黄霞
- 作品数：11 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠异基因骨髓移植后TLR4/MyD88信号过表达与肠道急性GVHD的相关性
- 2014年
- 目的 探讨异基因骨髓移植后肠道急性移植物抗宿主病（GVHD）小鼠模型中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的表达及其与GVHD的相关性.方法 以雄性C57BL/6小鼠和雌性BALB/c小鼠作为骨髓移植的供、受鼠,受鼠接受致死剂量（8.0 Gy）的全身照射后4～6 h内,输注供鼠来源骨髓细胞（1×10^7个）及脾脏淋巴细胞（1×10^7个,n=12和2×10^7个,n=12）,分别建立轻度和重度小鼠急性GVHD模型,以未接受任何处理的正常BALB/c小鼠作为空白对照（n=6）.以受鼠临床表现、存活时间及小肠病理改变作为肠道GVHD的评价指标;采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测各组小鼠小肠组织中TLR4、MyD88和NF-κB p65mRNA及蛋白的表达,并分析其与GVHD进展的相关性.结果 小肠组织中TLR4、MyD88及NF-κB p65的表达均呈上升趋势.重度GVHD小鼠小肠组织中TLR4、NF-κBp65 mRNA水平较正常对照显著升高（P＜0.05）.各组小肠组织中蛋白的表达也有相同的趋势.此外,TLR4、MyD88和NF-κB mRNA间的表达不仅呈正相关,而且其与GVHD的临床评分也呈正相关（R=0.814,P＜0.001;R=0.828,P＜0.001;R=0.568,P=0.034）.结论 肠道GVHD模型小鼠小肠组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路呈明显的活化状态,基因转录和翻译水平均有增强,且与GVHD病情呈显著的正相关.
- 邢帅张学黄霞周平
- 关键词：小鼠骨髓移植移植物抗宿主病
- 弓形虫可溶性抗原混合液延长小鼠移植心脏存活时间
- 2011年
- 目的探讨弓形虫可溶性抗原混合液（STAgs）延长小鼠移植心脏存活时间的作用及其作用机制。方法通过在冰浴中超声粉碎弓形虫速殖子制备弓形虫STAgs。实验分为3组，每组受者9只。STAgs组和急性排斥反应（AR）组：供者为Balb／c小鼠，受者为C57BL／6小鼠，移植前4d两组受者分别皮下注射STAgs5μg和磷酸盐缓冲液100ul，同系对照组供、受者均为C57BL／6小鼠，术前未进行任何处理。分组后建立小鼠颈部异位心脏移植模型。术后观察移植心脏存活时间，术后第7天每组处死3只受者，获取移植心脏行病理学检查观察排斥反应，采用免疫组织化学检测移植心中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞。结果同系移植组在观察终点100d时均存活，AR组和STAgs组移植心脏存活时间分别为（6．7±0．5）和（70．8±3．5）d，3组间两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。术后第7天，同系移植组、AR组和STAgs组移植心排斥反应分级分别为0级、Ⅲ～Ⅳ级和0～I级；免疫组织化学检测显示STAgs组CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞比例明显少于AR组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论弓形虫STAgs能显著延长小鼠移植心脏的存活时间，减轻移植心脏的排斥反应，具体机制可能与弓形虫STAgs可影响TH1／Tst2比例相关，也可能通过刺激机体产生脂氧素A4抑制树突状细胞活化发挥作用。
- 王升方正明黄霞蔡兰军余道武方泽民唐燕雷罗鲜樟宫念樵明长生
- 关键词：弓形虫属可溶性抗原小鼠排斥反应
- 体外诱导imDC高表达HO-1显著增强其免疫负调节能力
- <正>目的:研究钴原卟啉(CoPP)诱导HO-1高表达对小鼠骨髓来源imDC致耐受性的影响及其体外免疫学机制。方法:采用流式细胞术、Western-blot、激光共聚焦技术等检测经CoPP、SnPP及LPS预处理的小鼠骨...
- 赵越贾钰王璐陈松黄霞陈刚
- 文献传递
- 熊果酸联合供者特异性淋巴细胞输注诱导小鼠免疫耐受被引量：1
- 2011年
- 核因子kB（nuclear factor—kB，NF-kB）是T细胞活化重要信号分子。我们前期研究发现T细胞特异性NF-kB活化障碍小鼠——IkBα△N．Tg小鼠，能够永久接受异基因心脏移植物。本研究将探讨以NF-kB为干预靶点的小分子化合物——熊果酸对小鼠异基因心脏移植的影响。实验方法如下：（1）流式细胞术分选获取C57BL／6（B6）脾脏T细胞并于体外培养。
- 刘勇李尧黄霞李超薛承彪胡昕鹏杨涛周平
- 关键词：免疫耐受熊果酸核因子ΚB
- 供心过表达微小RNA-499减轻心脏缺血再灌注损伤的研究
- 2014年
- 目的 观察供心过表达微小RNA-499 （miR-499）对心脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采用聚合酶链反应（PCR）行miR-499转基因小鼠鉴定.分别获取野生型C57BL/6小鼠（WT）和同系（C57BL/6背景）miR-499转基因小鼠（Tg）来源的供心,均置于4℃生理盐水中保存16h,检测保存液中心肌酶谱：肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的释放量.实验分为WT供心组和Tg供心组,建立同系小鼠腹部异位心脏移植模型,通过视诊和触诊观察不同小鼠供心经过冷保存,移植给相同受体后心功能的恢复,并于移植后24h获取供心,行苏木素-伊红（HE）染色,观察移植心脏组织病理学改变.结果 PCR结果显示miR-499转基因小鼠能检测到miR-499基因及相关载体片段,在图中呈现阳性条带;WT小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为（5 043.0±523.8） U/L和（1 068.0±150.0）U/L,Tg小鼠来源心脏的CK和LDH释放值分别为（3 667.0±194.7） U/L和（684.0±19.1） U/L,Tg小鼠心脏在冷缺血过程中,两种心肌酶谱的释放值均明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.移植后相同时间点观测结果显示,WT小鼠来源心脏的临床功能评分明显低于Tg小鼠,15 min时的平均评分分别为0.9分和2.3分,24 h的平均评分分别为2.1分和3.4分（P＜0.05）.移植后24 h,WT小鼠来源供心有大量炎性细胞浸润并伴有心肌细胞坏死,而Tg小鼠供心的炎性细胞浸润和心肌细胞坏死较少（P＜0.05）.结论 供心过表达miR-499能减轻心脏在冷缺血和热灌注过程中造成的炎性损伤和心肌细胞凋亡,有利于再灌注后心功能的恢复,在心脏移植过程中具有保护作用.
- 张玄黄霞栾宙王平良陈知水杨军
- 关键词：缺血再灌注损伤心脏移植
- 体外诱导imDC高表达HO-1显著增强其免疫负调节能力
- 赵越贾钰王璐陈松黄霞陈刚
- 人诱导性多能干细胞建系及肝细胞定向分化的研究
- 2016年
- 目的 探讨建立人诱导性多能干细胞（iPSC）及其在体外快速高效诱导分化为肝细胞样细胞的可能.方法 用核转染的方法将含有八聚体结合转录因子3/4（Oct3/4）和p53短发卡RNA（shRNA）、转录因子性别决定区Y框蛋白（Sox）2和Kruppe样因子4（KLF4）、LMYC和LIN28的质粒导入健康人的皮肤成纤维细胞中,将其重编程为iPSC后并通过细胞碱性磷酸酶染色、细胞免疫荧光染色及反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术对建立的iPSC进行鉴定.在体外,按照肝脏正常发育的生长进程,将iPSC向肝系细胞方向分化,于倒置显微镜下连续观察iPSC的形态学变化,并采用细胞免疫荧光染色方法检测各分化阶段的诱导细胞中特异性细胞分子标志表达.结果 成功获得与人胚干细胞相似形态特征的iPSC,并且碱性磷酸酶染色呈阳性,细胞免疫荧光染色及RT-PCR结果均显示建立的iPSC表达干细胞多能性标记分子Oct3/4、Sox2、Nanog、阶段特异性抗原4（SSEA4）和肿瘤排斥抗原-1-60（TRA-1-60）.在体外研究中,iPSC可成功被定向诱导分化为肝细胞样细胞,且70％ - 80％的诱导细胞表达肝细胞特异性标记蛋白白蛋白（ALB）及唾液酸糖蛋白受体1（ASGPR1）.结论 iPSC能够在体外高效分化为有功能的肝细胞样细胞.
- 杨博王兰谭如梦代辰张波王媒西魏来黄霞陈知水
- 关键词：诱导性多能干细胞肝细胞样细胞
- Galectin-7在人和鼠同种异体心脏移植物中的表达及其意义被引量：1
- 2013年
- 目的:通过检测发生急性排斥反应的小鼠及人移植心脏的galectin-7表达,进而分析galectin-7在急排发生过程中的作用。方法:建立小鼠心脏移植模型,分为鼠急排组和鼠对照组。Western blot法和免疫组化法检测小鼠移植心脏galectin-7的表达情况。选择15例心脏移植急排患者(人急排组)和10例正常人(人对照组),免疫组化法检测心肌组织galectin-7的表达。结果:鼠急排组galectin-7表达明显高于鼠对照组(1.34±0.18,0.77±0.03,P<0.01)。人急排组心脏galectin-7表达明显高于人对照组,且galectin-7主要定位于人急排心脏的浸润淋巴细胞及血管内皮细胞。结论:Galectin-7与人和鼠同种异体心脏移植急性排斥反应有相关性。
- 雒真龙周鸿敏黄霞方静徐洪来高义杨超潘铁成陈忠华
- 关键词：急性排斥反应心脏移植
- Toll样受体信号通路在小鼠皮肤移植免疫反应中的作用
- 2013年
- 目的研究树突状细胞（DC）中Toll样受体（TLR）信号通路在小鼠皮肤移植排斥反应中的作用。方法体外诱导培养得到BALB／c小鼠骨髓源性的不成熟DC，加入TLR激动剂CpG刺激细胞成熟，实验组同时加入TLR通路关键分子MyD88的抑制剂ST2825，24h后用流式细胞仪检测IX2共刺激分子CD80和CD86的表达；用荧光染料CFSE标记的C57BL／6小鼠T淋巴细胞与BALB／c小鼠的DC在CpG刺激下行混合淋巴细胞培养，实验组同时加入ST2825，培养3d后用流式细胞仪检测T淋巴细胞的增殖情况。建立BALB／c小鼠次要组织相容性抗原HY错配皮肤移植模型，供鼠均为雄性小鼠，受鼠均为雌性小鼠，在此基础之上分为对照组（供受鼠均为野生型BALB／c小鼠）、MyD88组（供受鼠均为MyDS8基因敲除的BALB／c小鼠）、DC组（供受鼠均为MyD88基因敲除的BALB／c小鼠，移植后输注供鼠来源的DC）、实验组（供受鼠均为MyD88基因敲除的BALB／c小鼠，输注经ST2825预处理的供者来源DC）。观察各组移植皮片的存活时间。结果TLR通路抑制剂ST2825可以剂量依赖性地抑制CpG刺激引起的DC共刺激分子CDS0和CD86的高表达。经Cpg刺激的IX；可以诱导同种反应性T淋巴细胞的大量增殖，ST2825可以呈剂量依赖性地抑制此反应。对照组移植物的存活时间为（22．8±2．8）d；MyD88组移植物均未发生排斥反应（存活时间超过100d）；DC组移植物存活时问为（9．7±2）d；实验组移植物亦未发生排斥反应（存活时间超过100d），较DC组显著延长（P〈0．05）。结论DC通过TLR信号通路在移植排斥反应中发挥关键作用，TLR信号通路抑制剂ST2825能够抑制DC的激活和生物学功能，其机理可能与ST2825抑制DC成熟，并间接抑制同种反应性T淋巴细胞的增殖有关。
- 李超黄霞杨涛张利民李明强周平
- 关键词：小鼠皮肤移植树突状细胞TOLL样受体
- 核因子-κB抑制剂熊果酸延长小鼠心脏移植物存活时间被引量：4
- 2011年
- 目的:研究熊果酸对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的作用。方法:体外实验:CD3、CD28单抗刺激B6小鼠T细胞,实验组加入不同浓度的熊果酸。24h后检测P65核转位程度;48h后检测T细胞表面CD25、CD69表达情况。体内实验:熊果酸用0.5%羧甲基纤维素钠混悬。行BALB/c到B6的小鼠心脏移植。实验组使用10mg/(kg·d)、30mg/(kg·d)的熊果酸灌胃。对照组使用相同剂量的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。观察术后7d时移植心CD4+、CD8+T细胞浸润情况,IFN-γ、IL-4mRNA水平和移植心存活时间。结果:熊果酸剂量依赖性抑制P65核转位。25μmol/L的熊果酸可将T细胞表面的CD25下调92.4%,CD69下调89.3%。10mg/(kg·d)熊果酸可将移植心平均存活时间(MST)延长至(23.8±1.3)d[P<0.05,与对照组(7.4±0.3)d相比]。而30mg/(kg·d)的熊果酸可将MST延长至(68.5±2.8)d。熊果酸组移植心内CD4+和CD8+T细胞浸润数量显著减少(P<0.05,与对照组比较),且IFN-γmRNA水平显著下调(P<0.05,与对照组比较),而IL-4mRNA水平无明显变化。结论:熊果酸可抑制T细胞NF-κB活化。体内应用熊果酸能显著延缓同种异体移植心排斥时间,这与熊果酸抑制T细胞活化,下调Th1反应相关。
- 刘勇李尧李超黄霞薛承彪胡昕鹏杨涛周平
- 关键词：排斥反应T细胞活化
