田厚文
- 作品数：81 被引量：217H指数：7
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- HPV 16型E7E6融合蛋白基因、表达载体、方法、细胞和用途
- 本发明提供一种编码HPV 16型E7E6融合蛋白的基因、表达载体、方法、细胞和用途。本发明利用重组腺病毒，将经修饰失去转化活性的E6、E7蛋白基因融合，并根据融合蛋白的氨基酸序列进行哺乳细胞密码子优化改造，使之在哺乳细胞...
- 田厚文任皎赵莉高见冯靖庞正吴小兵阮力
- 文献传递
- HPV6型L2N120E7E6融合蛋白基因、表达载体、方法、菌株和用途
- 本发明提供一种编码HPV 6型L2N120E7E6融合蛋白的基因、表达载体、方法、菌株和用途。本发明利用原核表达载体，将人乳头瘤病毒(HPV)6型L2N端120个氨基酸、E7蛋白、E6蛋白融合，并根据融合蛋白的氨基酸序列...
- 田厚文赵莉任皎庞正冯靖张忠献阮力谭文杰
- 痘苗病毒天坛株N1L基因表达调控序列的克隆与特性分析
- 2024年
- 本研究以痘苗病毒天坛株(Vaccinia Virus Tian Tan Strain,VTT)为对象,旨在明确N1L基因的表达调控序列。我们克隆了N1L起始密码子ATG上游不同长度的调控序列片段,构建了表达载体,并利用报告基因萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase,Fluc)的表达来确定N1L表达调控序列区域。通过PROMO在线预测网站,预测了与调控序列结合的转录因子。结果显示,VTT中N1L基因的表达受到上游调控序列的调控,其中以-404bp起始的片段启动的Fluc表达量最高。PROMO预测表明该区域存在多个转录因子结合位点。本研究为痘苗病毒基因表达特点的研究提供了实验依据,并为N1L基因功能及机制研究奠定了基础。
- 翟玉倩韩一泽吴长城张钟贤赵莉罗美惠豆亚美刘士元任皎田厚文王文玲谭文杰
- 关键词：痘苗病毒天坛株基因表达与调控
- 密码子优化的HPV16 L2E7基因在大肠杆菌中高效表达被引量：4
- 2007年
- 目的提高HPV16L2E7融合基因在大肠杆菌中的表达水平,为中试研究提供高表达量的疫苗候选株。方法根据大肠杆菌偏爱密码子,利用Synthetic Gene Designer软件对L2E7全基因进行密码子优化,将分段合成的基因分部插入到pET9a中,经酶切和测序鉴定无误后转化BL21(DE3+)中,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。表达的融合蛋白进行SDS-PAGE胶和Western blot鉴定。同时还进行梯度实验分别对诱导的温度、时间和IPTG诱导时菌体浓度进行优化,并对蛋白的纯化方案进行摸索。结果优化后的pET9aSL2E7AB在大肠杆菌中得到高效表达,诱导条件优化后的目的蛋白占全菌60%左右。结论成功得到了具有较高表达水平的疫苗候选株。
- 高见赵莉任皎张卉阮力田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒密码子优化大肠杆菌
- HPV16型E7复制型DNA疫苗诱发的抗肿瘤免疫反应被引量：11
- 2003年
- 为了研制有效的疫苗 ,用于HPV16型重度感染和与其感染相关的宫颈癌晚期病人手术后的免疫治疗 ,用复制型DAN疫苗载体 pSCA1,在其CMVIE启动子之下插入修饰的HPV16型E7基因mE7- 3( 2 4G、2 6G、6 7R) ,构建成 pSCA1mE7- 3复制型DNA疫苗。以重组质粒免疫C5 7BL/ 6小鼠 ,检测诱发的特异性CTL活性 ;将免疫后的小鼠用TC - 1肿瘤细胞攻击 ,观察免疫保护效果。实验结果显示 :pSCA1mE7- 3复制型DNA疫苗能诱导小鼠产生针对TC - 1肿瘤细胞的特异性CTL反应 ;复制型DNA疫苗免疫后的小鼠能耐受 1× 10 4 TC - 1细胞的攻击 ,成瘤时间推迟 ,并且成瘤率明显下降 ,部分小鼠得到保护能免受肿瘤攻击。因此pSCA1mE7- 3复制型DNA疫苗可作为HPV16相关肿瘤的癌前病变及中晚期病人术后免疫治疗的候选疫苗。
- 田厚文韩立群任皎骆卫峰陆振华阮力
- 关键词：人乳头瘤病毒DNA疫苗免疫治疗
- 表达HPV16 L1、L2和E7蛋白的非复制重组痘苗病毒的构建
- 2008年
- 目的构建防治宫颈癌的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1,L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒疫苗株。方法以痘苗病毒为载体,利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1,L2E7蛋白的重组痘苗病毒,用PCR和Western blot技术进行鉴定。结果该病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)中连续传代15代,经PCR检测证实病毒基因组中有HPV16L1,L2E7目的基因插入,Western blot检测证实病毒可以稳定表达L1和L2E7蛋白。结论构建的病毒NTVJL1L2E7可以在真核细胞中表达HPV16L1和L2E7蛋白,可以作为治疗和预防HPV16相关疾病的候选疫苗。
- 范江涛陈心秋黄薇田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒痘苗病毒
- 表达野生型和突变型HPV16-E7重组痘苗病毒诱发的抗肿瘤免疫反应被引量：5
- 2001年
- 目的 选出适合于治疗性疫苗研制的HPV16E7突变基因。方法 对表达野生型和突变型E7蛋白的重组痘苗病毒所诱发的细胞免疫反应和抗肿瘤活性进行比较研究。结果 表达突变型ME7 1(2 4G2 6G)的重组痘苗病毒VmE7 1与表达野生型E7的VwE7相同 ,可诱发特异性抗体和CTL的产生 ,明显推迟成瘤时间并且保护部分小鼠抵抗肿瘤细胞的攻击 ;而表达突变型ME7 2(2 4G2 6G91G)的重组痘苗病毒VmE7 2免疫小鼠后难以有效的激发细胞免疫反应 ,在抗肿瘤移植实验中也不具明显的免疫保护作用。结论 E7突变基因ME7 1可作为候选基因用于HPV16治疗性疫苗的研制。
- 职慧军韩立群任皎田厚文骆卫锋梁雨阮力
- 关键词：乳头状瘤病毒宫颈肿瘤
- 基于重组酶介导等温核酸扩增的猴痘病毒核酸检测方法
- 本发明公开了基于重组酶介导等温核酸扩增的猴痘病毒核酸检测方法，具体为：在39℃，30min恒温条件下特异识别并扩增目标样本的DNA片段，RAA扩增引物选自N4R基因，通过RAA结合CRISPR/Cas12a、实时RAA和...
- 王文玲谭文杰罗美惠赵莉吴长城田厚文黄保英陆柔剑任皎
- HPV16型L2N120E7E6融合蛋白、基因、制备方法及用途
- 本发明涉及一种在大肠杆菌中高效表达的人乳头瘤病毒16型L2N120E7E6重组蛋白的密码子优化基因，将其插入原核表达载体pET9a，优化基因获得高效表达，表达水平占全菌的50％，表达蛋白经纯化后免疫小鼠，实验结果表明该蛋...
- 田厚文赵莉毛子安庄昉成任皎高见冯靖庞正姜云水阮力
- 二代人乳头瘤病毒预防性疫苗的研究进展
- 2011年
- 人乳头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）是一种嗜黏膜和皮肤上皮的双链DNA病毒,与多种疾病的发生相关.根据致病性将其分为高危型和低危型2种,高危型感染与宫颈癌及癌前病变的发生密切相关,有：HPV-16、-18、-45、-31、-33、-52、-58等;其中70%的宫颈癌与HPV-16/18型有关.低危型感染与生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关,有：HPV-6、-11、-40、-42等,其中6和11型的感染与90%以上的生殖器疣和宫颈低级鳞状上皮增生病变的发生密切相关.
- 张忠献田厚文
- 关键词：人乳头瘤病毒预防性疫苗双链DNA病毒鳞状上皮增生病变生殖器疣
