白志强
- 作品数：17 被引量：15H指数：2
- 供职机构：青岛大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目'泰山学者'建设工程专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人巨细胞病毒感染及其IE86蛋白对ARPE-19细胞周期的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染ARPE-19细胞后对其细胞周期的影响,观察这种变化与HCMVIE2基因的关系,探讨HCMV感染的发病机制。方法用HCMV感染同步化的ARPE-19作为感染组,同时设模拟感染组为对照组。于感染后第1、2、3、4、5天收获细胞,RT-PCR方法检测HCMV IE mRNA的表达水平,用免疫荧光法检测细胞核内HCMV IE蛋白的表达,Western blot法检测HCMV早期蛋白IE和晚期蛋白pp65的表达。采用PCR方法从质粒pIEP86AD169扩增出IE2片段,构建真核表达质粒pEGFP-N3-IE2,脂质体介导瞬时转染ARPE-19细胞,RT-PCR、免疫荧光法分析IE2基因的表达。流式细胞术检测细胞周期的变化。结果 HCMV IE72、IE86和pp65可分别在病毒感染ARPE-19细胞后第2、3和5天时检测到表达,流式细胞术示感染组在感染第3、4、5天细胞周期的S期细胞比例显著增高,与对照组比较差异均有显著性统计学意义,P(0.05。瞬时转染质粒pEGFP-N3-IE2后细胞周期表现为S期细胞比例显著增高。结论 ARPE-19是HCMV的允许细胞,HCMV可引起ARPE-19细胞周期的改变,这种变化与IE2基因的表达有一定的关系。
- 刘海燕王斌李玲白志强姜光域王海涛钱冬萌赵巍闫志勇丁守怡宋旭霞
- 关键词：人巨细胞病毒ARPE-19细胞周期
- 人巨细胞病毒感染对神经瘤细胞凋亡损伤的影响及其差异蛋白质组学机制的探讨
- 王斌钱冬萌白志强宋旭霞闫志勇王海涛鲁晓晴丁守怡刘志军
- 该项目选择人星型胶质瘤细胞U251和人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y，两者按细胞数量之比为10:1的比例混合培养，建立HCMV体外感染混合神经瘤细胞模型，在此基础上综合运用生物信息学、分子生物学、细胞生物学、流式细胞术和...
- 关键词：
- 关键词：人巨细胞病毒病毒感染神经瘤细胞凋亡差异蛋白质组学
- HCMV感染对神经胶质细胞NGF表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染时神经胶质细胞内源性神经生长因子(NGF)的表达变化。方法采用免疫荧光法检测HCMV即刻早期蛋白(IE),RT-PCR技术检测正常培养和感染HCMV的神经胶质瘤(U251)细胞的NGF。结果HCMV能够感染U251细胞,U251能够表达NGF,感染HCMV后初期NGF表达没有变化,后期明显下调(P<0.05)。结论HCMV能够诱导U251细胞中的NGF表达异常。
- 王海涛白志强李玲吴伟风钱冬萌闫志勇宋旭霞王斌
- 关键词：人巨细胞病毒神经胶质细胞瘤神经生长因子
- HCMV感染致病机制及相关的婴儿肝炎综合征研究
- 王斌钱冬萌白志强宋旭霞闫志勇王海涛鲁晓晴丁守怡刘志军
- 所属科技领域：该课题属于医药卫生领域的研究，项目涉及围产医学、新生儿感染等领域。主要科技内容：该研究应用蛋白质芯片-时间飞行质谱仪(SELDI-TOF-MS)，结合分子生物学和免疫学的研究方法，建立HCMV感染致婴肝患者...
- 关键词：
- 关键词：婴儿肝炎综合征蛋白质组学
- HSV-1感染对人星形胶质瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus,HSV-1)感染对人星形胶质瘤细胞U251增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:以感染复数(MOI)为5的HSV-1感染体外培养的U251细胞,在感染后24h、48h、72h和96h用倒置显微镜观察U251细胞的形态改变;用MTT法、流式细胞术观察HSV-1感染对U251细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果:U251细胞在感染24h后开始出现细胞融合,48h后开始出现典型的细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE),72h后超过80%的细胞出现CPE,。96h后细胞大部分死亡。②MTT法显示HSV-1感染U251细胞24h、48h、72h及96h的U251细胞OD值均低于对照组(P<0.05)。③HSV-1感染U251细胞12h后凋亡率与对照组无显著差异(P>0.05),感染24h和36h后凋亡率比相应对照组有显著差别(p<0.05)。④HSV感染12h、24h和36h后均可引起U251细胞S期细胞增多和G0/G1期细胞减少,24h后G2/M期细胞比例开始增加。结论:HSV-1能感染体外培养的U251细胞,抑制其增殖,促进其凋亡并影响其细胞周期。
- 王倩李玲于向民王斌白志强钱冬萌宋旭霞赵巍丁守怡
- 关键词：HSV-1U251凋亡细胞周期
- 人巨细胞病毒感染对人神经干细胞定向星形胶质细胞分化过程中Notch相关信号分子表达的影响被引量：6
- 2010年
- 目的人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）感染可抑制神经干细胞（neural stem cell,NSC）的增殖和分化,Notch信号对NSC的增殖和分化具有重要的调控功能。文中研究HCMV感染对人NSC向星形胶质细胞分化过程中Notch信号相关分子Notch1~3、Jagged（JAG）1、delta-like（DLL）1及早老素（presenilin,PS）1表达的影响。方法体外分离培养海马NSC,并诱导其向星形胶质细胞分化。同时以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为5的HCMV AD169株感染NSC,分别在感染后0、1、3、5、7 d收获细胞,用实时RT-PCR法检测细胞内Notch1-3及其受体JAG1、DLL1的转录水平,Westernblot法检测Notch1细胞内段（Notch 1 intracellular domain,NICD）含量的变化。结果未分化状态的NSC含有大量Notch1NICD,Notch1-3、JAG1、DLL1mRNA呈高表达。诱导分化1d后,Notch各受体、配体mRNA表达均显著下降,3 d后表达回升,至第7天显著升高且可检出大量激活的NICD。HCMV感染组细胞在诱导分化1 d后Notch相关受体、配体mRNA水平亦明显下降,与对照组相比Notch1、Notch2和DLL1的表达更少。在以后各个时间点Notch相关受体、配体mRNA水平均低于对照组。PS1的表达仅在1 d时低于对照组。病毒感染7 d后,细胞内NICD含量明显低于对照组。结论HCMV感染可抑制Notch相关受体、配体的表达与活化,Notch信号异常表达参与HCMV感染所致NSC分化和增殖异常。
- 李玲白志强李鹏刘志军王海涛刘海燕姜光域宋旭霞钱冬萌闫志勇丁守怡王斌
- 关键词：神经干细胞人巨细胞病毒
- 正常包皮为底物的免疫印迹技术检测寻常型天疱疮抗体被引量：1
- 2008年
- 目的建立以正常包皮为底物用免疫印迹技术检测寻常型天疱疮抗体的方法。方法环切的正常包皮分离表皮后提取天疱疮抗原,进行免疫印迹反应,对15份寻常型天疱疮(PV)患者血清进行检测,并与间接免疫荧光(IIF)比较。结果15份血清都检测到与表皮分离抗原结合的IgG抗体,且在约130KD抗原处出现条带,7份血清同时与分子量为160KD抗原结合,健康对照者中未检测出特异性天疱疮抗体。免疫印迹和间接免疫荧光结果差异无显著性意义(P=1)。结论免疫印迹技术在天疱疮的实验室诊断中具有重要的应用价值。
- 李竹茜白志强赵东利
- 关键词：寻常型天疱疮自身抗体免疫印迹
- 人巨细胞病毒感染诱导U251星形胶质瘤细胞凋亡及其差异蛋白的表达
- 2009年
- 目的分析人巨细胞病毒(HCMV)感染对人星形胶质瘤细胞凋亡的影响及其细胞内差异蛋白的表达。方法以HCMV AD169株感染U251细胞,复制HCMV体外感染模型,通过RT-PCR和免疫细胞化学技术检测HCMV IE蛋白和结构蛋白pp65的表达。用AnnexinⅤ-FITC和PI染色检测细胞凋亡,通过SELDI-TOF质谱分析感染细胞内差异蛋白的表达。结果HCMV感染后6 h,U251细胞经RT-PCR可扩增出242 bp的IE基因条带,感染后3 d,细胞核内有大量IE蛋白表达,核周及细胞浆内有大量pp65蛋白表达。病毒感染后3 d,约47%的细胞产生凋亡。HCMV感染后细胞内Caspase-8和磷脂酶A2的表达明显增加。结论HCMV感染可能通过上调Caspase-8和磷脂酶A2的表达而诱导U251星形胶质瘤细胞产生凋亡损伤。
- 白志强李玲王斌刘志军王海涛钱冬萌闫志勇赵巍宋旭霞丁守怡
- 关键词：人巨细胞病毒凋亡
- HCMV感染诱导定向分化的海马NSCs分泌神经生长因子前体蛋白及其受体p75NTR
- 目的研究HCMV感染对神经干细胞向星形胶质细胞分化过程中神经营养因子(NGF)及其受体p75~(NTR)、trkA表达的影响,为阐明HCMV感染致NSCs损伤的分子机制提供理论依据。材料和方法体外分离并用含hEGF和hb...
- 李玲丁守怡王斌白志强李鹏王海涛刘海燕姜光域宋旭霞钱冬萌闰志勇
- 人NSCs分化的Astrocyte系中HCMV感染的建立
- 2009年
- 目的研究HCMV能否感染体外培养的由人海马神经干细胞（NSCs）分化成的星形胶质细胞（astrocyte）。方法体外分离、培养人NSCs，诱导其定向分化为星形胶质细胞，观察细胞的形态学特点并分别进行免疫荧光鉴定。然后用HCMVAD169株感染分化细胞，观察细胞形态变化，检测胞内病毒蛋白表达，并收集感染细胞的培养液，添加到正常人胚肺细胞中，观察有无典型细胞病变出现。结果体外原代培养的人NSCs绝大多数都表达巢蛋白（nestin），诱导其分化为星形胶质细胞后，细胞高表达神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。HCMVAD169感染细胞7d后，细胞出现肿胀、变大变圆等典型病变，胞核内检测到HCMV即刻早期基因表达产物-IE蛋白，添加感染细胞的培养液到人胚肺细胞中，细胞也出现典型病变。结论上述结果说明：在体外培养的由人NSCs分化成的星形胶质细胞中，HCMVAD169能够建立增殖性感染，这可能与先天性感染导致脑发育异常有关。
- 李鹏王斌李玲白志强王海涛徐莉莉郑旭丁守怡闫志勇宋旭霞钱冬萌
- 关键词：HCMV神经干细胞星形胶质细胞
