孙晓杰
- 作品数：77 被引量：326H指数：9
- 供职机构：齐齐哈尔医学院医学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省高等教育教学改革工程项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 蛋白激酶SGK3基因的克隆及其在乳腺癌细胞中的表达被引量：5
- 2015年
- 目的探讨通过克隆蛋白激酶(SGK)3基因并将其转染乳腺癌MCF-7细胞建立高表达SGK3的MCF-7细胞系的稳态性。方法利用真核表达载体N-端增强型绿色荧光蛋白(p EGFP-N1)通过基因克隆技术构建重组质粒,通过菌落PCR和DNA测序方法对重组质粒进行鉴定。通过PEI介导将重组质粒p EGFP-N1-SGK3转染至乳腺癌MCF-7细胞中,荧光显微镜和Western印迹方法对基因转染效率以及融合蛋白GFP-SGK3的表达进行鉴定。结果成功构建了真核表达质粒,将其命名为p EGFP-N1-SGK3;在荧光显微镜下可见多数细胞发出绿色荧光,表明获得了较高的转染效率;Western印迹结果显示,在转染p EGFP-N1-SGK3的细胞中可见阳性条带,而MCF-7亲本细胞和转染空载体的对照组细胞无阳性条带。结论成功构建了重组质粒p EGFP-N1-SGK3,获得了稳定表达融合蛋白GFP-SGK3的MCF-7细胞系,可用于后续SGK3细胞内功能的研究。
- 郭红艳孙晓杰李淑艳刘秀财刘波王宏兰蒋瑞雪
- 关键词：基因克隆乳腺癌
- 肝细胞生长因子针剂制备及其活性测定被引量：1
- 1996年
- 对临床应用的肝细胞生长因子针剂生产工艺进行了探索与改进，并对其活性进行了测定与比较。实验结果表明，肝细胞生长因子的生物学作用具有一定的量效关系，其疗效并不与浓度成正比，较理想的浓度为１．６ｍｇ（多肽）／ｍｌ。
- 徐文弟谷鸿喜赵炜明李呼伦宛文涵孙晓杰
- 关键词：肝细胞生长因子活性测定针剂
- 对生物化学与分子生物学教学内容进行重新组合的体会被引量：2
- 2000年
- 王淑英王波李淑艳孙晓杰姜涛许惠玉
- 关键词：生物化学分子生物学教学内容
- 过表达PI3Kp55γN末端氨基酸抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附性被引量：2
- 2016年
- 目的研究PI3K p55γ调节亚基N末端氨基酸过表达对乳腺癌细胞MDA-MB-231黏附性的影响,探讨其作用的分子机制。方法通过脂质体介导用重组质粒p EGFPN24瞬时转染MDA-MB-231细胞系。荧光显微镜和免疫印迹方法鉴定转染细胞中绿色荧光蛋白(GFP)以及融合蛋白GFP-N24的表达,细胞黏附实验检测细胞在胶原和纤黏连蛋白上的黏附性。免疫印迹实验检测细胞内源性E-钙黏素(E-cadherin)和磷酸化Akt(p Akt)的表达。酶谱实验检测基质金属蛋白酶9(MMP9)和尿激酶型纤维酶原活化因子(u PA)的表达与分泌。结果荧光显微镜下可见转染细胞因外源基因的表达而发出绿色荧光,胞浆分泌颗粒明显增加。免疫印迹结果显示,融合蛋白GFP-N24的表达量略低于空载体中GFP的表达量。过表达N24p55γ的细胞在纤黏连蛋白和胶原上的黏附性明显下降。细胞内源性PI3K下游信号分子磷酸化Akt的表达量下降,但N24p55γ的过表达不影响转染细胞中细胞黏附分子E-cadherin的表达。此外,N24p55γ的过表达抑制肿瘤转移相关基因MMP9的活化与u PA的分泌。结论 PI3K p55γN末端氨基酸过表达可能通过影响PI3K/Akt信号通路以及肿瘤转移相关基因MMP9和u PA的表达抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附性。
- 齐晓丹郭红艳张春晶衣同辉孙晓杰
- 关键词：乳腺癌细胞黏附
- 靶向敲降Linc00673对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制
- 2023年
- 目的靶向敲降长链非编码RNA 00673(Linc00673)基因,观察胃癌MGC-803细胞增殖、凋亡、细胞周期等生物学行为变化,初步探讨其可能的作用机制。方法将重组慢病毒表达质粒Linc00673-sh1和对照空载体质粒PSIH1转染胃癌MGC-803细胞,建立Linc00673敲降的细胞系,MTT实验和克隆形成实验观察细胞的生长增殖、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡、qPCR方法检测增殖相关基因及部分microRNA的表达,Western印迹检测磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路关键分子的表达。结果建立了Linc00673敲降的MGC-803细胞系,靶向敲降Linc00673可抑制MGC-803细胞增殖和克隆形成,促进细胞凋亡、G2M期细胞比例增加(P<0.05,P<0.01);Linc00673敲降可对MGC-803细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白(MMP)7、p19及miR1254、miR 4491表达产生影响;免疫印迹结果显示,靶向敲降Linc00673不仅抑制PI3K/Akt信号通路关键分子pAKT、核因子(NF)-κB和B细胞淋巴瘤(Bcl)-2的表达,而且降低肿瘤相关β-catenin和Zeste增强子同源物(EZH)2蛋白表达。结论Linc00673可能通过PI3K/Akt信号通路影响胃癌细胞生物学行为。
- 郭红艳徐亚茹李耕慧孙晓杰赵正林吴琦刘波
- 关键词：胃癌细胞增殖细胞凋亡
- 长链非编码RNA CCAT2在胃癌血清中的表达及临床意义
- 目的检测长链非编码RNACCAT2在胃癌患者和健康人血清中的差异表达,探讨其对胃癌临床诊断的效能及意义。方法通过实时荧光定量PCR方法检测胃癌和健康人血清CCAT2的表达,分析CCAT2的表达与胃癌临床病理特征的相关性;...
- 孙晓杰郭红艳张春晶
- 关键词：长链非编码RNA胃癌ROC曲线生物标志物
- 文献传递
- 研究性实验教学的探析被引量：5
- 2014年
- 研究性实验教学是高等院校人才培养的重要手段,也是新型实验教学理念的具体体现。文章介绍了高等医学院校研究性实验教学内容及常用的几种教学模式,剖析了如何通过研究性实验项目的科学设计,激发学生的科研兴趣,活跃学生的思维,促进学生对综合知识的运用,以培养学生创新能力、实践能力及研究能力。可为实验教学内容和方法改革提供借鉴。
- 张春晶齐晓丹李淑艳孙晓杰吴琦于海涛
- 关键词：研究性实验教学临床生物化学检验教学模式
- 抗菌肽Cn-AMP2双靶点抗菌机制的光谱学研究被引量：2
- 2018年
- 目的合成抗菌肽Cn-AMP2并用光谱学方法研究其抗革兰阴性菌和革兰阳性菌的作用机制。方法通过Fmoc固相合成的方式制备抗菌肽Cn-AMP2并测定抗菌肽Cn-AMP2对不同菌株的最低抑菌浓度。使用圆二色光谱法测定抗菌肽Cn-AMP2在不同缓冲溶液体系中的二级结构;以N-苯基-1-萘胺为探针进行细胞外膜渗透性实验。以溴化乙锭为荧光探针,通过肽与DNA竞争结合荧光光谱研究抗菌肽Cn-AMP2对细菌基因组DNA作用。结果通过Fmoc固相合成制备的抗菌肽Cn-AMP2经高效液相色谱纯化后,质谱测定分子量为1 266.40Da,表明合成无误。对革兰阴性菌和革兰阳性菌均具有较强的杀伤作用。针对不同菌株,最低抑菌浓度MIC为50.0~100.0μg/mL。在圆二色光谱测定结果表明抗菌肽Cn-AMP2为螺旋结构多肽。在模拟的疏水环境下,其摩尔椭圆率为-2 548 degree·cm^2·dmo^l(-1)。在细菌外膜渗透性实验表明细胞膜是抗菌肽的作用靶点。抗菌肽Cn-AMP2与基因组DNA具有结合能力,表明基因组DNA也是作用靶点。结论抗菌肽Cn-AMP2通过作用于细胞膜和基因组DNA产生抗菌作用。
- 王洁吴琦王宏兰孙晓杰衣同辉郭红艳齐晓丹刘哲丞
- 关键词：抗菌肽细胞膜DNA
- 细胞凋亡相关基因P53和bcl-2在乳腺癌中的表达被引量：9
- 2002年
- 目的 :研究凋亡相关基因P53和bcl- 2乳腺癌中的表达情况 ,以探讨其与乳腺癌发生发展的关系。方法 :采用免疫组化S -P法检测 31例乳腺癌中凋亡相关基因P53和bcl- 2的表达。结果 :31例乳腺癌中P53和bcl- 2的阳性表达率分别为 87%和 77.4% ;bcl- 2的阳性表达在乳腺癌高中分化组与低分化组间比较差异有显著性 (P <0 .0 5) ;P53和bcl- 2的共同阳性率为 70 % ,二者的共同阴性率为 0 ,二者表达之间无明显相关 (P >0 .0 5)。结论 :P53基因的突变以及bcl- 2的表达增高均与乳腺癌的发生发展相关 ,通过改变肿瘤的抗凋亡状态进行肿瘤的基因治疗 。
- 孙晓杰吴琦葛凤霞冯晓梅
- 关键词：细胞凋亡P53BCL-2乳腺癌免疫组化
- 研究性学习在临床生物化学检验实验教学中的应用
- 2013年
- 实验教学中应用研究性学习对培养学生学习兴趣,锻炼学生科研思维,提高学生分析问题、解决问题的能力及创新能力具有重要的意义。本文通过研究性学习的教学实践,阐述了研究性学习在实验教学中的基本阶段及应该注意的问题。
- 齐晓丹于海涛王宏兰孙晓杰李淑艳张春晶
- 关键词：研究性学习临床生物化学检验实验教学
