陈皓
- 作品数：13 被引量：9H指数：2
- 供职机构：陕西师范大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学建筑科学更多>>
- 单载体双向启动的Tet-on诱导表达系统及其构建方法和应用
- 一种单载体双向启动的Tet-on诱导表达系统，元件的连接顺序为5-’CMV-TetR-KRAB-SV40polyA-rtTA2S-M2-EB-PminCMV-KB-TRE-Tight-PminCMV-EcoR Ⅰ-Spe...
- 夏海滨陈皓
- 文献传递
- 携带eGFP及人endostatin-K5的嵌合腺病毒载体Ad5/11的构建及其体外实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的:构建携带报告基因eGFP及人内皮他丁en-dostatin-K5的嵌合型腺病毒载体Ad5/11。方法:采用重叠PCR及在细菌E.coli.BJ5183中同源重组的方法,获得表达eGFP报告基因的嵌合腺病毒骨架载体,然后以经PacI线性化的嵌合腺病毒载体骨架与PacI线性化的表达endostatin-K5的腺病毒E1穿梭载体共转染真核细胞HEK293细胞中获得携带报告基因eGFP及人endostatin-K5的嵌合型腺病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP。以获得的嵌合型腺病毒载体感染U87MG细胞,在荧光显微镜观察eGFP的表达,采用RT-PCR检测endostatin-K5的表达;将所构建的嵌合病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP与未经修饰的腺病毒载体Ad5-E1-CMV-eGFP在体外感染人胶质瘤细胞系A172及乳腺癌细胞系MDA-MB-231;通过荧光蛋白eG-FP的表达,比较它们对以上肿瘤细胞的感染效率。结果:嵌合病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP可成功地表达eGFP及endostatin-K5。以经过修饰的嵌合型腺病毒载体Ad5/11-E1-CMV-endo-K5/E3-CMV-eGFP感染人脑胶质瘤细胞系A172及人乳腺癌细胞MDA-MB-231的感染效率,明显高于对照未经修饰的腺病毒载体Ad5-E1-CMV-eGFP。结论:携带eGFP及人endostatin-K5的嵌合型腺病毒载体Ad5/11,可明显提高对人脑胶质瘤细胞系A172及人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的感染效率。
- 王东阳刘世海李星赵俊丽陈皓冯飞雪王丽娴夏海滨
- 关键词：腺病毒载体
- ZFNs在基因治疗中的应用研究
- 锌指核酸酶(Zinc finger nuclease,ZFNs)是一种人工合成酶,含有锌指蛋白DNA结合域和非特异性核酸酶FokI结构域.ZFNs在基因组靶向修饰方面发挥重要的作用.快速组装及筛选有效的锌指核酸酶对于基因...
- 张伟峰陈皓夏海滨
- 关键词：锌指核酸酶腺病毒载体基因治疗
- 基于腺病毒的严密型Tet-on诱导调控表达载体的构建及其体外应用研究
- 陈皓
- 关键词：TET-ON基因治疗肿瘤腺病毒
- An adenoviral vector carrying soluble TRAIL regulated by a novel tight Tet-on inducible expression system
- Adenovirus was a popular vector for gene therapy,and adenovirus based tumor gene ther-apy was a important meth...
- 陈皓赵静王顺娟王菲夏海滨
- 文献传递
- 一种表达受茶碱调控的适体核酶修饰型sgRNA的载体及应用
- 本发明公开了一种表达受茶碱调控的适体核酶修饰型sgRNA的载体，在表达的sgRNA‑AZ 2.0骨架的四碱基环(tetraloop)以及茎环2(stem loop 2)位置插入适体核酶P1‑F5；通过Kpn Ⅰ与EcoR...
- 夏海滨陈皓郑晓晶代鑫李燕陈芳
- 四环素诱导调控表达系统的研究与应用被引量：7
- 2011年
- 四环素(Tet)诱导调控表达系统是在大肠杆菌Tn10转座子中特异的Tet抗性操纵子基础上建立起来的一种用于诱导基因表达的调控系统。经过近几年来的发展,衍生出了Tet-on、Tet-off两套调控系统;随着对Tet诱导调控表达系统的改进,其对基因表达调控的严谨性、诱导效率及安全性等方面逐步得到改善,并被广泛应用于基础研究及体内外的实验治疗研究。此外Tet诱导调控系统与其他诱导调控体系及新兴技术的联合应用,为疾病的基因治疗研究提供有力的手段。
- 陈皓夏海滨
- 关键词：四环素基因治疗
- 病毒复制受转录抑制型Tet-on系统调控的条件复制腺病毒载体及应用
- 本发明公开了一种病毒复制受TetR‑KRAB介导的转录抑制型Tet‑on系统调控的条件复制型腺病毒载体，腺病毒E1区包含元件及连接顺序为5’‑CMV启动子、TetR‑KRAB基因、含四环素反应元件的启动子TRE3G‑E1...
- 夏海滨陈皓
- 文献传递
- 病毒复制受转录抑制型Tet‑on系统调控的条件复制腺病毒载体及应用
- 本发明公开了一种病毒复制受TetR‑KRAB介导的转录抑制型Tet‑on系统调控的条件复制型腺病毒载体，腺病毒E1区包含元件及连接顺序为5’‑CMV启动子、TetR‑KRAB基因、含四环素反应元件的启动子TRE3G‑E1...
- 夏海滨陈皓
- PEP-3与HBc融合原核表达载体的构建与表达
- 2015年
- 以可诱导较强免疫反应及呈现高拷贝抗原小肽的乙肝病毒核心蛋白(Hepatitis B Virus Core Protein,HBc)类病毒颗粒(Virus-like Particles,VLPs)作为免疫载体蛋白,通过分子生物学手段,将蓝白班筛选元件Lac Zα插入HBc的主要免疫显性区域,构建获得外源小肽与HBc融合的通用原核表达载体。在此通用载体的基础上,通过PEP-3小肽替换Lac Zα片段,构建了PEP-3与HBc融合原核表达载体,并成功进行了HBc/PEP-3融合蛋白的表达及纯化。该新型通用载体的成功构建,将为小肽疫苗的研究及应用提供有效工具。
- 杨星陈皓叶明付代鑫夏海滨
- 关键词：原核表达载体肽疫苗
