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阮楠

作品数:6 被引量:13H指数:2
供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 3篇农业科学
  • 2篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇基因
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇蛋白酶抑制剂
  • 1篇胸膜肺炎
  • 1篇胸膜肺炎放线...
  • 1篇序列对
  • 1篇制剂
  • 1篇人乳
  • 1篇人乳腺癌
  • 1篇人乳腺癌细胞
  • 1篇人乳腺癌细胞...
  • 1篇乳腺
  • 1篇乳腺癌
  • 1篇乳腺癌细胞
  • 1篇生长激素
  • 1篇启动子
  • 1篇猪胸膜肺炎放...
  • 1篇细胞
  • 1篇腺癌

机构

  • 5篇吉林大学
  • 2篇黑龙江八一农...
  • 2篇中国农业科学...
  • 1篇讷河市畜牧水...

作者

  • 5篇阮楠
  • 2篇白立景
  • 2篇鞠辉明
  • 2篇赵为民
  • 2篇马艳娇
  • 2篇张明军
  • 2篇李鹏
  • 1篇张西臣
  • 1篇欧阳红生
  • 1篇吴秀芬
  • 1篇宫鹏涛
  • 1篇杨焕民
  • 1篇周海峰
  • 1篇李建华

传媒

  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇黑龙江畜牧兽...
  • 1篇安徽农业科学
  • 1篇Agricu...

年份

  • 3篇2012
  • 2篇2010
6 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
Kozak序列对TIMP1基因在人乳腺癌细胞MCF-7中表达的影响被引量:2
2010年
目的探讨Kozak序列对基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)基因在人乳腺癌细胞MCF-7中表达的影响。方法构建pcDNA3.1-TIMP1和pcDNA3.1-TIMP1-K(含有Kozak序列)重组真核表达质粒,用FugeneHD转染试剂将重组表达质粒转染MCF-7细胞,采用荧光定量PCR和Western blot检测pcDNA3.1-TIMP1和pcDNA3.1-TIMP1-K在MCF-7细胞中表达的差异。结果重组真核表达质粒经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确。质粒pcDNA3.1-TIMP1-K转染细胞比空白对照细胞TIMP1基因mRNA表达量高约0.95倍,蛋白表达量高0.43倍;而质粒pcDNA3.1-TIMP1转染细胞比空白对照细胞mRNA表达量高0.37倍,蛋白表达量高0.25倍。结论质粒pcDNA3.1-TIMP1-K与pcDNA3.1-TIMP1在MCF-7细胞中mRNA和蛋白表达水平均存在差异,Kozak序列提高了TIMP1基因的表达。
马艳娇李鹏周海峰阮楠宫鹏涛李建华欧阳红生张西臣
关键词:KOZAK序列基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶抑制剂1MCF-7细胞
猪生长激素启动子的克隆及功能分析被引量:1
2012年
[目的]克隆猪生长激素启动子,确定其启动子核心序列和主要的顺式作用元件。[方法]根据NCBI上公布的序列设计引物,PCR扩增了猪生长激素5’端-1 821~+61 bp的序列,并通过移步缺失的方法,获得9段长短不一的启动子序列,将其分别构建到双荧光素酶表达载体pGL3-basic上。通过重组质粒瞬时转染大鼠垂体瘤细胞(GH3)、猪髋动脉血管内皮细胞(PIEC)和猪肾细胞(PK15)和转染后细胞荧光素酶活性的测定,检测这些5’末端缺失质粒在垂体及非垂体细胞中的相对转录活性。[结果]成功扩增了猪GH基因5’上游启动区1 882 bp的片段,并构建了9个pGL3-mGH promoter报告基因载体;双荧光素酶报告基因检测系统证实插入报告基因载体中的启动子具有非常强的细胞特异性。[结论]猪生长激素特异性在垂体细胞中表达,其最小启动子位于-110 bp以内,启动子区-218~-110 bp和-429~-218 bp间存在正向调控元件。
阮楠张明军鞠辉明白立景赵为民
关键词:基因表达
猪和小鼠生长激素核心启动子的鉴定及调控差异的研究
生长激素(Growth hormone,GH)是生长轴中调控生长发育的核心因子,对动物的组织细胞生长与物质代谢具有极其广泛的调节作用,能明显促进软骨、骨及其他组织的生长,刺激胶原与蛋白质的合成,促进组织细胞对循环氨基酸的...
阮楠
关键词:生长激素启动子小鼠
文献传递
Cloning and Functional Analysis of the Porcine Growth Hormone Gene Promoter被引量:1
2012年
[Objective] This study aimed to clone the porcine growth hormone gene promoter and determine the core promoter sequences and the cis-acting elements. [Method] Sequence of the 5'flanking region of porcine growth hormone gene was searched out and downloaded from the NCBI website. According to the targeted se- quence, primers were designed and synthesized for the PCR amplification. The 1 882 bp (-1 821 bp-+61 bp) fragment was amplified by PCR. Nine promoter frag- ments with different lengths were obtained by genome-walking deletion method and then cloned into luciferase reporter vectors. Relative transcriptional activities of these 5' terminal-deleted plasmids in pituitary and non-pituitary cells were determined by transient transfection of the rat pituitary adenoma cell (GH3), porcine lilac endotheli- um cell (PIEC) and porcrne Kidney-15 (PK15) with the constructed dual-luciferase vectors. [Result] Result of DNA sequencing showed that the 1 882 bp fragment of GH 5' promoter was successfully cloned. Nine luciferase reporter gene plasmids were constructed. DuaI-Luciferase reporter assay indicated that the promoter inserted into reporter gene vector had very strong cell specificity. [Conclusion] Porcine growth hormone gene specifically expresses in pituitary cells. The minimal promoter of the porcine growth hormone gene is mapped at the region -110 bp-+61 bp. Promoter regions 218 bp--110 bp and -429 bp--218 bp contain positive regulatory elements.
阮楠张明军鞠辉明白立景赵为民
关键词:REGULATION
猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA基因的克隆和表达
2010年
为了研究猪胸膜肺炎放线杆菌溶血素(Apx)ⅣA基因的原核表达,试验采用PCR方法扩增到目的片段,并将该片段连接到pMD18-T载体中,经PCR和限制性酶切鉴定后,在T4 DNA连接酶的作用下将目的片段与pET28a连接。结果表明:ApxⅣA基因测序结果与GenBank中公布的核苷酸序列的同源性达100%,说明已成功构建猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ-pET28a原核表达质粒;表达质粒经IPTG诱导成功表达了36 ku的ApxⅣA原核蛋白。
李鹏吴秀芬马艳娇阮楠杨焕民
关键词:猪胸膜肺炎放线杆菌聚合酶链反应
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