袁龙
- 作品数:4 被引量:19H指数:2
- 供职机构:吉林大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 猫多能性基因慢病毒表达载体的构建与鉴定被引量:2
- 2014年
- 从含有猫Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc的质粒中获取目的基因,将目的基因与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体LV5进行定向连接,构建慢病毒表达载体LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4、LV-c-Myc,将其连接产物分别转化至细菌感受态细胞中,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后测序,通过lipofectamine2000介导转染293T细胞对慢病毒进行包装并测定病毒滴度,探讨猫多能性基因Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc慢病毒载体的构建与包装。结果表明:经双酶切鉴定及测序分析,成功构建并包装出LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4及LV-c-Myc慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致,且病毒滴度均达到107 TU·mL-1以上。说明成功地构建了猫多能性基因慢病毒表达载体,获得稳定产生慢病毒颗粒的包装细胞株。
- 樊晓烨俞先峰袁宝陈健朱拓袁龙马云青栗楠谢珊姗刘殿峰张嘉保任文陟
- 关键词:慢病毒载体胚胎干细胞
- ELISA和FAVN检测广州地区家养犬狂犬病免疫水平的结果比较被引量:2
- 2014年
- 2012-2013年随机采集广州9个区家养犬血清160份,采用ELISA、FAVN方法测定狂犬病病毒抗体效价,以比较免疫水平检测结果。结果显示,广州不同区家养犬的狂犬病病毒中和抗体平均水平存在着差异,最高达19.23±36.41,最低为0.45±0.09,平均抗体保护水平阳性率(≥0.5IU/mL)合格;ELISA与FAVN检测结果比较,检测结果阴、阳性判断方面一致性较高(阳性符合率为92.59%,阴性符合率为69.57%,总符合率为82.00%);在测定具体的抗体滴度方面仍有较大的差距,两种方法检测出的抗体滴度差异极显著(t=11.862,P<0.01)。
- 袁洁袁龙李莹莹沈丹魏文康薛红吕殿红王晓虎
- 关键词:狂犬病中和抗体免疫ELISA
- 靶向H、N基因siRNA对犬瘟热病毒在vero细胞中复制的抑制作用
- 2015年
- 以犬瘟热病毒(CDV)的核衣壳蛋白基因(N基因)和血凝素蛋白基因(H基因)作为靶基因,各设计并体外合成小干扰RNA,分别为N1、N2、N3和H1、H2、H3。将6对siRNA分别转染非洲绿猴肾细胞(Vero)并在转染后接种CDV,48h后通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光、TCID50、荧光定量PCR等方法对2组6个siRNA抑制CDV在Vero细胞中增殖的效果进行比较研究。结果显示,转染细胞感染CDV 48h后,6个siRNAs干扰组细胞出现的绿色荧光明显少于对照组,病毒感染滴度分别是对照组的1/293、1/11、1/29、1/83、1/302和1/90,6个干扰组的CDV基因拷贝数分别是对照组的12.96%、57.75%、23.47%、31.82%、12.82%、15.58%。结果表明,6对siRNAs均对CDV在Vero细胞中的复制具有不同程度的抑制作用,且以H2组抑制效率最高。
- 袁龙艾纯旭马云青陈健袁宝高巍胡进平任文陟
- 关键词:SIRNA
- 猪博卡病毒全基因组序列分析与基因分型研究被引量:15
- 2014年
- 为了解猪博卡病毒(PBoV)的基因组结构和遗传进化规律,并研究可行的PBoV基因分型方法,本研究利用GenBank中登录的28条PBoV全基因组序列信息,采用DNAStar生物信息学软件进行基因组序列分析。结果显示,分别选取全基因组、NS1基因、NP1基因和VP1基因构建的系统进化树,其基因分型结果基本一致,PBoV均被划分为3个基因群,基因群内各病毒株的核苷酸序列同源性较高,并且具有独特的序列特征和规律,而各基因群之间病毒株的核苷酸序列同源性非常低,基因组结构差异较大,充分证明了PBoV基因分型的可行性。
- 覃绍敏吴健敏马琳袁龙陈凤莲马玲白安斌
- 关键词:遗传进化分析基因分型