黄常志
- 作品数：65 被引量：358H指数：10
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国医学科学院基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 热休克蛋白70对X射线照射下wtp53蛋白的影响被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨反义热休克蛋白 70 (hsc70 )在X射线照射下对野生型p5 3(wtp5 3)的影响。方法 利用脂质体方法将本室构建的反义hsc70真核表达重组质粒pXAhsc70转染wtp5 3的MCF 7乳腺癌细胞 ,PCR证实外源DNA存在。Westernblot检测hsc70蛋白下降程度。X射线照射转染细胞后 ,检测wtp5 3蛋白的表达情况及半衰期变化。结果 转染重组质粒的细胞中hsc70蛋白下降 5 3% ;不同剂量X射线照射下 ,反义hsc70的存在能够提高wtp5 3的表达 ;4Gy相同剂量照射后 ,转染反义hsc70重组质粒的细胞中wtp5 3的半衰期延长。结论 反义hsc70能够上调wtp5 3的表达、稳定X射线照射下的wtp5 3蛋白并延长其半衰期 ;推测hsc70可能参与了wtp5
- 赵玫范云霞黄常志徐枫杜菲林梁
- 关键词：反义RNA热休克蛋白70X射线照射肿瘤
- 反义hsc70抑瘤效应的研究
- 本研究探讨反义hsc70 RNA对人乳腺癌细胞的体外增殖和体内成瘤能力的影响,观察反义hsc70 RNA对MCF7/Adr人乳腺癌细胞耐药性影响,研究其与突变型P53稳定性和肿瘤耐药之间的关系.
- 范云霞赵玫茆灿泉徐枫杜菲周纯乔绘红黄常志
- 关键词：肿瘤细胞耐药性乳腺癌细胞
- 文献传递
- 细菌荧光酶报告基因载体构建及在Hela细胞中的表达
- 1999年
- 采用ＰＣＲ点突变技术，构建含有细菌荧光酶融合ｌｕｘＡＢ报告基因的重组哺乳动物载体ｐｃＤＮＡ３－ｌｕｘＡＢ，脂质体ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ转染和Ｇ４１８抗性筛选稳定转染的Ｈｅｌａ细胞。ＰＣＲ和酶切电泳证明构建的正确性；经稳定转染ｐｃＤＮＡ３－ｌｕｘＡＢ的Ｈｅｌａ细胞，用发光仪可测得较强的发光强度（最大值为４．１２ｍＶ／４０μｇ细胞总蛋白粗提物）。而亲本及ｐｃＤＮＡ３稳定转染的Ｈｅｌａ细胞则在本底值范围，ｐｃＤＮＡ３－ｌｕｘＡＢ稳定转染与亲本及ｐｃＤＮＡ３稳定转染的Ｈｅｌａ细胞在细胞形态和培养条件等方面无明显差异。本工作为细菌荧光酶作为报告基因在肿瘤细胞中的表达和应用建立了基础。
- 茆灿泉杨树德赵玫范云霞徐枫杨华卫黄常志
- 关键词：报告基因PCR
- 以双质粒逆病毒载体系统快速建立梯度过表达hMTA1稳转单克隆细胞系的方法被引量：1
- 2012年
- 目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库,以阳性克隆为模板,RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础,经过多次酶切连接,构建逆病毒表达载体pMX-MTA1-flag-IRES-EGFP。将构建好的逆病毒载体系统,转染293-gag/pol细胞,包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞,获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿,获得大量单克隆细胞系,以GFP为筛选标志,筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、Western Blot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关,相关系数r=0.932,P<0.01。结论利用逆病毒表达系统,快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系,为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。
- 刘健王海娟张金龙常亚楠孟希亭张雪燕梁肖付明赵玫林晨黄常志钱海利
- 关键词：MTA1GFP单克隆
- 整合素相关激酶(ILK)研究进展被引量：10
- 2001年
- 细胞和细胞外基质以及细胞 -细胞之间的相互作用往往是通过整合素和生长因子受体介导的信号所引发。细胞内的效应因子将整合素和生长因子受体同下游组分相联系从而传递着相关的信息。整合素相关激酶 (inte-grin- linked kinase,IL K) ,已被证实为参与了许多信号传导通路 ,包括整合素 ,生长因子及
- 杜菲黄常志
- 关键词：ILK整合素信号转导
- 热休克蛋白在喉癌中的表达被引量：23
- 1998年
- 目的探讨热休克蛋白（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＨＳＰｓ）在喉癌组织及其正常喉粘膜中的表达。方法采用狭缝杂交（Ｓｌｏｔｂｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓ）技术对２１例喉癌组织及其正常喉粘膜的ＨＳＰ９０、ＨＳＰ７０和ＨＳＰ２７ｍＲＮＡ表达水平进行检测。结果①ＨＳＰ９０α和ＨＳＰ７０在喉癌组织中呈过度表达，表达量是自身正常喉粘膜的５倍以上。②ＨＳＰ２７和ＨＳＰ９０β在喉癌组织及正常喉粘膜中呈低水平表达，其表达量在两种组织中差异无显著性。结论ＨＳＰ７０和ＨＳＰ９０α在喉癌的致病过程中起着重要的作用。弄清它们的作用机理，将为ＨＳＰｓ用于喉癌的生物治疗提供理论依据。
- 徐先发赵玫施一江唐平章李庆宏黄常志
- 关键词：喉肿瘤热休克蛋白基因表达
- 肿瘤干细胞的研究进展被引量：1
- 2009年
- 近年来随着对肿瘤研究的不断深入,以及对干细胞了解的日益加深,越来越多的证据显示肿瘤与干细胞有着密切的关系,肿瘤可能是干细胞在异常微环境中差异分化的结果,并提出了肿瘤干细胞(tumor stem cell,TSC)的学说。本文综述了肿瘤干细胞的发现、特点,以及在肿瘤的诊断、治疗和预后判断中的作用,旨在为肿瘤发生发展研究及干细胞在肿瘤治疗方面的应用提供理论依据。
- 时岚赵玫黄常志
- 关键词：肿瘤干细胞
- 骨唾液酸蛋白与肿瘤被引量：1
- 2004年
- 骨唾液酸蛋白 (BSP)是存在于细胞外基质中的一种高度磷酸化和糖基化的分泌性非胶原蛋白 ,主要分布在矿化组织中 ,参与骨骼的矿化、转换、分化以及骨吸收等生理病理过程。近年来 ,BSP在骨转移瘤中的高表达提示它在肿瘤的生长、浸润和转移中发挥重要作用。现主要综述BSP的结构功能、调节机制及其与肿瘤的关系。
- 王晓霞黄常志
- 关键词：骨唾液酸蛋白肿瘤糖基化磷酸化
- 整合蛋白连接激酶:抗肿瘤药物作用的新靶点被引量：8
- 2002年
- 整合蛋白连接激酶 (integrin linkedkinase ,ILK)是一个Ser/Thr蛋白激酶。它能介导细胞与胞外基质的相互作用 ,并通过下游底物蛋白激酶B和糖原合成酶激酶 3将胞外信号向下游传递。从而增强细胞的侵袭能力、促进细胞周期循环的进行并抑制细胞凋亡。一些蛋白磷酸酶如PTEN和ILKAP能够对ILK的活性或其信号传导途径进行抑制 ,一些小分子的ILK拮抗剂也能抑制ILK的活性。抑制ILK可使细胞恶性度和成瘤能力下降 ,导致细胞凋亡和G1到S期细胞周期循环的停滞。这些结果显示 ,抑制ILK的活性将对某些肿瘤的治疗有着非常重要的意义。近来一些研究显示 ,某些非甾体类抗炎药。
- 林梁黄常志
- 关键词：抗肿瘤药物作用蛋白激酶B糖原合成酶激酶3蛋白激酶蛋白磷酸酶
- ILK、Hsp90相互作用及在胃癌中表达的研究被引量：4
- 2005年
- 目的:探讨ILK与H sp90在胃癌组织中的相互作用,了解它们及相关因子E-cadherin与胃癌临床病理的关系,以及胃癌患者血清中手术前后ILK与H sp90含量的变化。方法:用免疫共沉淀,蛋白杂交的方法研究ILK与H sp90的直接相互作用,用免疫组织化学方法测定ILK,H sp90,E-cadherin和M M P2在胃癌及癌旁组织表达,比较它们与胃癌临床病理的关系,使用Elisa方法,测定ILK与H sp90在胃癌患者血清中手术前后含量的变化。结果:用ILK抗体免疫沉淀下来的蛋白中检测有H sp90蛋白存在。ILK在40例胃癌组织中有28例表达阳性,阳性率为70%,而H sp90则在37例有高表达,阳性率为92.5%。其中28例ILK阳性者中有27位H sp90表达阳性。高分化胃癌分别有50%和75%表达,而低分化者为75%和100%。E-cadherin在正常胃粘膜上皮细胞均为阳性表达,而只有40%的胃癌组织呈阳性。其中高分化者有75%阳性表达,而低分化者仅为32.1%,没有转移的为90%,有转移的仅是23.3%。M M P2在癌组织中的表达阳性率为75%,高于癌旁正常组织,高分化者有50%阳性表达,而低分化者为78.6%,没有转移的为50%,有转移的是83.3%。用Elisa方法测定血清中ILK,H sp90抗体的含量。结果表明,手术前ILK、H sp90的含量分别为171.0ng/m l和199.0ng/m l,而手术后分别下降为142.6ng/m l和161.
- 刘骞赵玫赵平王晓霞袁兴华余权黄常志
- 关键词：胃癌HSP90ILK
