赵伟睿
- 作品数：60 被引量：178H指数：9
- 供职机构：浙江大学宁波理工学院更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生化学工程更多>>
- 一种通过DNA合成改组组合突变获得的谷氨酸脱羧酶突变体及应用
- 本发明公开了一种通过DNA合成改组获得的热稳定性得到显著提升的谷氨酸脱羧酶突变酶及应用。该突变酶筛选自通过DNA合成改组构建的突变文库，该突变文库由已知可以提高谷氨酸脱羧酶热稳定性和催化活性的突变位点(即正向突变)的随机...
- 胡升赵伟睿梅乐和俞贝黄俊吕常江
- 一种通过序列一致性制备的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用
- 本发明公开了一种通过序列一致性制备的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用，该谷氨酸脱羧酶突变体为下列之一：将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第383位的苏氨酸突变为赖氨酸；将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第163位的丙氨...
- 黄俊花雨娇梅乐和吕常江王宏鹏胡升赵伟睿
- 文献传递
- 一种利用拉氏图信息制备谷氨酸脱羧酶突变体的方法及其突变体
- 本发明公开了一种利用拉氏图信息制备谷氨酸脱羧酶突变体的方法及其突变体，该方法包括：构建谷氨酸脱羧酶的三维结构模型，进行二面角合理性评价，生成拉氏图，从拉氏图中确定处于构象不合理区的氨基酸残基位点；针对该位点设计定点突变引...
- 梅乐和柯丕余黄俊胡升赵伟睿吕长江
- 文献传递
- 一种能够降解嘌呤核苷的短乳杆菌及其应用
- 本发明公开了一种能够降解嘌呤核苷的短乳杆菌及其应用。本发明筛选获得了一株短乳杆菌，命名为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)，株号ZJUNIT05，保藏号为CGMCC No.18445，该菌株具有高效降解...
- 陈沈梁张越凯赵伟睿李晨欣吴玲彩沈诗莹胡升梅乐和尚龙安
- 应用拉氏图信息提高短乳杆菌谷氨酸脱羧酶催化性能被引量：3
- 2016年
- 谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)是用于催化L-谷氨酸脱羧合成γ-氨基丁酸(γ-aminobutyrate,GABA)的唯一酶,提高GAD的催化活力或热稳定性,有利于GABA的高效制备和生产。以热稳定性和活性为筛选目标,通过研究短乳杆菌GAD1407三维模拟结构的拉氏图,确定不稳定氨基酸残基位点K413,采用定点突变的方法构建该位点的突变体,并测定野生型酶和突变酶的热稳定性和活力。结果表明突变酶K413A和突变酶K413I分别在热稳定性和酶活力上获得了提高,突变酶K413A在50℃的半衰期为105 min,是野生酶的2.1倍;突变酶K413I热稳定性没有明显的提高,但其酶活力却得到了有效提高,约为野生型的1.6倍。因此,通过拉氏图提供的结构信息可为利用理性设计提高GAD活性和热稳定性提供指导。
- 柯丕余黄俊胡升赵伟睿吕常江郁凯雷引林王进波梅乐和
- 关键词：谷氨酸脱羧酶蛋白质工程Γ-氨基丁酸
- 有机溶剂透性化处理谷氨酸脱羧酶工程菌制备γ-氨基丁酸的研究被引量：5
- 2015年
- 为了降低细胞壁和细胞膜的传质阻力对全细胞催化过程的不利影响,采用有机溶剂对表达重组谷氨酸脱羧酶(GAD)的工程菌BL21(DE3)-p ET28a-gad B进行了透性化处理。结果表明,菌体GAD表观催化活力的改善程度与有机溶剂的介电系数和疏水性具有较强相关性,低介电常数(<6),高疏水性(log P>0.68)的有机溶剂可以有效提高工程菌的GAD催化活性,其中最有效的透性化试剂为二甲苯(介电常数为2.4,log P为3.1)。当二甲苯的用量为5μL?mg?1(干重细胞)、处理时间5 min时,菌体表观催化活力达到最优值,为7.94 U?mg?1(干重细胞),是处理前表观催化活力的12.4倍。为了充分利用菌体的催化活力,采用海藻酸钙包埋的方法对二甲苯处理过的菌体进行固定化,结果发现固定化的透性化菌体可以较好地保持催化活力,反复催化10次后发现,第10次的GABA产率为第1次GABA产率的72.04%。研究为系统的选择有机溶剂来有效提高GAD工程菌表观催化活性提供了参考,同时制备的固定化的透性化菌体显示了良好工业应用前景。
- 赵伟睿柯丕余胡升黄俊彭春龙梅乐和姚善泾
- 关键词：谷氨酸脱羧酶有机溶剂Γ-氨基丁酸固定化
- 透性化酪氨酸脱羧酶工程菌制备酪胺的研究被引量：2
- 2017年
- 制备具有高表观酪氨酸脱羧酶(TDC)催化活力的全细胞催化剂对于酪胺生产效率的提升和成本的降低都至关重要。为此,研究构建了表达有Lactobacillus brevis CGMCC 1306 TDC基因的工程菌(Origami(DE3)-p ET21a-tdc),并在此基础上,采用9种有机溶剂对该工程菌进行透性化处理,来提高其菌体表观催化活力。结果表明,菌体表观TDC催化活力的改善程度与有机溶剂的疏水性具有较强相关性,高疏水性(log P>2.28)的有机溶剂能有效提高菌体表观TDC催化活力,最有效的透性化溶剂己烷的最适处理条件为:1%己烷处理工程菌10 min,在此条件下菌体细胞被膜结构发生明显改变,但细胞整体形态仍保持完整,菌体表观TDC催化活力可达1.48 U?mg-1。在pH 5.5,40℃的条件下,0.47 g?L-1透性化Origami B(DE3)-p ET21a-tdc菌体在4.5 h内可将18 g?L-1酪氨酸完全转化为酪胺。研究为系统地选择有机溶剂来提高TDC工程菌表观催化活性提供了参考,同时制备的透性化菌体显示了良好的工业应用前景。
- 赵伟睿赵伟睿胡升许汉良黄俊黄俊姚善泾梅乐和
- 关键词：有机溶剂酪胺
- 一种ω-转氨酶双突变体及其应用
- 本发明公开了一种ω‑转氨酶双突变体及其应用，该ω‑转氨酶双突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明ω‑转氨酶双突变体由野生型的土曲霉(Aspergillus terreus)ω‑转氨酶第115位的苯丙氨酸突...
- 黄俊梅乐和吕常江朱婉丽王宏鹏胡升赵伟睿
- 文献传递
- 一种引入二硫键的ω-转氨酶突变体及其应用
- 本发明提供了一种引入二硫键的ω‑转氨酶突变体及其应用，所述ω‑转氨酶突变体氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明ω‑转氨酶突变体由土曲霉(Aspergillus terreus)ω‑转氨酶131位的精氨酸和134...
- 黄俊谢东芳梅乐和王宏鹏胡升方卉赵伟睿吕常江李伊莹
- 苯乳酸在制备酵母菌裂解液中的应用、试剂盒及方法
- 本发明公开了苯乳酸在制备酵母菌裂解液中的应用、试剂盒及方法。本发明研究发现苯乳酸可以用于裂解酵母菌，可以用来提取酵母菌基因组时裂解酵母菌的细胞壁。本发明相对传统酵母DNA提取采用的蜗牛酶处理法来说，具有成本低、提取时间短...
- 赵伟睿陈沈梁陆一飞金宇宁李颂张越凯梅乐和胡升黄俊吕常江
