边涛
- 作品数:12 被引量:26H指数:3
- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一株重组乙型肝炎病毒的全基因克隆和序列分析被引量:4
- 2008年
- 通过血清学和PCR方法对广西地区乙型肝炎病毒感染者样本进行检测,发现一株乙型肝炎病毒基因序列与其余病毒差异较大,利用PCR的方法,扩增出该株病毒的全长cDNA序列,并将其克隆到T载体,进行序列测定,结果显示基因全长为3 215bp,血清型为adr。将测定序列与网上公布的标准基因序列进行比对分析,发现该株病毒全基因组序列进化分析结果与C型基因比较接近,而对其全基因组进行分析时发现1 630bp^2 880bp间基因起源与和C型基因最为接近,而其余基因序列则与A型基因更接近,提示这是一株C型和A型重组的乙型肝炎病毒,首次在国内发现这种类型的基因重组病毒,丰富了我国乙型肝炎病毒研究内容,并对基因型别研究和病毒进化研究提供了参考。
- 边涛沈立萍王峰王岳张丽文张勇毕胜利
- 关键词:乙型肝炎病毒全基因组
- 鼠抗人PD-L1单克隆抗体的研制和生物学活性鉴定
- 2010年
- 目的 研制鼠抗人PD-L1功能性单克隆抗体,并对其生物学活性进行鉴定.方法 以前期原核表达的人硫氧还原蛋白-(PD-L1)融合蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,Western-Blot和酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性杂交瘤细胞,竞争抑制法ELISA实验鉴定抗体的特异性亲和力,小鼠腹水法作大量抗体制备.结果 获得4株能够稳定分泌特异性抗PD-L1抗体的杂交瘤细胞,经验证所分泌的抗体具有较强的特异性亲和力,经过大量抗体制备和纯化获得效价大于1∶32000的纯化抗体;同时获得1株能稳定分泌抗硫氧还原蛋白抗体的杂交瘤.结论 成功制备了鼠抗人PD-L1单克隆抗体,为下一步应用研究奠定了基础.
- 沈立萍陈斯勇郭瑜张爽边涛毕胜利
- 关键词:抗体亲和力
- 青海同德藏族人群感染HBV基因型、血清型调查被引量:4
- 2009年
- 目的了解青海同德藏族人群乙型肝炎病毒(HBV)基因型、血清型的分布状况。方法用巢式PCR扩增青海同德藏族人群表面抗原(HBsAg)阳性者的HBVs、C基因,测定其序列,判定其基因型和血清型。结果源于自然人群的311份血清标本中,同时获得S和c基因序列者271份,其中c型基因10例,占3.7%,C/D重组型261例,占96.3%;血清ayw2亚型259例,占95.6%,adr亚型10例,占3.7%,adw2亚型2例,占0.7%。结论青海同德藏族人群感染HBV以C/D重组型为主,血清型以ayw2为主。
- 张杰姜双应王学文王锋边涛牟振云张勇
- 关键词:基因型血清分型
- PD—L1重组蛋白的表达及生物学活性分析被引量:1
- 2009年
- 目的构建细胞程序死亡因子1配体1(PD—L1)的重组表达质粒,在原核系统中表达并分析其生物学活性。方法经密码子优化后合成PD—L1全基因序列,构建硫氧还原蛋白.pET43b/(PD.L1)重组表达质粒并在大肠埃希菌中表达;用ELISA验证表达产物与其受体结合的生物学活性。结果正确构建了PD—L1重组表达质粒及其大肠埃菌基因工程菌,能稳定、高效地表达目的蛋白,相对分子质量为47×10^3,目的蛋白能与其受体特异性结合。结论成功获得有生物学活性的PD-L1重组蛋白,为研制单克隆抗体及其与病毒感染慢性化的关系提供基础条件。
- 沈立萍陈斯勇边涛伊瑶王锋邱丰毕胜利
- 关键词:密码子细胞死亡重组蛋白质类硫氧还蛋白
- 河北正定县某镇人群乙型肝炎病毒“α”抗原决定簇突变初步分析被引量:6
- 2009年
- 目的了解河北正定县某镇自然人群感染乙型肝炎病毒(HBV)的“α”抗原决定簇突变情况,分析新生儿乙肝疫苗计划免疫对其的影响。方法为正定县某镇全体村民整群采集静脉血标本,用放射免疫法检测血清HBV-M,选取乙肝表面抗原(HBsAg)阳性者提取血清HBVDNA,扩增S基因,测序后与标准序列对比。结果11478份血清样品中,HBsAg检测阳性率4.78%。其中可用于HBVDNA提取的样品443份,扩增HBVS基因并成功测序434例。检测到该地区HBV“α”抗原决定簇氨基酸突变率6.7%,1986年前后出生人群HBV“α”抗原决定簇两个茎环的氨基酸突变率差异无统计学意义(P=1.0000,P=0.0877)。结论该镇存在HBV“α”抗原决定簇突变株,其在乙肝疫苗免疫出生后人群中感染率较低,尚不能说明该镇新生儿乙肝疫苗接种会引发突变株的流行。
- 闫虹霞马景臣边涛黄昌红张爽张志勇郝志勇陈吉朝张勇
- 关键词:抗原突变
- 我国乙型肝炎病毒基因型别地区分布和变异研究
- 乙型肝炎是我国乃至全球严重的公共卫生问题之一。世界卫生组织报告,全球有20亿人感染过乙型肝炎病毒(HBV),慢性(终生)HBV感染者超过3.5亿。在全球范围内HBV基因型别分布存在地区差异,基因型别与疾病预防控制,病情预...
- 边涛
- 关键词:乙型肝炎病毒基因分型全基因序列进化分析
- 文献传递
- 共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组非复制型痘苗病毒构建及鉴定被引量:2
- 2005年
- 目的构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E6、E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经WesternBlot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白。结论非复制型重组痘苗病毒NTVJE6E7CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变候选疫苗。
- 黄薇田厚文任皎范江涛赵莉边涛陆振华阮力
- 关键词:痘苗病毒非复制型重组痘苗病毒HPV16L1E7蛋白共表达E6
- 共表达HPV16L1、L2、E67蛋白的重组非复制型痘苗病毒的构建
- 2005年
- 目的:构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E67蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法:以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E67蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果:该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经Westernblot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E67蛋白。结论:非复制型重组痘苗病毒NTVJE67CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变的候选疫苗。
- 黄薇田厚文任皎范江涛赵莉边涛陆振华阮力
- 关键词:人乳头瘤病毒宫颈肿瘤痘苗病毒载体
- HPV11型L2E7融合蛋白的原核表达及其免疫效果观察被引量:3
- 2007年
- 目的构建人乳头瘤病毒11型L2E7原核表达系统pET9aHPV11L2E7,并纯化蛋白进行小鼠免疫效果研究。方法从尖锐湿疣组织中扩增人乳头瘤病毒11型12、E7基因片段,构建DET9aHPV11L2E7原核表达重组质粒并测序,在大肠埃希菌宿主菌BL21(DE3+)中经IPTG诱导表达融合蛋白L2E7(553个氨基酸),经SDS—PAGE电泳和Western Blot进行鉴定。CM离子交换介质纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,进行细胞免疫水平和体液免疫水平的检测。结果成功构建了pET9 aHPV11L2E7原核表达系统,纯化获得的HPV11L2E7蛋白免疫BALB/c小鼠后能检测到针对HPV11E7特异性的细胞免疫,血清中能检测到高效价抗HPV11L2E7抗体。结论纯化的HPV11L2E7融合蛋白能够引发特异性细胞和体液免疫反应,能作为尖锐湿疣免疫治疗候选疫苗。
- 张卉赵莉任皎高见边涛范江涛阮力陈心秋田厚文
- 关键词:疫苗
- 乙肝疫苗长期免疫地区低龄人群乙型肝炎病毒基因序列与突变现状被引量:3
- 2008年
- 目的 通过乙型肝炎流行病学调查和病毒基因检测,了解乙肝疫苗长期免疫地区低年龄人群的基因序列与突变特征。方法 从乙肝监测点收集乙型肝炎病毒表面抗原阳性血清,取其中年龄小于16岁者,扩增包括preS和S基因在内的基因序列片段,共1100碱基,序列测定后与标准基因型别比较,确定病毒基因及血清型别,确定a抗原决定簇的氨基酸替代突变发生率,选取一株病毒进行全基因扩增、克隆和序列测定。结果 共检测样本35例,33例血清扩增出乙肝病毒基因序列,其中30例乙型肝炎病毒基因型为B型,占90.9%,3例乙型肝炎病毒基因型为C型,占9.0%,1例血清型为ayw,3例为adr,其余29例为adw,共有5例在a抗原决定簇发生氨基酸替代突变,发生率约为15.2%。其中5856号血清扩增乙型肝炎病毒全基因为B型,血清型为adw,共3215个碱基。结论 该地区乙型肝炎基因型主要为B型,血清型为adw,人群中a抗原决定簇某些位点已发生与疫苗免疫逃逸相关的突变。
- 边涛张勇曹彦强王继杰沈立萍王峰王岳毕胜利
- 关键词:肝炎病毒乙型基因型血清分型突变