许飞
- 作品数:15 被引量:13H指数:3
- 供职机构:宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区科技厅科技攻关项目留学人员科技活动项目择优资助经费更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人脂肪源性血管外膜细胞对CD34^(+)造血干/祖细胞体外支持的实验研究被引量:3
- 2021年
- 目的建立以人脂肪源性血管外膜细胞(human adipose-derived pericyte/perivascular cells,hAD-PCs)为基质层与人脐血(umbilical cord blood,UCB)CD34^(+)造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSPCs)共培养体系,评估hAD-PCs对UCB CD34^(+)HSPCs的体外支持效力。方法实验分3组,实验组(hAD-PCs组)以hAD-PCs为基质细胞与UCB CD34^(+)HSPCs共培养;阳性对照组(BMSCs组)以骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)为基质细胞与UCB CD34^(+)HSPCs共培养;空白组(无基质细胞组)以UCB CD34^(+)HSPCs单独培养。在共培养的1、2、4周,倒置显微镜下观察UCB CD34^(+)HSPCs细胞形态;应用台盼蓝拒染法计算细胞数量;多参数流式细胞术分析血细胞标记CD45、CD34、CD33、CD19、CD10和CD14的表达;镜下观察UCB CD34^(+)HSPCs培养后集落形成能力;通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测造血因子分泌情况。结果UCB CD34^(+)HSPCs细胞增殖结果显示:hAD-PCs组及BMSCs组共培养的UCB CD34^(+)HSPCs细胞数在第1周略有增长,无基质细胞组细胞数降低,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);第2周时hAD-PCs组和BMSCs组细胞数继续增长达到高峰,无基质细胞组细胞数持续降低,hAD-PCs组、BMSCs组细胞数量均高于无基质细胞组(P均<0.05);第4周时hAD-PCs组和BMSCs组细胞数略有下降,无基质细胞组细胞全部死亡。hAD-PCs组和BMSCs组细胞计数各时间点差异无统计学意义(P均>0.05)。血细胞标记表达情况:hAD-PCs组和BMSCs组的全血细胞标记CD45^(+)、造血祖细胞标记CD34^(+)CD33^(-)、淋巴细胞标记CD10^(+)/19^(+)和髓系细胞标记CD14^(+)表达在1、2、4周差异均无统计学意义(P均>0.05)。UCB CD34^(+)HSPCs集落形成结果显示:hAD-PCs组和BMSCs组在1、2、4周形成的集落数量差异均无统计学意义(P均>0.05)。细胞因子分泌情况:hAD-PCs组和BMSCs组IL-3、IL-6、TPO、IFN-γ及TNF-α分泌水平差异均无统计学意义(P均>0.05);hAD-PCs组的SCF在1周时�
- 周芮杨婷婷张磊许飞郑波
- 关键词:间充质干细胞共培养
- 一种从无血清培养的人胎盘胎儿侧间充质干细胞中分选CD146+细胞的方法
- 本发明涉及细胞分选技术领域,具体是一种从无血清培养的人胎盘胎儿侧间充质干细胞中分选CD146+细胞的方法,其步骤包括S1:fPMSCs分离、S2:样本抗体标记、S3:细胞分选、S4:纯度测定。本发明通过分离人胎盘胎儿侧间...
- 杨婷婷郑波杨继辉张磊许飞马洁张思齐
- 人骨髓粒单系造血祖细胞甲基纤维素半固体培养与鉴定
- 目的:建立粒单系造血祖细胞CFU-GM(clony forming cell-granulocyte macrophage)的体外甲基纤维素半固体培养,并对CFU-GM集落进行进一步细胞形态学鉴定.方法:以密度梯度离心法...
- 古晶晶许飞
- 关键词:单个核细胞
- 人脂肪源性血管外膜细胞的分离培养和生物学功能分析被引量:2
- 2021年
- 目的建立人脂肪源性血管外膜细胞(CD146^(+)hAD-PC)体外分离纯化及培养的可行性方法,并进行生物学特性鉴定和分化能力分析。方法通过胶原蛋白酶消化法及多参数流式细胞术从人脂肪组织中分离纯化CD146^(+)hAD-PC(CD146^(+)CD34^(-)CD144^(-)CD45^(-)),并进行体外培养扩增,倒置显微镜下连续观察不同时期细胞的生长情况及形态变化;利用CCK-8法检测第6代(P6)、P9及P12的CD146^(+)hAD-PC增殖情况,研究不同代次增殖能力及活性差异;利用多参数流式细胞术检测CD146^(+)hAD-PC表面标志物的表达;经成脂诱导分化油红O染色、成骨诱导分化茜素红染色、成软骨诱导分化阿利新蓝染色鉴定其多向分化潜能。结果经多参数流式细胞术可从脂肪组织中得到纯度为(93.3±2.79)%的CD146^(+)hAD-PC,经体外培养能够稳定传代。P6、P9的CD146^(+)hAD-PC培养至第3天开始处于生长对数期,生长曲线近"S"型,P12的细胞增殖速度较缓。自第5天起P12的细胞增殖活性低于P6的细胞。CD146^(+)hAD-PC高表达CD44、CD73、CD90、CD105,不表达内皮细胞表面标志物CD34、CD31及造血细胞标志物CD45。体外诱导分化显示,CD146^(+)hAD-PC可分化为脂肪细胞、成骨细胞及成软骨细胞。结论通过胶原蛋白酶消化法及多参数流式细胞分选术可以从人脂肪组织中分离出稳定传代的CD146^(+)hAD-PC,体外贴壁生长,具有多向分化能力。
- 周芮张磊杨小萍杨小萍许飞杨婷婷郑波
- 关键词:间充质干细胞传代培养多参数流式细胞术
- 骨髓增生异常综合征并发骨髓浆细胞恶性肿瘤1例被引量:1
- 2018年
- 1病历资料患者男性,58岁,于2012年10月因"头晕、乏力"就诊我院,既往史:糖尿病病史3年,病毒性肝炎(慢性乙型)病史10年。查体:中度贫血貌,余未查及阳性体征。入院后查血常规:白细胞计数(WBC)4.20×10~9/L,中性粒细胞绝对值(NEUT)1.67×10~9/L,血红蛋白(HGB)72.0g·L^(-1),血小板计数(PLT)246×10~9/L。检测血清铁、血清铁蛋白、叶酸、维生素B12、风湿免疫相关指标无异常。
- 李玲许飞白晓川
- 关键词:骨髓增生异常综合征环孢素骨髓浆细胞MDS恶性肿瘤
- 74例急性淋巴细胞白血病临床分析
- 2013年
- 目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的细胞遗传学、分子生物学特征及其与疗效的关系。方法采用细胞染色体R带或G带分析核型及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测融合基因转录,并对结果进行分析。结果 ALL患者中,异常核型以t(9;22)、复杂核型最常见。正常核型组缓解率高于t(9;22)组和复杂核型组(P<0.05)。异常融合基因中BCR/ABL最常见,且缓解率低于阴性表达组(P<0.05)。成人ALL患者染色体核型异常检出率和融合基因表达率与儿童均无差别。结论细胞遗传学特征及融合基因表达可提高ALL诊断的准确率,对患者治疗及预后的判断具有一定临床价值。
- 刘蕾白晓川许飞杨瑞
- 关键词:急性淋巴细胞白血病细胞遗传学分子生物学疗效
- 17例乳腺癌治疗相关血液肿瘤患者的临床研究及文献复习
- 2019年
- 目的分析乳腺癌治疗相关血液肿瘤患者的临床特点,探讨乳腺癌治疗相关血液肿瘤可能的发病原因、机制及转归。方法回顾性分析宁夏医科大学总医院2006-2017年17例乳腺癌治疗相关血液肿瘤患者的临床资料,并复习相关文献。结果17例患者中,急性髓细胞白血病14例,非霍奇金淋巴瘤3例。乳腺癌治疗到血液肿瘤发生的中位潜伏期58.0(10.0,246.0)个月,中位生存期11.5(1.0,37.0)个月。35.3%患者有肿瘤家族史。可提供染色体和分子遗传学资料的10例急性髓细胞白血病患者,7例核型异常,7例分子遗传学异常。结论乳腺癌治疗相关血液肿瘤发生风险与化疗药物种类、剂量和放射治疗强度、年龄、肿瘤家族史密切有关。建议对于年轻、有肿瘤家族史的乳腺癌患者,选择化疗和放疗时需谨慎。
- 徐悦许飞胡代宏郑波
- 关键词:乳腺肿瘤血液肿瘤疾病特征
- CDX2基因在成人急性髓细胞白血病中的表达及临床意义
- 2015年
- 目的 研究尾型同源盒基因2(CDX2)在急性髓细胞白血病(AML)患者中的表达及临床意义。方法 通过RTPCR方法检测114例初发AML患者及56例诱导化疗后患者骨髓和(或)外周静脉血单个核细胞CDX2基因表达,19例随访患者每3个月定期检测CDX2基因表达。8名健康者外周静脉血和5名缺铁性贫血患者骨髓作为对照。结果 114例AML患者和13名对照的骨髓和(或)外周血单个核细胞均检测到CDX2基因表达。以第一个四分位数为界划分低表达组和高表达组,对照组CDX2基因表达水平均在低表达组,114例AML患者高表达组90例(78.9%),对照组与AML患者CDX2基因表达差异有统计学意义(P〈0.01)。初发患者骨髓和外周静脉血CDX2基因表达呈正相关(r=0.656,P〈0.01)。CDX2高低表达组诱导化疗完全缓解(CR)率差异无统计学意义(P〉0.05)。本组AML病例CDX2高表达78.9%。CR患者CDX2表达量为化疗前的10.3%-86.2%,且随着疗程增加逐步降低,复发时显著升高。随访6个月以上病例19例,两组早期复发率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 CDX2表达量变化反映患者体内白血病细胞负荷,持续高表达可能是预后不良指标之一,可作为染色体核型正常AML微小残留病监测指标。
- 申淑珍刘娟马云杨瑞许飞李玲白晓川
- 关键词:CDX2微小残留白血病
- 口咽部黏膜髓外浆细胞瘤1例并文献复习
- 2015年
- 髓外浆细胞瘤(extramedullary plasmacytoma,EMP)是来源于B淋巴细胞的少见恶性肿瘤。EMP表现为浆细胞的异常单克隆增殖,可发生于全身任何髓外组织及器官,80%的EMP发生于头颈部[1],尤其是上呼吸道。我科2014年1月份收治1例口咽部黏膜EMP,现结合文献复习报道如下。
- 许飞李玲白晓川
- 关键词:浆细胞瘤咽部黏膜肿大淋巴结免疫固定电泳唇黏膜
- NPM1和FLT3基因突变与急性髓系白血病临床特征及预后相关性研究被引量:2
- 2016年
- 目的探讨核仁磷酸蛋白(NPMl)基因突变及FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因内部串联重复(ITD)突变与成人急性髓系白血病(AML)患者临床特征及预后的相关性。方法应用PCR结合DNA测序技术分析NPM1与FLT3-ITD突变在135例初诊成人急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞中的表达,研究NPM1与FLT3-ITD突变阳性AML患者的临床特征及疗效。结果 115例AML患者NPM1突变阳性率29.6%(34/115),FLT3-ITD突变阳性率19.1%(22/115),NPM1及FLT3-ITD突变同时存在共7例;20例急性淋巴细胞白血病(ALL)和10例正常对照中均未检测到NPM1或FLT3-ITD突变。NPM1+AML患者初诊时BPC较高(P<0.05)、伴有特异性融合基因患者比例低(P<0.05)、免疫表型CD34阳性患者比例低(P<0.05)。单纯NPM1突变阳性AML患者有预后较好相关趋势。FLT3-ITD+AML患者初诊时骨髓原始细胞比例高(P<0.05),化疗后有低缓解率趋势。两种突变均与初诊时中位WBC数及染色体正常核型患者比例有相关关系(P<0.05)。结论 NPM1和FLT3-ITD突变是正常核型AML患者常见的分子学异常,且与AML临床特征及预后有一定相关性。
- 崔丽娟马荣许飞
- 关键词:急性髓系白血病基因突变PCRDNA测序