金丽娜
- 作品数：6 被引量：18H指数：1
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- hsBLyS分泌型表达载体构建及CHO表达被引量：1
- 2004年
- 本实验引物延伸合成人红细胞生成素信号肽序列 ;信号肽序列和人可溶性B淋巴细胞刺激因子 (hu mansolubleBLymphocyteStimulator,hsBLyS)基因重叠延伸拼接成融合基因 ;融合基因插入pcDNA3、pcDNA3 1、pEFneo质粒 ;信号肽引物设计时 ,突变同义密码 ,最终重组质粒成为分泌表达质粒 ;磷酸钙共沉淀将表达质粒和标志质粒pSV dhfr,共转染CHO—dhfr- 细胞 ;选择培养液筛选 ,氨甲喋呤扩增表达 ,获稳定表达rhsBLyS细胞株 ;ELISA检测浓缩表达上清 ,结果表明 :rhsBLyS表达量由 0 13 μg/mL上升至 0 5 5 μg/mL .
- 吴海涛胡云龙刁振宇金丽娜李洁张双全
- 关键词：HSBLYSCHO信号肽分泌型表达载体免疫调节因子
- 重组人TRAIL胞外片段的原核表达系统选择及蛋白复性研究
- 2006年
- 采用PCR技术从人肝脏cDNA文库扩增出编码114～281位氨基酸的TRAIL基因片段,将之克隆至原核表达载体pET-30a、pQE-30和pJLA503中,上述重组载体经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE鉴定显示pET-30a系统表达效率最高,目的蛋白占菌体总蛋白含量的40%左右;采用透析法或梯度稀释法对TRAIL胞外区片段包涵体进行复性,非还原SDS-PAGE的结果显示梯度稀释法明显好于透析法;纯化后的TRAIL胞外区片段蛋白具有明显的生物学活性,效果与标准品相似;通过添加不同的折叠促进剂对复性效率影响的研究,确立了TRAIL胞外区片段适宜的复性方法,复性效率达75%～80%.
- 吴冬梅金丽娜刘顺谊司马健邰一琳吴一凡乔波殷志敏
- 关键词：TRAIL蛋白表达复性细胞凋亡
- 重组蛋白在中国仓鼠卵巢细胞中高效表达的影响因素被引量：17
- 2004年
- 高效表达重组蛋白 ,对于生物制药意义重大。大多数药用蛋白是糖蛋白 ,中国仓鼠卵巢细胞 (Chinesehamsterovarycell,CHO)是目前重组糖基蛋白生产的首选体系。影响外源蛋白在CHO细胞中表达的因素很多 ,从CHO细胞表达体系、表达载体系统、外源基因、表达细胞株的加压扩增与筛选、细胞大规模培养等方面对CHO高效表达加以阐述 。
- 吴海涛胡云龙陈松刁振宇金丽娜李洁张双全
- 关键词：重组蛋白基因工程药物中国仓鼠卵巢细胞
- 一种新免疫调节因子:B淋巴细胞刺激因子
- 2006年
- 吴海涛胡云龙刁振宇金丽娜李洁张双全
- 关键词：B淋巴细胞刺激因子免疫调节因子LYMPHOCYTESCHNEIDER嗜中性粒细胞C-JUN
- 热休克蛋白70结合TRAF6调节LPS激活的NF-κB信号通路的研究
- 热休克蛋白70(HeatShockProtein70,HSP70)是HSP70家族的成员，进化上高度保守，其结构主要由一个N端高度保守的ATPase功能域和一个C端区域组成，C端区域又可以分成一个保守的多肽结合功能域和一...
- 金丽娜
- 关键词：热休克蛋白信号通路肿瘤免疫
- 文献传递
- hsBLyS基因在中国仓鼠卵巢细胞中的表达及其在免疫小鼠中诱发的抗体反应
- 2006年
- 为建立稳定表达人可溶性B淋巴细胞刺激因子(hsBLyS)的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系,从人胎盘cDNA文库中扩增hsBLyS基因,将人红细胞生成素(EPO)信号肽序列和hsBLyS基因重叠延伸为融合基因;融合基因分别插入pcDNA3、pcDNA3.1、pEFneo质粒;磷酸钙共沉淀将表达质粒和标志质粒pSVdhfr,共转染CHOdhfr细胞;选择培养液筛选,经氨甲喋呤选择压力扩增表达,获稳定表达hsBLyS的细胞系,表达量由0.13μg/ml上升至0.55μg/ml;同时利用pEFneo/hsBLyS重组质粒免疫BALB/c小鼠,检测结果表明小鼠产生hsBLyS的特异性抗体。本实验建立了稳定表达hsBLyS的CHO细胞系,对其基因免疫小鼠抗体产生的特点做了初步探讨。
- 吴海涛吴玉蓉胡云龙刁振宇金丽娜李洁张双全
- 关键词：HSBLYS中国仓鼠卵巢细胞基因免疫抗体反应
