黄宁
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
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- S100A9促进胚胎干细胞向神经前体细胞分化中顶端—基底极化和神经管形成
- 2023年
- 目的 探讨胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)向神经前体细胞(neural progenitor cells, NPCs)分化过程中S100A9促进顶端-基底极化(apical-basal polarity, ABP)和神经管结构形成的作用。方法 采用免疫荧光观察体外培养ESCs向NPCs分化1、2、3和6 d时细胞管腔样结构排列,神经巢蛋白(Nestin)和配对盒因子6(paired box protein 6, Pax-6)表达,以及S100A9、N-钙粘蛋白(N-cadherin)和zonula occludens 1(ZO-1)定位变化。慢病毒转染下调S100A9及外源性S100A9重组蛋白干预细胞后检测对N-cadherin和ZO-1定位的影响。Western blot分析S100A9在ESCs向NPCs分化过程中不同时间点表达差异,同时观察S100A9对Notch1及下游centromere binding factor 1(CBF1)的调控。结果 ESCs在体外定向分化后第3天起表达Nestin和Pax-6,N-cadherin和ZO-1定位于顶端侧并呈现出ABP特征性神经玫瑰花状结构(neural rosette),细胞在第6天形成神经管结构。S100A9在分化后第3天起表达明显增加(P<0.01)并定位于顶端侧。下调S100A9后ESCs仍能分化为NPCs,但neural rosette数量明显减少(P<0.01)。予以外源性S100A9重组蛋白可部分恢复neural rosette数量(P<0.01)。在此分化过程中,下调S100A9降低Notch1及下游CBF1表达。结论 S100A9可能通过调控Notch1/CBF1参与ESCs向NPCs分化过程中ABP和神经管结构形成。
- 张翔岳建和黄宁
- 关键词：胚胎干细胞神经前体细胞神经管S100A9
- 替莫唑胺诱导胶质瘤非干性肿瘤细胞向肿瘤干细胞转分化的机制
- ＜正＞目的:替莫唑胺（TMZ）耐药是胶质瘤化疗后复发的重要因素,非干性肿瘤细胞（NSCCs）经诱导具有转分化为肿瘤干细胞（CSCs）的潜能。本研究将通过体内外实验明确TMZ触发非干性胶质瘤细胞（non-GSCs）向胶质瘤...
- 黄宁
- 文献传递
- 上调NPRL2表达对神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的抑制作用
- 2015年
- 目的:探讨抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator like-2)过表达对人神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:将NPRL2过表达的重组慢病毒LV-NPRL2感染SHG44和U251细胞后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中NPRL2m RNA和蛋白的表达水平,CCK-8和FCM法检测细胞增殖和细胞周期,蛋白质印迹法检测磷酸化3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(phospho-3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,p-PDK1)、磷酸化蛋白激酶B1(phospho-protein kinase B1,p-PKB1,又称p-Akt1)、p27和p21蛋白的表达水平,应用酶联免疫检测仪检测细胞中PDK1、Akt1、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)和CDK4的活性。裸鼠皮下成瘤实验观察NPRL2过表达对SHG44和U251细胞致瘤性的影响,免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和Ki-67增殖指数的变化。结果:LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞中NPRL2 m RNA和蛋白的表达水平均显著高于阴性对照组[SHG44和U251细胞感染阴性对照慢病毒(lentivirus-negative control,LV-NC)]和空白对照组(SHG44和U251细胞未感染任何慢病毒)(P值均<0.01)。LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞的增殖受到抑制(P值均<0.05),G0/G1期细胞所占百分比显著上升(P值均<0.01),S期细胞所占百分比显著下降(P值均<0.01),p-PDK1和p-Akt1蛋白的表达水平下调(P值均<0.01),p21和p27蛋白的表达水平上调(P值均<0.01),PDK1、Akt1、CDK2和CDK4的活性水平显著下降(P值均<0.01)。LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞在裸鼠皮下的成瘤能力(P<0.05)以及移植瘤组织中PCNA和Ki-67的增殖指数显著低于阴性对照组(P值均<0.01)。结论:NPRL2过表达可以抑制人神经胶质瘤SHG44和U251细胞的增殖,其机制可能与抑制PDK1/Akt1信号转导通路有关。
- 田琪黄宁程远
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖细胞周期
- 吲哚美辛增强阿霉素对胶质瘤U251细胞毒性的研究被引量：3
- 2013年
- 非甾体类抗炎药物(nonsteroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)能增强化疗药物对肿瘤细胞的细胞毒性作用。该研究首先筛选出无细胞毒性剂量的吲哚美辛,采用MTT法和流式细胞仪分别检测阿霉素或阿霉素联合低剂量吲哚美辛对U251细胞增殖和早期凋亡的影响;并应用RT-PCR和Western blot检测吲哚美辛对ABCG2、MDR1和MRP1的影响。结果显示,20μmol/L吲哚美辛对胶质瘤U251细胞无显著生长抑制(P>0.05),可作为无细胞毒性剂量使用;0.8 mg/L阿霉素组和20μmol/L吲哚美辛联合0.8 mg/L阿霉素组与对照组相比细胞增殖显著下降(P<0.05),且吲哚美辛联合阿霉素组较单独使用阿霉素组的生长抑制作用更为显著(P<0.05);72 h后单独使用阿霉素组和阿霉素联合吲哚美辛组细胞早期凋亡率均增加(P<0.01),但阿霉素联合吲哚美辛组较阿霉素组凋亡率上升更为明显(P<0.05);RT-PCR和Western blot证实吲哚美辛能够下调ABCG2、MDR1和MRP1的表达(P<0.05)且呈现出浓度依赖性。提示吲哚美辛能够增强阿霉素对胶质瘤U251细胞的生长抑制作用,其机制与吲哚美辛下调耐药基因的表达有关。
- 黄宁程远
- 关键词：胶质瘤吲哚美辛阿霉素耐药基因
- EGFRvⅢ与S100A9在人脑胶质瘤中的表达、相关性及其与预后的关系被引量：3
- 2016年
- 目的：探讨表皮生长因子受体变异体Ⅲ（epidermal growth factor receptor variantⅢ，EGFRvⅢ）和S100钙结合蛋白A9（S100 calcium binding protein A9，S100A9）在人脑胶质瘤组织中的表达水平及其相关性，以及2种蛋白表达与胶质瘤预后的关系。方法：收集重庆医科大学第二附属医院2008年1月-2015年4月收治的110例经病理确诊的新发胶质瘤标本及其临床资料。同时，收集10例非肿瘤脑组织作为对照。采用免疫组织化学法检测胶质瘤标本和对照脑组织中EGFRyⅢ和S100A9蛋白的表达水平，运用Spearman等级相关分析法分析蛋白表达与胶质瘤患者临床病理因素的相关性。随访其中75例胶质瘤患者，实访67例，采用Kaplan—Meier法对随访资料进行生存分析。结果：低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ级）中EGFRvⅢ的中高表达率为20．00％，而高级别胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）中EGFRvⅢ的中高表达率为38．00％，两者差异有统计学意义（P〈0．001）；低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ级）中$100A9的高表达率也明显低于高级别胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）中S100A9的高表达率（11．67％vs66．00％，P〈0．001）。EGFRyⅢ和S100A9蛋白表达水平之间呈明显的正相关性（rs=0．785，P〈0．001）。Kaplan—Meier生存分析表明，EGFRvⅢ和S100A9蛋白均表达阳性的胶质瘤患者的预后较差（P=0.002）。结论：EGFRvⅢ和S100A9蛋白均随着胶质瘤恶性等级升高而表达增强。联合检测EGFRvⅢ和S100A9蛋白水平可以有效判断胶质瘤患者的恶性程度及预后，有助于为胶质瘤患者制定个体化的治疗方案。
- 唐家泽黄宁程远
- 关键词：神经胶质瘤预后受体表皮生长因子
- MRI动态增强技术对垂体微腺瘤的诊断价值
- 2024年
- 目的探究磁共振动态增强技术(DCE-MRI)在垂体微腺瘤(PMA)诊断中的价值。方法纳入巴中市中心医院及重庆医科大学附属第二医院120例疑似PMA患者,所有患者入院后行DCE-MRI检查,以临床病理检查为金标准,分析DCE-MRI对PMA的诊断价值,对比微腺瘤组织与邻近组织的DCE-MRI信号强度曲线类型、DCE-MRI参数及不同质地垂体瘤组织的DCE-MRI参数。结果经病理诊断,120例患者中PMA患者阳性83例,阴性37例。DCE-MRI诊断81例阳性,39例阴性,其中漏诊5例,误诊3例,诊断敏感度93.98%,特异度91.89%,准确率93.33%,阳性预测值96.30%,阴性预测值87.18%,Kappa值0.846,与病理诊断具有较高的一致性。PMA组织DCE-MRI信号强度以Ⅱ型、Ⅲ型为主,邻近正常组织以Ⅰ型、Ⅱ型为主,差异有统计学意义(P<0.05)。PMA组织Kep、Ktrans、Ve、MSI值显著低于邻近正常组织,TTP值显著高于邻近正常组织(P<0.05)。83例PMA中23例质硬,60例质软,质硬组Kep、TTP值显著高于质软组(P<0.05),Ktrans、Ve、MSI值显著低于质软组(P<0.05)。结论DCE-MRI扫描可有效提高PMA检出率,通过扫描获得的TIC类型、DCE-MRI参数可用于鉴别肿瘤病灶大小、范围、质地等,为临床手术提供重要参考。
- 余敏黄宁周金林余燕
- 关键词：垂体微腺瘤垂体瘤病理检查
- PBL教学模式在神经外科临床基地规范化培训带教中的应用效果
- 2021年
- 探讨以问题为基础教学法(PBL)在神经外科临床基地规范化培训带教中的应用价值。方法:以我院2019年1月到2020年12月神经外科临床医师规范化培训中选取24名学员为研究对象.采用随机数字表法分为常规带教组和PBL带教组,每组12人,对比两组的出科考试成绩及出科时满意度。结果:PBL带教组出科考试成绩评分显著高于常规带教组,差异具有统计学意义(P<0.05)。PBL带教组出科时满意度评分显著高于常规带教组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在神经外科住院医师基地规范化培训出科考试成绩中应用PBL教学模式能够有效培养实习医师的学习兴趣,提高实习医师自学能力,加强对临床问题的分析解决能力,不断提升实习医师的学习效率与学习质量,提高教学满意度,值得在神经外科住院医师基地规范化培训中推广使用。
- 张翔王延刚黄宁
- 关键词：PBL教学模式
- CD133阴性胶质瘤干细胞的研究现状被引量：2
- 2012年
- 肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）假说认为：肿瘤中存在一组特殊的细胞亚群,虽然它们所占比例极小,但却是肿瘤无限增殖、高侵袭及多药耐药的源泉。CSCs的分离和生物学特征的验证对肿瘤产生、发展及转归的观念产生了重大影响。目前已在白血病、乳腺癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、结肠癌、
- 黄宁陈松程远
- 关键词：胶质瘤肿瘤干细胞CD133胶质瘤干细胞
