范金红
- 作品数:7 被引量:19H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 一步法Taqman荧光定量RT-PCR方法检测狂犬病病毒
- 为了建立能特异检测我国基因Ⅰ型狂犬病病毒(RABV)的核酸检测方法,针对我国RABV N基因保守序列设计并合成了一套简并引物和Taqman探针,在优化反应条件的基础上,建立了特异检测我国RABV的一步法Taqman荧光定...
- 许运斌邵明富范金红席进涂长春
- 关键词:狂犬病病毒
- 文献传递
- 动物狂犬病流行毒株的抗原性差异分析
- 利用9株抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体,通过间接免疫荧光方法对分离的34株传至F6代N2A细胞适应株进行了抗原差异分析。结果表明:这些RABV分离株存在抗原差异,根据病毒与单抗反应的类型,将所分析的病毒株分为6个抗原变异型...
- 龚文杰曾政查云峰邵明富范金红孙彦伟余兴龙江禹涂长春
- 关键词:狂犬病毒抗原性遗传进化分析
- 文献传递
- 动物狂犬病流行毒株的抗原性差异分析
- 9株抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体,通过间接免疫荧光方法对分离的34株传至F6代N2A细胞适应株进行了抗原差异分析。结果表明:这些RABV分离株存在抗原差异,根据病毒与单抗反应的类型,将所分析的病毒株分为6个抗原变异型。根...
- 龚文杰曾政查云峰邵明富范金红孙彦伟余兴龙江禹涂长春
- 文献传递
- 狂犬病病毒荧光定量RT-PCR快速检测试剂盒的评价及应用被引量:1
- 2012年
- 基于目前在我国人群和动物中流行的狂犬病病毒(RV)均属于基因Ⅰ型,在本室所建立的基因Ⅰ型RV荧光定量RT-PCR方法的基础上,组装了可以便捷使用的RV快速检测试剂盒。对4 577份临床样品的检测结果表明,该试剂盒的检测灵敏度达4.68个TCID50,与《狂犬病防治技术规范》规定的套式RT-PCR灵敏度相当,而且稳定性良好,可以冷冻保存8个月以上。所研制的荧光定量RT-PCR快速检测试剂盒具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性强等优点,既适合单个临床样品的确诊,又适合RV流行病学监测的大规模筛查。
- 许运斌孙彦伟邵明富查云峰范金红席进朱妍涂长春
- 关键词:狂犬病病毒荧光定量RT-PCR试剂盒
- 基因1型狂犬病病毒一步法荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:5
- 2011年
- 目的在我国狂犬病均由基因1型狂犬病病毒(rabies virus,RV)引起。本研究针对RV N基因保守序列设计并合成了一套简并引物和Taqman探针,在优化反应条件的基础上,建立了检测RV核酸的一步法荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法。方法与结果该方法能特异检测基因1型,不能检测基因2-7型和犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病病毒(CAV)、水泡性口炎病毒(VSV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)等5种非狂犬病病原体,其检测灵敏度可达到4.68个TCID50的病毒含量。用该方法对29份新鲜和5份腐败的临床犬脑组织样品进行检测,并与国际金标准确诊方法狂犬病荧光抗体染色法(FAT)和乳鼠脑内接种试验(MIT)及本实验室建立的套式RT-PCR方法进行比较。结果表明所建立的qRT-PCR与套式RT-PCR的符合率为100%,二者均检测出12份阳性的新鲜样品和5份阳性的腐败样品,而FAT只检测出12份阳性的新鲜样品和1份阳性的腐败样品,MIT只检测出12份阳性,未检测出阳性腐败样品。检测中FAT和MIT确诊的所有阳性样品在qRT-PCR检测均是阳性,而在FAT检测为阴性的4份腐败样品在qRT-PCR为阳性,说明所建立的qRT-PCR方法准确性达到了FAT和MIT的水平,而且灵敏度更高,更适合于腐败样品的检测。结论研究结果表明该qRT-PCR方法特异性好、灵敏度高、污染率低、操作简单,在我国动物狂犬病临床诊断上具有巨大的应用价值。
- 许运斌邵明富范金红孙彦伟席进涂长春
- 关键词:狂犬病病毒
- 动物狂犬病病毒巢式RT-PCR检测方法的建立被引量:11
- 2009年
- 以GenBank收录的多基因型狂犬病病毒(RV)N基因序列为参考,设计了简并的PCR引物,建立了能够有效扩增7种基因型RV基因组片段的巢式RT-PCR(nested RT-PCR)方法,命名为RVN371。该方法能够检测到4.6个TCID50的SRV9固定毒,对犬、猪、蝙蝠及牛的狂犬病阳性脑组织样品均表现出良好的特感性:扩增产物目的带位置正确,未见非特异性扩增条带。对比试验表明,RVN371对街毒脑组织样品检测的灵敏度较乳鼠脑内接种试验(MIT)高出100倍;在对3种鼠脑固定毒、12种犬脑街毒样品的检测中,与RV检测的金标方法——免疫荧光试验(FAT)完全符合。RVN371为动物狂犬病的实验室诊断和流行病学研究提供了有利的工具。
- 江禹王莉莉韩小虎邵明富范金红刘芳涂长春
- 关键词:狂犬病病毒巢式RT-PCR
- 动物狂犬病流行毒株的抗原性差异分析被引量:5
- 2010年
- 利用9株抗狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)核蛋白单克隆抗体,通过间接免疫荧光方法对分离的34株传至F6代N2A细胞适应株进行了抗原差异分析。结果表明:这些RABV分离株存在抗原差异,根据病毒与单抗反应的类型,将所分析的病毒株分为6个抗原变异型。根据N基因系统发生分析将所分析的病毒株分为4个进化群,结果表明不同进化群病毒间的遗传差异与抗原分型没有直接的联系。
- 龚文杰曾政查云峰邵明富范金红孙彦伟余兴龙江禹涂长春
- 关键词:狂犬病毒抗原性遗传进化分析