许卫兵 作品数:9 被引量:63 H指数:5 供职机构: 中国医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 国家教育部博士点基金 辽宁省博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
神经干细胞分化过程中Eph/ephrinA3的表达及意义 被引量:1 2008年 目的探讨海马源性神经干细胞在分化过程中Eph/ephrin A3通路的表达及其意义。方法神经干细胞提取自新生大鼠的海马区,经分离培养及鉴定,用免疫组化方法检测在神经干细胞分化过程中促红细胞生成素肝细胞受体A3(Eph A3)及其配体ephrin A3的表达情况。结果Eph A3表达于神经干细胞的胞质,随着神经干细胞的分化,Eph A3在胞质中的表达稍有减弱;ephrin A3逐渐在分化细胞的胞质和胞膜中出现并且表达增强。结论在神经干细胞的增殖及分化期存在Eph/ephrin A3通路的表达,二者的跨膜信号传导在神经细胞突起的生长中发挥着一定作用。 王岩峰 吕刚 赵宇 许卫兵 王洪林 于德水 董宝铁关键词:神经干细胞 康莱特联合顺铂高效杀伤骨肉瘤细胞(英文) 被引量:3 2005年 目的研究康莱特联合顺铂对骨肉瘤细胞的杀伤作用及其相关机制,探寻骨肉瘤的中西医结合化疗方案。方法免疫组化及RT-PCR方法检测不同浓度康莱特作用下骨肉瘤OS732细胞的Fas表达,并将康莱特与顺铂单独及联合应用于OS732细胞,采用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例,相差显微镜及荧光显微镜下观察凋亡细胞形态改变。结果康莱特可上调OS732细胞的Fas表达并诱导凋亡,10μL/mL康莱特与1μlg/mL顺铂合用于OS732细胞的抑制率与各自单用时相比明显提升(P<0.01)。细胞形态观察及凋亡率测定也显示,康莱特与顺铂联用可诱导更多OS732细胞凋亡。结论康莱特可协同顺铂高效杀伤骨肉瘤细胞,这可能与康莱特上调Fas表达诱导骨肉瘤细胞凋亡有关。 黄涛 吕刚 许卫兵 高大新 王岩峰 顾海伦关键词:康莱特 骨肉瘤 顺铂 山羊颈椎间盘纤维环成纤维细胞成骨潜能的体外观察 2005年 目的诱导培养椎间盘纤维环成纤维细胞,探讨其成骨潜能,比较重组人骨形成蛋白2(recom b inan thum an bone m orphogenetic prote in 2,rhBM P-2)和肿瘤坏死因子α(tum or necros is factor,αTNF-α)对其成骨的不同影响。方法利用体外细胞培养技术,建立实验山羊颈椎间盘纤维环成纤维细胞培养体系,根据培养液的不同,分为空白对照组、TNF-α组(加入50 U/m lTNF-α)、rhBM P-2组(加入0.1μg/m l rhBM P-2)和TNF-α+rhBM P-2组(加入50 U/m l TNF-α+0.1μg/m l rhBM P-2),培养3周观察纤维环成纤维细胞在条件培养液诱导下的成骨表型变化、碱性磷酸酶(a lka line phosphatase,ALP)和骨钙素(osteoca lc in,OC)等成骨指标变化。结果各实验组培养液对细胞增殖无明显影响。rhBM P-2组和TNF-α+rhBM P-2组细胞趋化性生长明显,矿化结节出现,茜素红染色呈深红色钙阳性反应。各实验组ALP活力与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。rhBM P-2组与TNF-+αrhBM P-2组成纤维细胞的OC分泌量与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),TNF-α组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外培养的椎间盘纤维环成纤维细胞有成骨潜能,rhBM P-2对纤维环成纤维细胞有明确的诱导成骨作用。 卢旭华 赵定麟 冯伟 许卫兵 陈德玉 袁文关键词:椎间盘纤维环 成纤维细胞 成骨潜能 骨形成蛋白 山羊 富血小板血浆诱导脂肪干细胞成骨作用的实验研究 被引量:8 2007年 目的探讨在体外培养中富血小板血浆(PRP)对脂肪干细胞的增殖及诱导成骨的影响。方法从Wistar大鼠自体动脉血中提取PRP,配制成条件培养液,并作用于培养状态的脂肪干细胞,MTT法检测细胞的增殖情况,Kaplow法染色检测细胞碱性磷酸酶表达情况,碱性磷酸酶活性检测,茜素红染色鉴定钙结节形成情况。结果脂肪干细胞经诱导培养后,PRP诱导组较对照组增殖明显(P<0.01),碱性磷酸酶活性较对照组增高明显(P<0.01),PRP诱导组碱性磷酸酶染色阳性,茜素红染色可见钙结节形成。结论体外培养时,PRP可促进脂肪干细胞的增殖并能诱导成骨分化,从而为骨组织工程提供一种新的方法。 王洪林 吕刚 许卫兵 栾洪佳 闵繁红关键词:富血小板血浆 脂肪干细胞 增殖 诱导成骨 碱性磷酸酶 低温保存神经干细胞移植促进脊髓损伤后轴突再生的实验研究 被引量:1 2008年 目的:观察低温保存(-70℃)的神经干细胞(NSCs)复苏后移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后轴突再生的影响。方法:NSCs在处于对数生长期阶段冻存2周,复温后由5溴脱氧尿嘧啶核苷法(Brdu)标记,制备大鼠SCI模型。实验分为3组:NSCs移植组(A组)、DMEM填充组(B组)、正常对照组(C组)。脊髓损伤后立即进行移植干预,应用免疫组化法观察Brdu标记的移植细胞的存活及迁移情况,应用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪法观察损伤处轴浆运输的重建。结果:复苏的NSCs经Brdu标记后移植到SCI区,在损伤脊髓区域可检测到标记的阳性细胞,辣根示踪技术显示细胞移植组较DMEM填充组阳性细胞明显多,组间差别有统计学意义。结论:低温保存的NSCs在移植到脊髓损伤区域后可存活,并参与脊髓损伤处轴浆通路的结构重建。 王岩峰 吕刚 许卫兵 金哲 黄涛关键词:脊髓损伤 神经干细胞 轴突 兔骨髓基质干细胞体外培养复合β-磷酸三钙进行胸椎后侧融合实验研究 被引量:15 2005年 [目的]评价β-磷酸三钙复合骨髓基质干细胞为骨移植替代物进行脊柱融合的效果。[方法]60只兔子分四组进行胸椎后路融合:Ⅰ组(组织工程化骨即β-TCP复合BMSCs),Ⅱ组(β-TCP+自体红骨髓),Ⅲ组(单纯β-TCP),Ⅳ组(自体髂骨)。术后12周处死其余动物进行放射学、手工力学和组织学检查。[结果]从影像学和手工力学比较,Ⅰ组的融合率高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组且有统计学差异。组织学上,Ⅰ组新骨形成量较多,陶瓷微孔内部充满新生骨;Ⅱ组骨小梁形成量较Ⅰ组少,为新生骨与纤维组织混杂;Ⅲ组陶瓷骨颗粒微孔内多为结缔组织,新生骨的量少,只见少量新生骨贴附于陶瓷骨表面;Ⅳ组在椎板与移植骨的交界处有稀疏的新生骨小梁形成。[结论]β-TCP复合BMSCs是脊柱融合自体骨的良好替代物。 许卫兵 贾连顺 卢建熙 卢旭华 滕红林 顾宇彤 杨建东 陈长青关键词:骨髓基质干细胞 Β-磷酸三钙 脊柱融合 骨移植替代物 体外培养兔骨髓基质干细胞复合β-磷酸三钙的肌内成骨能力观察 被引量:11 2005年 目的:观察体外成骨诱导培养液条件下骨髓基质干细胞与细胞支架β-磷酸三钙体外复合培养后的成骨活性,以验证兔骨髓基质干细胞在体外向成骨细胞转化的能力,并进行对照比较。方法:实验于2003-10/2004-02在解放军第二军医大学长征医院骨科实验室完成。取健康成年新西兰大白兔7只,将抽取的骨髓置于加入地塞米松、β-甘油磷酸钠及维生素C的DMEM标准培养液中培养。对获得的兔骨髓基质干细胞以倒置显微镜、透射电镜、碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色等手段进行生长状态观察及生物学特性鉴定。然后将骨髓基质干细胞与β-磷酸三钙体外复合培养1周后自体回植兔肌肉内,分别在4周和8周后取材,观察其成骨能力以组织学方法检测,并与未复合的β-磷酸三钙的细胞做自身对照比较。结果:实验选取的7只兔全部进入结果分析。①细胞的生长状况及形态特征:细胞全骨髓法培养24~48h,细胞开始贴壁,呈短梭形,贴壁细胞呈成纤维细胞集落方式生长。细胞培养5~7d,细胞集落生长逐渐密集,细胞体积逐渐增大,向长梭形转变,部分细胞呈多角形。②细胞生长曲线:传至第3代细胞,1~3d细胞增殖缓慢,为潜伏期,3~5d后细胞大量扩增,6d后细胞达到顶点进入平台期。第1,2,4代细胞的生长曲线基本与第3代相似。③细胞贴壁率:各代细胞的贴壁率未见明显差异,一般2h开始贴壁,2~8h前贴壁率增加较快,8~14h贴壁率达80%~90%。④细胞分裂指数:细胞早期分裂较慢,培养5~8d分裂指数最高,可达10%~15%。表现为胞核增大,双核增多。1~4代核分裂率基本相似。⑤细胞超微结构观察。结果:培养至第2代,骨髓基质干细胞透射电镜下细胞内开始出现大量胶原。⑥血清碱性磷酸酶检测结果:骨髓基质干细胞染色后,血清碱性磷酸酶显示红棕色沉淀,细胞密集区颜色较深。第3代细胞血清碱� 许卫兵 吕刚 黄涛 滕红林 卢建熙 贾连顺 卢旭华 顾宇彤 杨建东关键词:干细胞 骨髓细胞 磷酸钙类 经关节突螺钉固定治疗下颈椎脱位 被引量:11 2006年 目的 评价经关节突螺钉技术治疗下颈椎脱位的效果。方法 治疗颈椎骨折脱位患者54例,后路使用经关节突螺钉固定,前路减压植骨钢板固定。螺钉入钉点位于上位节段侧块背面中心点偏内上方,向外下方钻孔,外倾25°~30°,下倾30°~40°。钻透上下关节突,拧入3.5mm钛合金皮质骨螺钉,螺钉长度16~20mm。小关节间植骨融合。结果 随访14~24个月,平均18.8个月。颈椎弧度无丢失,无螺钉松动及神经血管并发症,小关节间植骨全部愈合。结论 下颈椎经关节突螺钉安全性好,螺钉抗拔出强度佳,固定确实,固定节段少,植骨融合率高;使用范围广,可用于C6/7节段。但建议结合钢板使用,小关节间隙必须植骨。 谢宁 谭军 叶晓健 许卫兵 贾连顺 袁文关键词:颈椎 骨折 脱位 内固定 多节段颈椎病前路两种手术方式探讨 被引量:14 2005年 许卫兵 吕刚 贾连顺 陈德玉 赵德伟 朱悦 屠冠军 黄涛 徐建伟关键词:颈椎 多节段颈椎病 内固定器 外科手术