钟诚
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒感染HepG2细胞模型的构建被引量：3
- 2009年
- 目的:构建乙型肝炎病毒(HBV)感染的细胞模型。方法:将携带1.2拷贝HBV基因的重组腺病毒感染HEK293细胞进行包装、扩增并分离纯化。将扩增得到的HBV感染HepG2细胞,用ELISA法检测感染后第4天培养上清中的HBsAg,Real-time RT-PCR检测HBV mRNA。结果:ELISA检测结果显示,HepG2细胞感染HBV后上清液中HBsAg呈阳性。Real-time RT-PCR可以检测到HBV mRNA。结论:HBV能在HepG2细胞中表达复制和表达,HBV感染的HepG2细胞模型构建成功。
- 钟诚彭亮刘志华惠长野李珊凤曹虹
- 关键词：HEPG2细胞细胞模型
- shRNA表达载体构建及其对HBV体外抑制作用被引量：1
- 2010年
- 目的构建乙型肝炎病毒(HBV)基因X区和P区的shRNA表达载体,通过纳米聚合物将其转入HBV感染的细胞模型,并检测其对HBV复制的抑制作用。方法设计3条针对HBV基因编码区的干扰RNA序列,合成3对64nt的寡核苷酸,插入载体pRNAT-U6,构建重组干扰质粒Sl、S2和S3,利用纳米转染剂转入HBV感染的HepG2细胞。用实时荧光定量法检测HBVmRNA含量。结果干扰质粒S1、S2对HBv的复制有明显抑制作用,荧光定量检测转染后HBVmRNA表达水平发现,HBVmRNA含量分别减少至空白对照组的70.2%和61.2%,无关对照质粒则无抑制作用。结论成功构建针对HBv编码区的shRNA表达载体,并能在体外有效抑制HBVmRNA。
- 彭亮刘志华钟诚丁振华惠长野曹虹
- 关键词：RNA干扰乙型肝炎病毒
