目的建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)同时测定桑叶中5种黄酮类成分(芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山奈酚)的分析方法。方法采用高效液相色谱法,建立其他成分与参照物异槲皮苷的相对校正因子,通过主成分分析及聚类热图进行聚类分析。结果相对校正因子具有良好的耐用性,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)值均小于3%;一测多评法与外标法所测结果无明显差异(RSD值均小于3.5%);不同产地桑叶中黄酮类成分含量差异较大,其中芦丁含量测定结果为0.0104%~0.0529%,异槲皮苷为0.0747%~0.1594%,紫云英苷为0.0196%~0.0537%,槲皮素为0.0004%~0.0009%,山奈酚为0.0002%~0.0005%,且无明显产地聚类特性。结论一测多评法适用于桑叶中5种黄酮类成分的同时测定,桑叶需规范化种植以保证质量的可靠性,确保其功效的稳定及安全。