邱志东
- 作品数：27 被引量：104H指数：5
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- 胰腺癌细胞株Runx3基因启动子区CpG岛甲基化的检测被引量：1
- 2011年
- 目的探讨胰腺癌细胞株中Runx3基因启动子区CpG岛的甲基化水平。方法应用甲基化特异性PCR方法检测Panc-1、BxPC-3、AsPC-1三种胰腺癌细胞株及正常胰腺组织RunX3基因启动子区CpG岛甲基化水平。结果在Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞株中Runx3基因启动子区CpG岛的甲基化引物均发生扩增,非甲基化引物未发生扩增;在正常胰腺组织中Runx3基因启动子区CpG岛的甲基化引物未发生扩增,非甲基化引物发生扩增。结论 Panc-1、BxPC-3、AsPC-1中存在Runx3基因启动子区CpG岛的完全甲基化。
- 范琳峰雷长江刘忠考缪辉来邱志东陈明陈念平
- 关键词：胰腺癌RUNX3基因甲基化
- 肝细胞生长因子与酸性成纤维细胞生长因子体外诱导胚胎肝干细胞抗原阳性细胞向肝细胞定向分化的研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨肝细胞生长因子（HGF）与酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）体外诱导胚胎肝干细胞抗原阳性（Sca-1^＋）细胞向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁珠分离法分离Sca-1^＋细胞，相差显微镜观察细胞形态，（RT-PCR半定量逆转录聚合酶链反应）法检测细胞自蛋白（ALB）、转甲状腺蛋白mRNA水平表达；免疫组织化学法检测ALB、AFP和CKS／18蛋白水平的表达，以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能。结果分离后Sca-1^＋细胞活力为（94．24±1．04）％，纯度为（85．57±1．66）％，回收率为（62．31±1．85）％。Sca-1^＋细胞经HGF和aFGF诱导分化后，细胞形态变成不规则，明显向肝细胞变化，AFP蛋白表达消失、ALB和CK8／18蛋白表达升高，ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高，且细胞糖原染色和尿素合成功能增强，逐渐向成熟肝细胞转化。结论HGF与aFGF可在体外诱导胚胎肝Sca-1^＋细胞向肝细胞或肝细胞前体分化。
- 邱志东缪辉来张晟晃陈念平陈明郑淑华
- 关键词：干细胞肝细胞生长因子成纤维细胞生长因子
- 甘氨鹅脱氧胆酸盐对人正常肝细胞HL-7702的影响被引量：3
- 2010年
- 目的观察甘氨鹅脱氧胆酸盐(glycochenodeoxcholate,GCDC)对人正常肝细胞HL-7702凋亡诱导作用,探讨GCDC诱导HL-7702细胞凋亡的机制。方法终浓度分别为50、100、150、200、250μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞4、8、12、24h,光学显微镜镜下观察细胞形态学改变、用Am-Blue细胞活性检测和乳酸脱氢酶活性的测定及AnnexinV-FITC/PI双染色法检测GCDC对HL-7702细胞凋亡的影响,用荧光指示剂Fluo-3/AM测定HL-7702细胞内钙离子浓度。结果 (1)终浓度为150μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞24h后,细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变,包括核固缩、核碎裂和凋亡小体形成等。(2)Am-Blue吸光光度法、GENMED乳酸脱氢酶(LDH)总活性比色法及AnnexinV-FITC/PI双染色法定量检测结果均显示,GCDC均可诱导HL-7702细胞凋亡且呈剂量及时间依赖性。(3)GCDC能使HL-7702细胞内钙离子浓度增加且具有浓度和时间依赖性。结论 GCDC可能通过增加HL-7702细胞内钙离子浓度诱导人正常肝细胞HL-7702凋亡,其作用具有浓度和时间依赖性。
- 陈念平周军秦勇廖博懿邱志东
- 关键词：细胞凋亡钙离子
- 螺旋水刀在解剖性肝切除术中的应用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨螺旋水刀在解剖性肝切除术中的应用价值。方法对广东医学院附属医院2003年9月至2006年6月所实施的97例螺旋水刀解剖性肝切除病人的手术资料进行回顾性分析。结果97例手术中有89例不需阻断肝门，断肝时间为15～45min，断面处理时间为8～20min，出血量在150～1200ml之间（〈800ml 93例，〉800ml4例）；术中视野清晰，肝内管道系统暴露充分，未发生管道系统误损，术后B超监测未发现有重要血管损伤的表现；围手术期无死亡病例；术后肝功能恢复时间平均约为1周。结论螺旋水刀解剖性肝切除术的应用是安全、可行的，能减少肝门血流阻断，减少术中出血量，缩短术后肝功能恢复时间。
- 缪辉来陈念平陈明邱志东徐浩
- 关键词：肝切除术肝脏解剖螺旋水刀
- 胰腺癌细胞中Runx3基因表达及甲基化的研究
- 2012年
- 目的观察胰腺癌细胞中Runx3基因表达的情况,探讨其出现表达异常的机制。方法 (1)RT-PCR检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞及正常胰腺组织中Runx3mRNA表达情况(2)Western blotting检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中Runx3蛋白表达情况;(3)甲基化特异性PCR(MSP)检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、As-PC-1细胞及正常胰腺组织中Runx3基因启动子区CpG岛的甲基化水平。结果 (1)Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中未检测到Runx3基因mRNA表达,而正常胰腺组织可检测到Runx3基因mRNA表达;(2)Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中未检测到Runx3蛋白表达;(3)Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中Runx3基因启动子区CpG岛均发生甲基化,而正常胰腺组织中Runx3基因启动子区CpG岛未检测到甲基化。结论胰腺癌细胞中存在Runx3基因失表达,其机制可能与Runx3基因启动子区CpG岛发生甲基化有关。
- 邱志东范琳峰雷长江缪辉来
- 关键词：胰腺癌RUNX3基因甲基化
- GPC3过表达载体的构建和表达检测被引量：1
- 2012年
- 目的构建并检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,GPC3)真核表达重组质粒。方法提取肾组织RNA进行逆转录,扩增GPC3基因的编码区,将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,酶切鉴定并测序;将克隆成功的质粒转染至Huh7细胞,用荧光定量PCR和Western blot检测GPC3的表达水平。结果成功扩增GPC3编码区,并克隆至载体pcDNA3.1中;GPC3过表达载体转染至Huh7细胞后,荧光定量PCR和Western Blotting检测结果显示GPC3mRNA和蛋白表达水平均明显增加。结论成功构建GPC3过表达载体可用于后续研究。
- 邱志东雷长江刘忠考黎然缪辉来
- 关键词：GLYPICAN-3质粒肝细胞癌
- 轻型与重型聚丙烯网片对大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨轻型、重型聚丙烯疝网片对大鼠术后生殖细胞凋亡的影响。方法选取雄性成年SD大鼠32只,随机分成四组:空白对照组、手术对照组、轻型聚丙烯网片组(轻型组),重型聚丙烯网片组(重型组)。对后三组制作腹股沟疝模型,测定各组大鼠血液中MDA(丙二醛),睾丸组织中SOD(超氧化物歧化酶)、GSH(谷胱甘肽)含量,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 4周时测定各组血清中MDA含量、睾丸组织SOD含量、GSH含量,收取睾丸组织标本制作石蜡切片,测定细胞凋亡数量(AI)。各组血清中MDA含量、睾丸组织SOD含量、GSH含量、AI手术对照组与空白对照组差异无统计学意义(t=0.652、0.246、0.177、0.944,P均<0.05),轻型组、重型组与手术对照组比较差异均有统计学意义(F=52.605、98.058、85.493、413.287,P均<0.05)。MDA含量与细胞凋亡指数,重型组高于轻型组,差异有统计学意义(t=4.944、8.122,P均<0.05);SOD含量与GSH含量,重型组低于轻型组,差异有统计学意义(t=5.398、4.643,P均<0.05)。结论无张力疝修补术后可引起大鼠血清MDA增加,睾丸组织中SOD、GSH含量减少,无张力山修补可引起大鼠生殖细胞凋亡。
- 宓立强陈明邱志东赵振
- 关键词：聚丙烯类睾丸间质细胞
- 超声刀联合POMD行肝切除术31例被引量：2
- 2009年
- 目的探讨超声刀与POMD（彭氏多功能手术解剖器）联合应用在肝切除术中的应用价值。方法对31例超声刀与POMD联合应用（联合组）的肝切除术患者的手术资料进行回顾性分析，并与单纯应用超声刀和POMD组进行比较。结果联合组断肝时间为（31．5±5）min，与POMD组（35．5±5）min比较差异无统计学意义，但与超声刀组（48±4）min相比明显缩短。联合组出血量为（460±121）ml，比POMD组（810±298）ml减少，但与超声刀组（526±203）ml比较差异无统计学意义。结论超声刀与POMD联合应用进行肝切除术安全、快捷。
- 谭小宇陈念平邱志东
- 关键词：肝切除术超声刀
- 亚砷酸诱导人鼻咽癌细胞Ras相关结构域家族1A基因去甲基化表达的研究被引量：9
- 2009年
- 目的研究亚砷酸诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞株中抑癌基因Ras相关结构域家族1A基因（RAS association domain familygene 1A，RASSF1A）的表达。方法体外培养的CNE-2Z细胞分别加入不同浓度的亚砷酸，并作用不同时间。应用台盼蓝染色法筛选出亚砷酸抑制CNE-2Z细胞生长的最佳浓度，检测IC50值；流式细胞术检测细胞周期的改变；用终浓度为2μmol／L、1 μmol／L、0．5μmol／L的亚砷酸加入鼻咽癌CNE-2Z细胞系和不加药物的空白对照组，作用48h后，采用甲基化特异性PCR法检测亚砷酸处理前后RASSF1A基因去甲基化的情况，采用反转录PCR检测鼻咽癌CNE-2Z细胞系中RASSF1A基因亚砷酸处理前后mRNA水平的表达情况，采用Westernblot方法检测亚砷酸处理前后RASSF1A基因蛋白质水平的表达情况。结果亚砷酸对细胞增殖的抑制作用具有明显的时间和剂量效应。不同浓度的亚砷酸作用细胞24h、48h、72h后，其IC50值分别为（1．50±0．05）、（1．09±0．13）、（0．65±0．04）μmol／L，亚砷酸使细胞周期阻滞于S期和G2／M期；RASSF1A经亚砷酸作用后甲基化随着作用浓度的增高逐渐减弱，而去甲基化随着作用浓度的增高逐渐增强，且亚砷酸作用后RASSF1A在mRNA水平和蛋白质水平表达明显增强。空白对照组和不同浓度亚砷酸作用CNE-2Z细胞的处理组之间差异均有统计学意义（P值均〈0．05），不同浓度亚砷酸作用CNE-2Z细胞的处理组之间差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。结论亚砷酸可诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞株中RASSF1A表达增强，从而阻滞鼻咽癌细胞的增殖分化。
- 胡俊丽张月飞邱志东梁海慧
- 关键词：鼻咽肿瘤砷剂甲基化肿瘤抑制蛋白质类
- 腹腔镜胆囊切除术中应用超声刀和电刀对肝功能的影响被引量：10
- 2010年
- 目的探讨在腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)术中应用超声刀和高频电刀对机体肝功能的影响并进行对比研究。方法胆囊切除术78例,随机单盲分成LC超声刀组30例、LC高频电刀组30例、OC(open cholecystectomy)组18例。3组于术前、术后1d、术后3d检测患者血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、Y-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)水平并进行比较。结果与术前相比,LC组与OC组术后1dALT、AST、TBIL均明显升高(P<0.05),术后3d也较术前升高(P<0.05),但与术后1d比较已下降;DBIL、GGT、ALP术前与术后比较差异无统计学意义(P>0.05);术后3组间肝功能变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论LC和OC术后都可导致ALT、AST、TBIL升高,但均为暂时性。超声刀和高频电刀对肝功能的影响可以认为相同。
- 陈明周才进陈卓林邱志东缪辉来陈念平
- 关键词：腹腔镜胆囊切除术电刀超声刀CO2气腹肝功能
