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代嘉陵
作品数:
6
被引量:10
H指数:3
供职机构:
中国科学院昆明动物研究所
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相关领域:
生物学
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合作作者
吴传芬
中国科学院昆明动物研究所
李靖炎
中国科学院昆明动物研究所
卢思奇
中国科学院昆明动物研究所
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中国科学院
作者
6篇
代嘉陵
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李靖炎
5篇
吴传芬
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卢思奇
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5篇
Zoolog...
年份
5篇
1996
1篇
1993
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6
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最原始的真核生物(源真核生物,Archezoa)贾第虫(Giardia)核骨架的初步检查
代嘉陵
嗜热四膜虫的着丝粒蛋白检查
1996年
目前国际上的着丝粒蛋白研究工作几乎全是以酵母和高等生物为材料进行的。为了从起源与进化的角度考察着丝粒蛋白,我们以人喉癌培养细胞HepⅡ作为对照材料,以两种ACA血清和CENP-B单抗、多抗以及CHO动粒蛋白单抗为探针,用间接免疫荧光和免疫印迹技术对嗜热四膜虫(Tetrahymenathermophila)作检查。免疫荧光结果表明,HepⅡ细胞的着丝粒抗原在间期核中呈点状分布:与HepⅡ细胞的不同,嗜热四膜虫的着丝粒抗原在问期核中的分布呈不规则的斑块状。免疫印迹结果表明,作为单细胞生物的纤毛虫虽然在进化上距离哺乳动物和人甚远,但却已具备了与哺乳动物和人的相似的着丝粒/动粒点抗原蛋白。这说明着丝粒和动粒的蛋白组分可能是发生得很早的,而且是相当保守的。
吴传芬
代嘉陵
杨新林
李靖炎
王永潮
关键词:
四膜虫
着丝粒蛋白
小眼虫的着丝粒蛋白检查
1996年
为了从起源与进化的角度考察着丝粒蛋白,我们从比酵母更低等的原生生物着手,检查它们的着丝粒蛋白。另文我们已报道了对四膜虫研究的结果,本文报道的是对小眼虫(Englenagracilis)的检查。我们的结果表明:眼虫细胞核里存在的ACA抗原的分子量,包括了用ACA血清在高等生物中检出来的CENP-A、CENP-B、CENP-C和CENP-D这几类基本的着丝粒蛋白组分。作免疫荧光染色后,细胞核呈很强的阳性反应,但分辨不出前着丝粒小点。核仁不被荧光染色,除了核仁外似乎整个核都被染色。这可能反映了抗原的分布在核内不是集中成点状的。经过制备核骨架的程序处理后,细胞核仍为阳性(尽管荧光较弱)。如此看来,眼虫至少已有相当大一部分的ACA抗原是与核骨架结合着的。对分离的细胞核作相应的抽提处理后再作免疫印迹检查,得到的阳性反应带也证明了这一点。
吴传芬
代嘉陵
李靖炎
王永潮
关键词:
小眼虫
着丝粒蛋白
涡鞭毛虫(甲藻)着丝粒/动粒蛋白的检查
被引量:4
1996年
利用ACA血清、抗人着丝粒蛋白B的单抗和多抗、抗CHO细胞动粒蛋白的单抗,对典型涡鞭毛虫隐沟虫(隐甲藻)(Crypthecodiniumcohnii)和特殊涡鞭毛虫尖尾虫(尖尾藻)(Oxyrrhismarina)的着丝粒/动粒蛋白进行了检查。用ACA血清作的荧光观察表明,隐沟虫的这些蛋白虽结合在核骨架上,但在间期时并不形成点状的前着丝粒。免疫印迹检查表明两种涡鞭毛虫的着丝粒蛋白B彼此一致,而且与四膜虫和眼虫的也高度一致。但用ACA血清作免疫印迹检查时,尖尾虫的蛋白虽与四膜虫和眼虫的相近,与隐沟虫的却有极大的差异。以抗动粒蛋白的单抗作此种检查时,尖尾虫与眼虫的反应带相同,而隐沟虫则与源真核生物(Archezoa)贾第虫(Giardialamblia)的相同;而且隐沟虫和贾第虫都与几种原细菌有两条相同的反应带,其中50kD的一条是尖尾虫和眼虫都没有的。上述发现不仅从一个新的方面支持了认为应把尖尾虫从典型涡鞭毛虫分出来独立为一个门的主张(李靖炎,1990),而且指出典型涡鞭毛虫在后真核生物(Metakaryota)中间是非常原始的。
吴传芬
李靖炎
代嘉陵
王永潮
关键词:
涡鞭毛虫
着丝粒
动粒蛋白
免疫印迹技术的一些改进
被引量:3
1996年
本文描述了作者在研究低等生物着丝粒蛋白过程中对免疫印迹技术所作的一些改进:1.分离胶由12%SDS聚丙烯酰胺均一胶改作5%—12%(或15%)的线性梯度胶,使不同分子量范围的蛋白都能得以较好地分离;2.用眼虫色素代替溴酚蓝作示踪剂,以能适时地终止电泳;3.转移由400mA3.5h改为200mA17h,由冰箱内空气冷却改为流水浴冷却,提高了冷却效率;4.对转移后的硝酸纤维素膜作除SDS处理;使转移后的蛋白在一定程度上得以复性;5.抗体孵育温度由37℃或室温1—2h改为4℃冰箱过夜,降低了本底,提高了印迹反应的特异性。我们已用改进后的方法对一些低等生物作了一系列的着丝粒蛋白研究,取得了比较满意的结果。
吴传芬
代嘉陵
李靖炎
王永潮
关键词:
免疫印迹
电泳
生化技术
源真核生物贾第虫与原细菌着丝粒/动粒蛋白的免疫印迹检查
被引量:4
1996年
以抗人着丝粒蛋白B的单抗和多抗以及抗CHO细胞动粒蛋白的单抗对源真核生物(archezoa)蓝氏贾第虫(Giardialamblia)和分别代表原细菌的3个枝的3种原细菌(Halobacterium、Thermoplasma、Sulfosphaerellus)作了免疫电泳检查,并以小眼虫和大肠杆菌作为对照。结果表明,3种原细菌都呈阳性反应;而且贾第虫的反应情况显然比纤毛虫、眼虫、典型涡鞭毛虫、尖尾虫(Oxyrrhis)等单细胞后真核生物的更接近于原细菌的情况。这不仅从一个新的方面为真核细胞起源于古代的原细菌的学说提供了新的佐证,而且从着丝粒/动粒蛋白方面证明了源真核生物贾第虫的原始性。本工作还为认识着丝粒蛋白B和动粒蛋白的起源和演化提供了线索。
吴传芬
李靖炎
代嘉陵
卢思奇
王永潮
关键词:
贾第虫
着丝粒
动粒蛋白
免疫印迹
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