃胡大一刘秀兰唐朝枢
- 关键词：金属硫蛋白再灌注损伤
- Effects of metallothionein on action potentials of anoxic and reoxygenated papillary muscles of guinea pigs
- 1998年
- 目的：研究金属硫蛋白（ＭＴ）对缺氧和复氧豚鼠乳头状肌动作电位的影响．方法：利用标准的玻璃微电极技术，将标本暴露于缺氧液（低氧，高钾，无糖，ｐＨ６８）和ＭＴ．结果：ＭＴ（００２ｍｍｏｌ·Ｌ－１）对正常豚鼠乳头状肌的动作电位无影响；单纯将标本暴露于缺氧液，明显使ＡＰＤ２０，ＡＰＤ５０和ＡＰＤ９０缩短，增高ＲＰ水平，降低ＡＰＡ及Ｖｍａｘ；缺氧液加入ＭＴ（００２ｍｍｏｌ·Ｌ－１）后，则使缺氧期间的ＲＰ，ＡＰＡ和Ｖｍａｘ的改变恢复正常，但ＡＰＤ进一步缩短；同时发现ＭＴ减少复氧期间导致的自律性的发生率．结论：ＭＴ具有钙调节剂的特征．
- 李淑敏刘勃刘勃刘秀兰唐朝枢
- 关键词：乳头状肌
- 组织源性血管紧张素Ⅱ介导大鼠心肌缺血预处理被引量：1
- 1997年
- 目的：探讨组织源性血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）在大鼠心肌缺血预处理中的作用。方法：采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ灌流技术，以停灌注４５分钟、再灌注１５分钟造成缺血再灌注损伤模型，观察缺血预处理对缺血再灌注损伤心肌的保护作用，及洛沙坦（ｌｏｓａｒｔａｎ）对这一作用的影响。采用放射免疫法测定心肌组织ＡｎｇⅡ含量。结果：缺血再灌注后，冠状动脉流出液中肌酸激酶、乳酸脱氢酶和肌红蛋白分别较对照组升高１７倍、１２倍和１１倍（Ｐ＜０．０１），组织丙二醛和钙含量分别增加５倍和１倍（Ｐ＜０．０１），缺血预处理使这些变化得到明显改善，而预处理前给予１０－６ｍｏｌ／Ｌ洛沙坦，则预处理的保护作用消失，组织ＡｎｇⅡ的变化与上述指标的变化相平行。还发现，５分钟停灌注反复３次后，组织ＡｎｇⅡ明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），而又显著低于缺血再灌注组（Ｐ＜０．０１）。结论：在缺血预处理对缺血再灌注损伤心肌的保护作用中，ＡｎｇⅡ是介导心肌缺血预处理的主要介质之一。
- 郝恒剑王文茂胡大一张全发刘秀兰刘勃刘秀兰
- 关键词：心肌缺血预处理
- Electrophysiologic effect of enalapril on guinea pig papillary muscles in vitro被引量：1
- 1997年
- 目的：研究依那普利（Ｅｎａ）对豚鼠乳头状肌电生理特性，哇巴因诱发的延迟后除极（ＤＡＤ）和触发电活动（ＴＡ）的直接作用．方法与结果：采用标准玻璃微电极技术记录豚鼠乳头状肌动作电位．Ｅｎａ呈浓度依赖性增加静息膜电位（ＲＰ）和动作电位幅度（ＡＰＡ），而对０期最大除极，超射，和动作电位时程无明显影响．Ｅｎａ１０μｍｏｌ·Ｌ－１则可明显抑制哇巴因０５μｍｏｌ·Ｌ－１诱发的ＤＡＤ和ＴＡ，ＤＡＤ幅度分别由５３±２３，５９±２８，７４±２１和８９±１３降至２６±０７，３１±１０，３７±１５和５３±１１（ｍＶ）（Ｐ均＜００１），刺激周长为２００ｍｓ时ＴＡ数目由３６±０７降至０８±０２（Ｐ＜００５）．结论：Ｅｎａ通过增加心肌细胞ＲＰ和ＡＰＡ抑制哇巴因诱发豚鼠乳头状肌ＤＡＤ和ＴＡ．
- 刘勃胡大一高渊刘秀兰
- 关键词：乳头状肌哇巴因
- 心钠素对豚鼠乳头肌动作电位和心室肌细胞钙通道电流的影响被引量：2
- 1997年
- 应用标准玻璃微电极和全细胞膜片钳技术研究了心钠素（ＡＮＰ）对豚鼠乳头肌动作电位和心室肌细胞钙通道电流的影响及其对β受体兴奋的拮抗作用。结果表明：ＡＮＰ可明显缩短动作电位时程，尤其动作电位平台期缩短较为明显，２０ｎｍｏｌ／ＬＡＮＰ灌流心室乳头肌可明显抑制β受体兴奋所致动作电位平台期的延长。ＡＮＰ这种作用的机制与其抑制心室肌细胞钙通道电流有关。
- 刘勃刘秀兰胡大一李楚文唐朝枢
- 关键词：心钠素钙通道动作电位膜片钳术
- 腺苷拮抗ISO对豚鼠心室肌细胞动作电位及内向整流钾通道作用机制的探讨
- 2000年
- 目的:探讨腺苷(ADO)拮抗异丙基肾上腺素(ISO)对豚鼠乳头肌动作电位和心室肌细胞内向整流钾通道电流(Inward rectifier potassium currents,I_(K1))的影响,阐明I_(K1)在儿茶酚胺增高性室性心动过速中的作用机制及ADO治疗的离子流基础。方法:采用标准玻璃微电极及全细胞膜片钳方法,分别记录ISO,ISO加腺苷对豚鼠乳头肌动作电位及心室肌细胞I_(K1)影响。结果:ISO延长动作电位时程(APD),诱发早期后除极(EAD),延迟后除极(DAD)及触发激动,增加L型-钙电流(I_(Ca-L))及I_(K1)。ADO抑制ISO所致APD延长,并抑制I_(K1)、I_(Ca-L)。腺苷A_1受体阻断剂(DPCPX)拮抗ADO的作用。结论:I_(K1)开放减弱ISO所致的APD延长,对心肌细胞具有保护作用。ADO拮抗ISO对APD的影响,与抑制I_(Ca-L)、I_(K1)有关。
- 张宏艳李小梅李万镇胡大一刘勃刘秀兰
- 关键词：腺苷钾通道动作电位异丙基肾上腺素
- 嵌合性硫代磷酸修饰的反义c-myc寡脱氧核苷酸对动脉平滑肌细胞迁移的影响被引量：2
- 1999年
- 目的：血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）迁移在血管成形术后再狭窄的发生中起着关键作用。ｃ－ｍｙｃ是对多种刺激ＳＭＣ迁移的生长因子作出迅速早期反应的基因。推测采用与ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ互补的寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）的反义战略可达到抑制ＳＭＣ迁移的目的。方法：将嵌合性硫代磷酸修饰的反义ｃ－ｍｙｃＯＤＮ通过ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ导入ＳＭＣ后，采用改良的Ｂｏｙｄｅｎｃｈａｍｂｅｒ方法检测ＳＭＣ的迁移率。结果：反义ｃ－ｍｙｃＯＤＮ作用的ＳＭＣ对１０％ＦＢＳ的化学趋化活性明显减弱，反义ｃ－ｍｙｃＯＤＮ显著抑制了ＳＭＣ迁移。而正义ｃ－ｍｙｃＯＤＮ和错配ｃ－ｍｙｃＯＤＮ处理的ＳＭＣ，与对照组相比，迁移率无差别。结论：（１）反义ｃ－ｍｙｃＯＤＮ对体外ＳＭＣ迁移的抑制具有序列特异性；（２）ｃ－ｍｙｃ基因表达在ＳＭＣ迁移的信号通路中起关键作用；
- 王家宁胡大一马雅銮马雅銮刘勃
- 关键词：PTCASMCC-MYCMRNA
