黄光瑞
- 作品数:3 被引量:13H指数:2
- 供职机构:湖北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:武汉市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 通过基因剂量效应提高植物酸酶基因在毕赤酵母中表达
- 农作物中磷的主要贮存形式是植酸,单胃动物不能产生水解植酸的植酸酶。因此在单胃动物的饲料中添加植酸酶可以将植酸磷降解为可利用磷,既可减少磷的添加量,又可以消除植酸的抗营养作用,提高蛋白质、微量元素的利用率,有重要的应用价
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- 文献传递
- 密码子优化的植酸酶基因appA-P在毕赤酵母中的高效表达被引量:10
- 2007年
- 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子使用偏爱性,对Escherichia coli来源的高比活植酸酶基因(appA)全面地进行密码子优化,人工合成了植酸酶基因(appA-P),并将该基因克隆到毕赤酵母诱导型分泌表达载体pHBM905A上,获得重组质粒pHBM905A-appA-P,通过PEG1000转化法将线性化的重组质粒转化毕赤酵母GS115菌株,筛选得到一个高效表达植酸酶的重组菌株GS115-appA-P,在25℃摇瓶培养168 h后酶活力达到422 U/mL,该植酸酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为4.5,在20-50℃、pH1.0-6.0范围内较稳定.
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- 关键词:毕赤酵母密码子优化
- 一种快捷可靠的大肠杆菌重组质粒筛选方法被引量:3
- 2008年
- 针对如何大规模地筛选大肠杆菌重组子,将质粒快检和菌落PCR两种方法巧妙地融合,建立一种新的高效快捷的重组质粒筛选方法.该方法不需接种抽取质粒,在转化子长出当天即可筛选到重组质粒.大规模基因克隆表明该方法能够快速、准确地筛选出阳性克隆.
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- 关键词:重组质粒菌落PCR