范兆心
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：重庆市南川生物技术研究院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 金佛山特有杜鹃花遗传多样性分析被引量：8
- 2015年
- 利用ISSR分子标记初步分析了重庆金佛山特有的4种杜鹃花的亲缘关系,从100个引物中筛选出13个能扩增出清晰条带并具有多态性的引物.共扩增出了239条DNA片段,分子量约为200~1500bp.其中多态性片段约为171条,平均每条引物扩增出18.38条DNA片段.同时采用DPS软件计算出4种杜鹃花的Nei’S遗传距离,并用NTSYSpc2.1中的UPGMA法构建了系统树.结果表明4种杜鹃花之间既有相同的遗传背景,又存在一定的差异.4种杜鹃花明显分为两类：树枫杜鹃为一类,疏花美容杜鹃,金佛山美容杜鹃与阔柄杜鹃为一类.
- 钟容丁显平李创魏霞李天俊范兆心
- 关键词：ISSR
- 非纯培养物细菌蛋白酶DNA片段的克隆与表达(英文)
- 2006年
- 为了构建更多的蛋白酶基因工程菌，以及进行蛋白酶基因的直接进化研究，从非纯培养细菌总DNA中扩增各种编码蛋白酶的DNA片段．根据MEROPS和GenBank数据库中的枯草杆菌类蛋白酶的编码区和成熟肽编码序列设计并合成了10条引物．富集培养胞外蛋白酶产生菌并提取了12个总DNA样品，分别用每对引物在降落PCR（Touchdown PCR，TD-PCR）条件下进行蛋白酶编码序列的扩增．选择了19个长800～1200bp的扩增片段测序，其结果为：8个是蛋白酶DNA片段，它们应属于4种不同的蛋白酶基因序列；同一对引物扩增到的基因序列差异性可达到32％，说明只使用基于已知序列的PCR方法从混合菌中获得新蛋白酶基因是可行的．将克隆到的1个与碱性蛋白酶E（GenBank No．AJ539133）的编码区99％相似的蛋白酶DNA片段插入pTWIN1载体，在大肠杆菌ER2566中进行表达．结果表明，表达的成熟蛋白酶可分泌到培养基中，能在牛奶平板上产生水解圈，对大肠杆菌有致死作用．
- 葛琴雅唐成康唐建华范兆心张义正
- 关键词：蛋白酶基因克隆降落PCR基因表达
- 铜离子对血管内皮细胞增殖与分化的影响被引量：4
- 2009年
- 目的评价Cu2+对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖与分化的影响。方法体外培养并传代HUVEC。将HUVEC以5×103个/孔密度接种于96孔板,根据向孔板中加入溶液浓度的不同将细胞随机分成3组,A组5μmol/L CuSO4,B组25μmol/L CuSO4,C组为空白对照,每组4个复孔,基础培养基为MCDB131,采用MTT法检测细胞增殖并绘制生长曲线。另取HUVEC以2×105个/孔密度接种于6孔板,分组同前,荧光定量RT-PCR检测3组HUVEC的内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因和Tie-1基因表达。结果生长曲线示前3d为指数增长期,第4天开始进入平台期。A组细胞增殖能力从第3天开始明显高于B、C组,B组在2d内高于C组,但从第4天开始显著低于C组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。荧光定量RT-PCR检测示作用48h后,A、B、C组eNOS基因表达分别为7.294±1.488、0.149±0.044和1.000±0.253,Tie-1基因的表达分别为1.481±0.137、1.131±0.191和1.000±0.177。A组与B、C组比较,2个基因的表达均有上调(P<0.05);B、C组比较,eNOS基因表达下调(P<0.05),Tie-1基因表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论5μmol/L Cu2+能有效促进HUVEC的增殖与分化。
- 罗堃范兆心冯喆李顺陈晓禾解慧琪
- 关键词：CU^2+人脐静脉血管内皮细胞细胞增殖基因表达
