陈磊
- 作品数：13 被引量：52H指数：3
- 供职机构：湖北省医药工业研究院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 抗软腐病基因在花魔芋块茎组织中特异表达的研究被引量：2
- 2014年
- 本研究利用PCR技术从马铃薯块茎基因组DNA中克隆块茎特异性启动子patatin,并从苏云金芽孢杆菌218中克隆aii A(高丝氨酸环内酯酶)基因,构建含aii A基因的抗软腐病植物表达载体p BI121-patatinaii A。并利用农杆菌介导法将aii A基因导入花魔芋,以研究aii A基因在魔芋块茎组织中的特异表达。结果表明,转化植株经GUS染色,仅在球茎部位出现蓝色斑点,经PCR检测,RT-PCR及Southern杂交检测证实aii A基因已整合到花魔芋基因组,初步表明aii A基因可在魔芋球茎内特异性表达。本研究对今后魔芋通过分子遗传工程改良软腐病抗性具有一定的应用价值。
- 陈磊廖甜甜郭政宏程海丽乐超银
- 关键词：AIIA基因组织特异性表达花魔芋
- 农杆菌介导的花魔芋遗传转化体系的优化被引量：2
- 2015年
- [目的]探讨魔芋愈伤组织培养基、不同转化条件(菌液浓度、侵染时间、预培养时间及共培养时间)及转化植株的筛选条件(抗生素浓度和乙酰丁香酮(AS)浓度)等因素对转化效率的影响。[方法]采用卡那霉素抗性基因为选择标记,对农杆菌介导的花魔芋遗传转化体系进行优化。[结果]在预培养2 d,用OD600为0.6的菌液侵染30 min、共培养3 d,卡那霉素100 mg/L,羧苄青霉素250 mg/L,AS浓度100μmol/L的条件下能有效提高转化效率。再生花魔芋植株经GUS染色及PCR检测,结果表明外源目的基因已经整合到花魔芋基因组中。[结论]为魔芋抗病品种的转基因培育,丰富其种质资源,寻找抗病新途径提供理论依据和试验基础。
- 陈磊郭政宏程海丽乐超银
- 关键词：花魔芋农杆菌遗传转化体系
- 秭归空心李短枝单芽嫁接技术研究被引量：1
- 2008年
- [目的]推广秭归空心李的短枝单芽嫁接技术。[方法]通过芽接、枝接、短枝单芽嫁接技术在苗木嫁接和高接换种嫁接中的对比,研究秭归空心李的短枝单芽嫁接技术。[结果]苗木嫁接采用短枝单芽嫁接技术,芽利用率达87%,每人每天可嫁接960枝,成活率达95%,比芽接高17%,比枝嫁高28%。高接换种嫁接采用短枝单芽嫁接技术,芽利用率达95%,每人每天可嫁接480枝,成活率达95%,比芽接高41%,比枝嫁高48%。[结论]短枝单芽嫁接技术成活率高,嫁接质量好,节省繁殖材料,工效高,可以广泛应用于植物嫁接领域。
- 邓中美何正权陈发菊梁宏伟王玉兵姚伟陈磊汪元明
- 关键词：秭归空心李
- 魔芋内生拮抗菌的定殖研究被引量：2
- 2014年
- 采用抗魔芋(Amorphophallus rivieri Durieu)软腐病的内生芽孢杆菌BS-8发酵液灌根魔芋植株,定期测定该内生拮抗菌在魔芋叶片中的定殖情况。根据该内生菌16S rRNA特异性保守区域设计引物,定期4次采样,提取魔芋叶片DNA,通过SYBR Green I实时荧光定量PCR法检测该内生拮抗菌在魔芋叶片中的定殖情况。结果表明,经内生拮抗菌灌根培养的魔芋叶片中芽孢杆菌数量均明显大于对照,该内生芽孢杆菌能大量定殖在魔芋叶片中。
- 程海丽陈磊乐超银
- 关键词：SYBR
- 马里兰烟SSR分子标记分析被引量：1
- 2014年
- 采用SSR分子标记分析了五峰7个主栽烟草（Nicotiana tabacum L.）品种.结果表明,6对引物共检测到22个多态位点,7个品种的遗传相似系数为0.347 8～0.9130.
- 陈云陈磊乐超银
- 关键词：SSR分子标记马里兰烟
- 一种高效培养米斛种苗的方法及所用培养基
- 本发明涉及一种高效培养米斛种苗的方法，以N6为基本培养基，在不同的生长阶段激素的种类、有机添加物的种类和混合使用的比例。本方法包括米斛无菌播种、原球茎分化、壮苗生根培养、试管苗移栽各步骤。本发明采用的培养基独特、材料易得...
- 郭晓敏张悦孔菲菲陈磊肖志梅
- 文献传递
- 魔芋内生拮抗菌的筛选及鉴定被引量：5
- 2014年
- 为了从魔芋组织中筛选得到有效抑制魔芋软腐病菌的内生拮抗菌，采用组织块法从魔芋块茎中分离到15株内生细菌，通过菌株发酵上清液抑菌试验筛选拮抗菌株，发现其中5株对魔芋软腐病具有拮抗作用，占所筛内生菌的33％，BS-4、5、8的抑菌圈较大，直径在14～16mm。魔芋块茎感病试验发现，抑菌活性较高的BS-8菌株发酵上清液能在-定程度上抑制魔芋块茎感病，经生理生化和16SrRNA基因序列分析鉴定，证实BS-8菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）。BS-8菌株对魔芋软腐病菌具有很好的拮抗性，可作为-种新的植物生防制剂或工程菌进行更深一步的研究。
- 程海丽潘虹陈磊乐超银
- 关键词：魔芋枯草芽孢杆菌
- 适于SDSPAGE分析的高粱叶片蛋白质提取方法被引量：1
- 2013年
- 为了探索适于高粱叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,对TCA/丙酮沉淀后的蛋白质分别用裂解液Ⅰ(尿素+硫脲+CHAPS+DTT)和裂解液Ⅱ(尿素+DTT)2种裂解液进行裂解,用改良的Bradford法进行定量分析,并进行SDS-PAGE分离检测。结果表明,裂解液Ⅰ所得蛋白质质量浓度(2.538g/L)高于裂解液Ⅱ所得蛋白质质量浓度(1.905g/L),且两者呈极显著差异(P<0.05),但裂解液Ⅰ所得蛋白质电泳条带出现1条杂带;而裂解液Ⅱ所得蛋白质能满足上样要求且电泳条带清晰无杂带。因此,TCA/丙酮沉淀并用裂解液Ⅱ进行裂解的方法适用于高粱叶片的SDS-PAGE分析。
- 许克静陈云雷珍珍程海丽陈磊乐超银
- 关键词：高粱SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质提取
- 秭归空心李RAPD反应体系的建立及其遗传多样性分析被引量：1
- 2009年
- 采用RAPD分子标记技术对湖北省秭归县杨林桥镇秭归空心李4个居群的21个样品进行了多态性分析，从100个随机引物中筛选出6个引物对秭归空心李进行了扩增并对扩增结果进行了聚类分析。结果表明：当遗传距离取0．2662～0．3462cM时，所有的群体聚为一类；当遗传距离取0．0595—0．0639cM时，4个居群各为一类；4个居群的相似性系数为0．7073～0．9423，说明杨林桥镇4个居群的秭归空心李遗传背景比较一致，亲缘关系很近。
- 徐飞何正权陈磊梁宏伟王玉兵陈发菊姚伟邓中美
- 关键词：秭归空心李RAPD
- 植物生物反应器表达药用蛋白研究新进展被引量：30
- 2008年
- 植物生物反应器被称为"分子农田",它具有无限生产重组蛋白的巨大潜力。利用转基因植物表达的重组蛋白具备原有的理化性质和生物活性,从而为人类提供了一种大量生产药用蛋白的安全可靠、经济、方便的新生产体系。目前已广泛运用于工业、农业尤其是生命科学以及医学制造领域。用植物生物反应器产重组疫苗、重组抗体和其他药用蛋白已成为国内外基因工程研究热点之一。然而,转基因植物产物的表达量、下游加工等问题却也成为利用植物生物反应器应用的限制因素,就其优势、近三年内国内外转基因植物生产药用蛋白的研究进展、存在问题及对策作一综述。
- 杜小春何正权陈磊杨晔姚伟
- 关键词：植物生物反应器药用蛋白
