齐秋锋
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠FABP3基因全长cDNA的克隆、真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的克隆小鼠FABP3基因的全长cDNA,构建其真核表达载体,并于COS-7细胞内表达。方法利用PCR技术扩增小鼠FABP3基因的开放阅读框序列,并在3′末端连接24bp的Flag标签,克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,构建表达质粒pcD-NA3.1-FABP3和pcDNA3.1-FABP3-Flag,并行PCR、双酶切及测序鉴定。将构建的重组质粒通过脂质体转染COS-7细胞,分别采用RT-PCR和免疫荧光法检测其FABP3mRNA及蛋白的表达情况。结果所构建的pcDNA3.1-FABP3和pcDNA3.1-FABP3-Flag重组载体可酶切出418bp的FABP3 cDNA片段和442bp的FABP3-FlagcDNA片段,经测序证实正确。转染后的COS-7细胞经RT-PCR可扩增出278bp的目的片段,且免疫荧光分析可见特异性的FABP3及Flag蛋白表达。结论构建了FABP3基因真核表达载体pcDNA3.1-FABP3和pcDNA3.1-FABP3-Flag,并于COS-7细胞中成功转录表达,为后续研究奠定了基础。
- 徐力致李励芸齐秋锋闻娟陈慧梅
- 关键词：脂肪酸结合蛋白质类COS细胞
- 血清TK1对肺癌患者的诊断和复发评估价值的研究被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨细胞质胸苷激酶1(TK1)在肺癌患者血清中的水平及其对肺癌的诊断价值和复发评估作用。方法:检测28例肺癌患者术前、术后1周和术后1个月的血清TK1水平,同时选取30例健康体检者作为对照。比较分析各组TK1水平差异以及术后TK1变化情况与肺癌患者无复发生存率(RFS)的相关性。结果:28例肺癌患者的TK1平均浓度为(2.954±0.176)pM,显著高于正常对照组的(1.063±0.163)pM(P<0.001),术后1个月TK1水平较术前显著下降(1.801±0.176)pM(P<0.001),且术后1个月TK1水平评估为PR组的患者无复发生存率(RFS)显著高于SD+PD组(P<0.05)。结论:血清TK1作为一种新的肿瘤标志物,在肺癌的诊断和复发评估中有着潜在的应用价值。
- 朱明韩卫卫齐秋锋包燕青张亚平刘永萍
- 关键词：肺癌
- 先天性心脏病患者CHD7基因突变的研究被引量：1
- 2008年
- 目的筛查先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）患者CHD7（chromodomain helicase DNA-binding protein gene）基因的胚系突变，探讨其在先心病发生中的作用。方法采集67例临床确诊的CHD患儿、100名正常对照的外周静脉血，提取白细胞基因组DNA，PCR扩增C1-h97基因，变性高效液相色谱分析技术对PCR产物进行突变筛选，出现异常峰型的扩增片段进行DNA测序，明确突变位点和类型，并进一步结合病例对照和生物信息学分析探讨变异的功能意义。结果67例先心病患者中共检出7种单碱基的替换，位于CHD7的不同内含子。其中，IVS11＋127A〉G和IVS12＋21T〉G的等位基因频率均为0．0075，为罕见变异；而Ⅳs2＋34G〉A、IVS4＋39G〉A、IVS12—5T〉C和IVS16＋51C〉A等位基因频率为0．2635、0．2156、0．1505、0．3636，属于单核苷酸多态性；IVS12—5T〉C在CHD组的检出频率显著低于正常对照组（5．42％VS9．57％，P〈0．05）；而IVS14—35C〉G则仅见于CHD患儿。生物信息学分析显示，IVS12—5T〉C替换具有增强外显子剪切的效应。结论CHD7基因单核苷酸多态性变异IVS12—5T〉C对CHD的发生可能具有保护作用，而CHD7基因的突变并不是构成散发性先天性心脏病的主要原因。
- 齐秋锋易龙杨驰陈慧梅沈力莫绪明胡娅莉王亚平
- 关键词：先天性心脏病变性高效液相色谱突变
