陈磊
- 作品数：12 被引量：13H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人ski基因真核表达载体的构建及促细胞增殖作用被引量：2
- 2011年
- 背景:c-Ski既可促进组织修复,又能降低瘢痕形成,有望成为一个全新的基因治疗药物。目的:构建人ski基因的真核表达载体,并对其促成纤维细胞增殖效果进行验证。方法:RT-PCR法从人包皮培养原代成纤维细胞总RNA中扩增出人ski基因,连同真核表达启动子CMV克隆到pUC118载体上,酶切和测序验证后,应用脂质体将其转染到培养的大鼠皮肤成纤维细胞中。结果与结论:酶切和测序结果证实表达质粒构建成功,Westernblot显示Ski蛋白在转染细胞中成功表达,且可显著提高转染细胞的增殖效应,说明以pUC118为骨架的重组ski表达质粒具有促进大鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用。
- 彭艳李平刘苹陈磊赵晓光周元国
- 关键词：SKI成纤维细胞增殖
- 大鼠c-ski基因siRNA真核表达载体的构建及其在成纤维细胞中的干扰效果观察
- 2010年
- 目的构建大鼠c-ski基因的特异性siRNA沉默质粒,并评价其在大鼠皮肤原代成纤维中的干扰效果。方法采用pSUPER质粒构建大鼠c-ski基因siRNA的重组真核表达质粒,转染大鼠皮肤成纤维细胞,采用荧光纤维镜观察转染效率,BrdUELISA法检测转染后细胞增殖情况并作为其干扰效果的初步筛选,定量PCR、免疫组化法检测c-ski基因和蛋白的表达变化。结果构建3个c-SkisiRNA沉默质粒,按照质粒(μg)/脂质体(μl)1∶2.5的比例转染时效率最高,约为53.5%。转染c-SkisiRNA沉默质粒后,细胞增殖降低,且抑制效果与转染剂量成正比。定量PCR、免疫组化法结果显示转染后c-ski基因表达下调51%(P<0.01),蛋白表达明显降低。结论c-Ski沉默质粒构建成功,瞬时转染大鼠皮肤原代成纤维细胞后可以显著抑制c-ski基因和蛋白的表达。
- 李平刘苹陈星云赵艳彭艳陈磊周元国
- 关键词：RNA干扰转染
- 腺苷A_2A受体在冲击伤所致学习记忆障碍中的作用及机制
- 2010年
- 宁亚蕾杨楠李平熊仁平陈磊周元国
- 关键词：冲击伤学习记忆障碍神经病理学脑损伤程度小鼠学习记忆
- 激活TRPV1对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨瞬时受体电位香草醛亚家族1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)对培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法用组织贴块法分别培养SHR和WKY大鼠的主动脉VSMCs,采用细胞免疫荧光进行鉴定。分别用辣椒素和iRTX激活和拮抗TRPV1受体,CCK-8法检测VSMCs增殖;Western blot法检测TRPV1、磷酸化-Akt(p-Akt)和总Akt(t-Akt)的蛋白表达。结果 1 SHR-VSMCs中TRPV1蛋白相对表达量低于WKY-VSMCs(0.32±0.05 vs 0.55±0.11,P<0.05);TRPV1激动剂辣椒素可显著上调SHR-VSMCs(0.65±0.19)和WKYVSMCs(0.89±0.13)中TRPV1的表达(P<0.05)。2 SHR-VSMCs的增殖能力高于WKY-VSMCs(1.30±0.07 vs 0.88±0.23,P<0.05);辣椒素呈剂量依赖性地抑制SHR-VSMCs的增殖(对照组:1.30±0.07,1μmol/L辣椒素组:0.93±0.10,10μmol/L辣椒素组:0.83±0.16,P<0.05);应用iRTX拮抗TRPV1即拮抗辣椒素的抗增殖作用(1μmol/L辣椒素组:0.93±0.10,1μmol/L辣椒素+1μmol/L iRTX组:1.23±0.14,P<0.05)。3SHR-VSMCs中Akt磷酸化水平高于WKY-VSMCs(0.44±0.02 vs0.29±0.09,P<0.05);辣椒素激活TRPV1抑制VSMCs中Akt的磷酸化(WKY-VSMCs:0.13±0.02,SHR-VSMCs:0.23±0.03,P<0.05);TRPV1拮抗剂iRTX可拮抗辣椒素作用,使WKY-VSMCs(0.37±0.07)、SHR-VSMCs(0.43±0.10)中Akt磷酸化水平升高(P<0.05)。结论激活TRPV1可能通过抑制Akt的磷酸化而抑制SHR-VSMCs增殖。
- 刘赟李敬诚尹延伟黎炳护郭露廖少琼曹小洁张明杰周毅陈磊龙春燕张莉莉
- 关键词：自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞
- 腺苷A2A受体在冲击伤所致学习记忆障碍中的作用及机制
- 目的:利用腺苷AA受体敲除小鼠,以中度颅脑冲击伤为模型,通过观察AA受体缺失对bTBI后小鼠学习记忆功能及相关神经病理学改变的影响,探讨AA受体在颅脑创伤所致认知障碍中的作用及可能机制。方法:成年雄性野生型小鼠(WT)及...
- 宁亚蕾杨楠李平熊仁平陈磊周元国
- 文献传递
- SIRT1在血管平滑肌源性泡沫细胞迁移中的作用和机制研究
- 泡沫细胞形成脂纹及斑块沉积于血管壁是动脉粥样硬化早期的关键病理环节。以往的研究证实血管平滑肌细胞(VSMC)在人冠状动脉粥样硬化中比巨噬细胞承担更多的脂质负荷,提示VSMC是泡沫细胞的主要来源。值得注意的是VSMC源性泡...
- 张明杰周毅陈磊王旭皮燕龙春燕孙梦姣陈雪高长越李敬诚张莉莉
- 关键词：VSMC泡沫细胞迁移SIRT1TRPV1
- 急性脑挫伤患者脑脊液神经元特异性烯醇化酶的变化及意义被引量：1
- 2000年
- 目的 :探讨急性脑挫伤患者脑脊液中神经元特异性烯醇化酶 (Neuron -specificenolase,NSE)的变化。方法 :用放射免疫双抗体夹心法对 2 4例广泛脑组织挫伤组 ,30例局部脑挫伤及正常对照组脑脊液NSE含量进行测定。并测定各组冬氨酸转氨酶 (Aspartatetranscarbamoylsse ,AST)水平。结果 :弥漫性脑挫伤患者脑脊液NSE浓度为 (2 5 .43± 5 .6 1)ng/ml,局灶性脑挫伤组为 (14.6 1± 7.5 2 )ng/ml,对照组为 (7.81± 3.2 1)ng/ml,脑挫伤组明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且弥漫性脑挫伤组与局灶性脑挫伤组差异显著 (P <0 .0 5 )。脑挫伤组中AST明显高于对照组 ,但AST在广泛脑挫伤组与局部脑挫伤组中无明显差异。结论 :急性脑挫伤患者的NSE、AST水平升高 ,且NSE与脑挫伤体积相关 。
- 邓少丽陈伟陈磊
- 关键词：脑挫伤神经元特异性烯醇化酶脑脊液
- 6-姜烯酚通过下调TLR4/NF-κB通路抑制血管平滑肌细胞增殖被引量：6
- 2016年
- 目的探讨6-姜烯酚对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响及其可能的分子机制。方法组织贴块法培养野生型(wild type,WT)和Toll样受体4敲除(Toll-like receptor 4 knockout,TLR4^(-/-))小鼠原代VSMCs。应用血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)诱导VSMCs增殖。分别应用TLR4配体脂多糖(LPS)和TLR4抑制剂(Eritoran,E5564)激活和抑制TLR4,观察TLR4在VSMCs增殖中的作用。加入6-姜烯酚刺激,观察对VSMCs增殖以及对TLR4表达的影响。结果 6-姜烯酚呈浓度依赖性地抑制PDGF诱导的VSMCs增殖(P<0.05);PDGF和LPS均可激活TLR4并促进野生VSMCs的增殖(P<0.05),TLR4基因敲除抑制PDGF和LPS诱导的VSMCs增殖(P<0.05);6-姜烯酚下调VSMCs中TLR4表达(P<0.05)。6-姜烯酚下调VSMCs中TLR4下游蛋白NF-κB的表达(P<0.05)。结论 6-姜烯酚通过下调TLR4/NF-κB通路抑制血管平滑肌细胞增殖。
- 陈磊胡子成周毅张明杰王旭皮燕龙春燕孙梦娇陈雪李敬诚张莉莉
- 关键词：血管平滑肌细胞细胞增殖
- 白介素18基因启动子607C/A和137G/C多态性与中国人群缺血性卒中风险的meta分析
- 目的：探讨白介素(Interleukin) 18 (IL-18)基因启动子区域607C/A和137G/C多态性与中国人群缺血性卒中发生风险的相关性.方法：检索PubMed、Embase、Web of Science、中国...
- 张明杰周毅陈磊龙春燕王旭皮燕高长越李敬诚张莉莉
- 关键词：IL-18META分析
- c-Ski在TGF-β1双向调节小鼠皮肤原代成纤维细胞增殖中的作用
- 目的:探讨c-Ski在TGF-β1双向调节小鼠原代成纤维细胞增殖中的作用。方法:培养原代Balb/c小鼠皮肤原代成纤维细胞,采用MTT法检测不同剂量TGF-β1(2.5pg/ml,25pg/ml,250pg/ml,2.5...
- 彭艳李平陈磊刘苹周元国
- 关键词：TGF-Β1SMAD3成纤维细胞
- 文献传递
