王雅静
- 作品数：40 被引量：48H指数：4
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学语言文字更多>>
- 阴道毛滴虫病检测方法的研究进展被引量：4
- 2004年
- 谢辉帖超男王雅静
- 关键词：阴道毛滴虫病TV泌尿生殖道病原体
- 阴道毛滴虫多克隆抗体的制备及Fd基因的原核表达
- 2006年
- 目的-将阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因在大肠埃希菌中诱导表达。方法-制备阴道毛滴虫可溶性抗原,多点注射免疫家兔,获得的血清用ELISA测定其抗体效价。将原核表达重组质粒pET3C-Fd转化入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达。结果-制备出抗阴道毛滴虫多克隆抗体,抗体效价在1∶8000以上,用于免疫印迹实验。经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)分析,重组质粒在大肠埃希菌中表达出Fd。结论-在大肠埃希菌中表达出了Fd。
- 谢辉王雅静帖超男毕世樑刘佩娜廖琳
- 关键词：阴道毛滴虫铁氧还蛋白多克隆抗体基因表达
- 阴道毛滴虫铁氧化还原蛋白基因的克隆和序列分析
- 目的构建阴道毛滴虫铁氧化还原蛋白基因(Ferredoxin Fd)重组质粒,克隆并进行序列分析。方法根据Fd基因已知序列,设计合成一对引物,用PCR技术从基因组DNA中扩增出Fd基因,并克隆入pMD-18T simple...
- 谢辉王雅静帖超男刘佩娜
- 关键词：阴道毛滴虫重组质粒克隆测序
- 文献传递
- 采用多种实验教学手段,提高实验教学质量被引量：1
- 2003年
- 陈静科廖琳刘佩娜王雅静陈静先
- 关键词：寄生虫学实验教学方法实验教学质量
- 杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达被引量：1
- 2002年
- 目的 在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法 以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进行鉴定。结果 1 SDS -PAGE电泳检测 ,重组质粒 pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带 ,而纯化蛋白和包涵体溶解物在 36kDa处均出现了特异的表达带。 2 36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别。结论 得到了高效表达的LACK纯化蛋白 。
- 卜玲毅胡孝素敬保迁王雅静马莹
- 关键词：利什曼原虫聚合酶链反应克隆免疫印迹
- 阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因的克隆及序列分析
- 2005年
- 目的-克隆阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶 (AK) 基因, 并测定其序列, 进行序列分析。方法-根据AK基因已知序列设计合成一对引物, 应用PCR技术从阴道毛滴虫基因组DNA中扩增出AK基因, 并将其克隆入pMD18 T simple载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR鉴定后, 用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。应用BLAST软件辅助分析所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列的同源性。结果-PCR扩增得到特异的阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因序列。酶切及PCR鉴定获得了正确的PT AK重组质粒。测序表明, 所克隆的AK基因大小为690 bp, 编码229个氨基酸。序列分析表明, 所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列具有高度同源性 (99 9%)。结论-克隆了阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因, 序列测定及同源性分析表明, 所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列具有高度同源性。
- 帖超男王雅静谢辉毕世樑刘佩娜廖琳
- 关键词：阴道毛滴虫腺苷酸激酶酶基因阳性克隆酶切同源性
- Chelex-100法及酚氯仿法提取阴道毛滴虫DNA的比较
- 目的:比较chelex-100法和酚氯仿法提取阴道毛滴虫基因组DNA。方法:分别用Chelex-100法和酚氯仿法提取阴道毛滴虫基因组DNA,用PCR法检测DNA提取的有效性。结果:两种方法提取的DNA经PCR扩增均有特...
- 谢辉王雅静帖超男廖琳刘佩娜
- 关键词：阴道毛滴虫DNA提取PCR扩增
- 文献传递
- 阴道毛滴虫接触依赖性细胞毒性的分子作用及化学基础被引量：2
- 2006年
- 阴道毛滴虫(以下简称滴虫)寄生于人体泌尿生殖道,在接触依赖性致病过程中,虫体对靶细胞的黏附起着关键性的作用,滴虫合成的酶分子可直接损伤上皮细胞,滴虫寄生部位的局部免疫反应可起到免疫保护作用,但炎症分子和免疫细胞又可加重病变损害,从整体水平来看,阴道毛滴虫的细胞毒性作用是多分子和多化学因素参与的共同结果。
- 杨树国帖超男王雅静
- 关键词：阴道毛滴虫致病机制
- 阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因真核表达质粒的构建
- 2006年
- 作者用螯合树脂(Chelex-100)提取阴道毛滴虫基因组DNA,PCR扩增出阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因,克隆入pMD-18T载体,亚克隆至pcDNA3·1(+)真核表达质粒。经PCR及酶切鉴定,Fd基因体外扩增产物为306bp,与已知序列吻合。成功构建了Fd基因的真核表达质粒。
- 谢辉王雅静帖超男毕世樑刘佩娜
- 关键词：阴道毛滴虫铁氧还蛋白真核表达质粒
- 四川地区阴道毛滴虫内人型支原体的PCR检测被引量：3
- 2009年
- 从临床上分离获得20株阴道毛滴虫虫株,经纯化培养后,提取基因组DNA。以人型支原体16S rDNA序列设计特异性引物,利用PCR技术检测阴道毛滴虫内的人型支原体,结果有13株为人型支原体阳性,感染率为65%,表明阴道毛滴虫与人型支原体的共生关系在中国四川具有普遍性。
- 朱晓燕王雅静毕世樑张仁刚
- 关键词：阴道毛滴虫人型支原体PCR
