何敬波
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
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- 发文基金:湖北省卫生厅青年科技人才基金更多>>
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- 培养条件对小鼠髓源性树突状细胞生物特性影响的观察被引量:1
- 2013年
- 目的:明确GM-CSF浓度、IL-4及细胞起始培养密度对培养的小鼠髓源性DC生物特性的影响。方法:分离小鼠骨髓细胞,用100、20和2ng/mL GM-CSF联合或不联合IL-4以及起始细胞培养密度为2.5×105和7.5×105 mL-1进行体外诱导DC细胞培养,培养7d后收集细胞进行计数,同时用流式细胞仪检测CD11c+及CD11c+CD80+细胞的比例,并对GM-CSF联合或不联合IL-4培养的DC细胞吞噬肿瘤细胞的能力进行检测。此外以混合淋巴细胞反应(MLR)检测培养的DC细胞对淋巴细胞的剌激能力。结果:2ng/mL GM-CSF扩增的DC细胞为起始培养细胞浓度的0.21±0.05倍,与100ng/mL的0.52±0.10倍(t=10.311,P<0.001)及20ng/mL的0.46±0.04倍(t=6.934,P<0.001)差异均有统计学意义,但100ng/mL与20ng/mL组之间差异无统计学意义,t=1.333,P=0.152。此外,100ng/mL GM-CSF组CD11c细胞的比例低于低2ng/mL组,t=2.571,P=0.034;但100ng/mL与20ng/mL组差异无统计学意义,t=0.913,P=0.39。在20ng/mL GM-CSF时,IL-4的加入与否对培养的DC细胞扩增、纯度、成熟、吞噬及活化淋巴细胞的能力均无影响,起始培养细胞密度可影响细胞的扩增。结论:小鼠髓源DC细胞的培养中,GM-CSF浓度对细胞的扩增及成熟均很重要,高浓度GM-CSF有利于DC的扩增及成熟,而在GM-CSF为20ng/mL时,IL-4对DC细胞的培养并不是必需的。
- 何秋山张燕何敬波龚志敏易铁男
- 关键词:树突状细胞骨髓细胞因子动物