王贵佐 作品数:53 被引量:176 H指数:7 供职机构: 陕西省人民医院 更多>> 发文基金: 陕西省自然科学基金 国家自然科学基金 陕西省中医药管理局科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
脂氧素A4对Ⅱ型肺泡上皮细胞-间质转化的抑制作用及其机制 2024年 目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming growth factor, TGF-β1)组、空质粒+TGF-β1组、pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组及LXA4+TGF-β1组。TGF-β1组以5 ng/mL TGF-β1干预A549细胞48 h;空质粒+TGF-β1组和pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞先分别转染空质粒或Nrf2过表达质粒,再以5 ng/mL TGF-β1干预48 h;LXA4+TGF-β1组A549细胞先用100 nmol/L LXA4预处理6 h再给予5 ng/mL TGF-β1干预48 h。光镜观察细胞形态变化,免疫印迹及免疫荧光法检测上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)表达;免疫印迹法检测核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)蛋白水平。结果 与对照组相比,TGF-β1组光镜下可见部分A549细胞形态从鹅卵石状变成细长不规则状,呈间质性改变,E-cadherin表达减少(P<0.05)、α-SMA表达增多(P<0.01),Nrf2蛋白水平下调(P<0.05)。与TGF-β1组相比,pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞E-cadherin表达增多(P<0.05)、α-SMA表达减少(P<0.01);LXA4+TGF-β1组A549细胞E-cadherin上调、α-SMA下调以及Nrf2蛋白水平增多(P<0.05)。结论 LXA4可抑制A549细胞发生EMT,其机制与上调Nrf2表达相关。 王贵佐 杨淑梅 刘璐关键词:肺纤维化 脂氧素A4 NRF2 经密码子优化的法桐花粉主要变应原基因Pla a1克隆表达、纯化和免疫* 王贵佐关键词:变应原 纯化 法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库的构建及鉴定 目的构建法国梧桐花粉变应原cDNA表达文库并初步鉴定。方法利用Trizol法抽提法国梧桐花粉变应原RNA,经过Oligo(dT)纤维素柱纯化后分离mRNA,反转录合成ds cDNA,连接EcoRⅠ接头,末端磷酸化,X h... 刘昀 孙秀珍 李维 张德信 卢家美 王贵佐 吴媛媛文献传递 肿瘤坏死因子对急性肺损伤动物模型外周血骨髓间充质干细胞数量的影响 被引量:2 2014年 目的观察肿瘤坏死因子(TNF-α)对急性肺损伤动物模型外周血骨髓间充质干细胞(MSCs)数量的影响。方法 SD大鼠分为对照组、模型组和干预组。对照组给予生理盐水气道滴入;模型组给予内毒素(LP S 5 mg/kg)气道内滴入;干预组气道内滴入LPS同时英夫利昔(10 mg/mL)腹腔注射5 mg/kg。5 h后处死动物取外周血,检测TNF-α含量及成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)数。成骨、成脂诱导检测其分化特性。结果模型组大鼠外周血TNF-α水平较对照组显著升高(354.0±82.4 vs 38.0±21.6,P<0.05),而较干预组显著降低(206.5±64.1 vs 354.0±82.4,P<0.05)。模型组大鼠外周血中培养出的CFU-Fs明显高于对照组(3.60±1.47vs 1.40±2.83,P<0.05)及干预组(3.60±1.47 vs 1.70±1.72,P<0.05);外周血骨髓MSCs成骨、成脂诱导后染色均阳性。结论急性肺损伤时,外周血中增加的TNF-α含量对骨髓MSCs动员及归巢均有促进作用。 张德信 董蕾 张永红 王贵佐 李少军 李满祥关键词:急性肺损伤 骨髓间充质干细胞 外周血 经密码子优化的法桐花粉主要变应原基因Pla a1克隆表达、纯化和免疫印记鉴定 目的对法国梧桐花粉主要变应原基因Pla al进行表达、纯化和免疫印记鉴定。方法首先根据文献获取法国梧桐花粉主要变应原基因序列;根据原核表达载体大肠杆菌对密码子的偏爱性,同时考虑RNA的二级结构,利用DNAStar软件进行... 王贵佐 陶爱林 孙秀珍 刘昀 邹泽红 吴媛媛文献传递 PPAR-γ激动剂在支气管哮喘中的研究 目的本研究将探讨PPAR-γ激动剂—罗格列酮治疗支气管哮喘的机制。我们提出PPAR-γ激动剂治疗哮喘可能的三个机制:1)PPAR-γ激动剂通过上调HO-1的表达水平来抑制气道重塑;2)HO-1进一步调控p21表达水平,抑... 徐晶 张永红 李满祥 孙秀珍 王贵佐 张德信 吴媛媛 谢新明 卢家美 韩冬重组葎草花粉主要变应原免疫特性研究 目的:鉴定重组葎草花粉主要变应原pTSX2的免疫特性,并初步评价其安全性。方法:应用western Blotting鉴定重组葎草花粉主要变应原pTSX2的免疫特性:用葎草花粉变应性哮喘患者的血清作为一抗行Western ... 吴媛媛 孙秀珍 刘昀 王贵佐 卢家美关键词:葎草花粉 免疫特性 变应性哮喘 白细胞介素10及其基因多态性与急性呼吸窘迫综合征的关系 被引量:3 2013年 急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是临床常见多发病之一,病死率较高,严重影响患者的生存和预后。白细胞介素10(IL-10)是重要的抗炎因子之一,可通过多种分子机制拮抗炎性反应,其分泌不足可导致ARDS的发病率和病死率显著增加。IL-10基因多态性亦参与ARDS的发生和发展,且不同基因型对患者生存及预后的影响存在差异。该文就IL-10及其基因多态性与ARDS间关系的研究进行综述,以期为ARDS的治疗提供新的理论依据。 王春亚 王贵佐 李满祥关键词:白细胞介素10 基因多态性 急性呼吸窘迫综合征 和厚朴酚通过增加IL-10及HO-1表达对LPS诱导急性肺损伤小鼠的保护作用 被引量:6 2022年 目的探讨和厚朴酚(honokiol,HKL)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用及其可能机制。方法24只6~8周的BALB/c雄性小鼠随机分4组:对照组、LPS模型组、和厚朴酚组和地塞米松组。对照组小鼠气管插管气道内滴注无菌PBS 60μl;LPS模型组气管插管气道内滴注1 mg/ml LPS 60μl;和厚朴酚组给予和厚朴酚(5 mg/kg)腹腔注射,1 h后气道内滴注1 mg/ml LPS 60μl;地塞米松组给予地塞米松2 mg/kg灌胃预处理,1 h后气道内滴注1 mg/ml LPS 60μl。气道内滴注LPS或PBS 24 h后处死小鼠,观察各组小鼠肺组织病理变化。对支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞总数计数及中性粒细胞分类计数。ELISA法检测BALF中细胞因子IL-1β、IL-6及IL-10的含量变化。免疫印迹方法检测肺组织中血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化。结果与对照组相比,LPS模型组组织学显示明显的肺泡壁结构破坏,炎性细胞大量浸润,BALF细胞总数及中性粒细胞数显著增加(P<0.01),BALF中细胞因子IL-1β及IL-6的水平显著增加(P<0.01)。与模型组比较,和厚朴酚组及地塞米松组小鼠肺组织病理改变明显减轻,BALF中细胞总数及中性粒细胞数显著减少(P<0.01),IL-1β及IL-6的分泌显著减少(P<0.01),IL-10表达显著增加(P<0.01),小鼠肺组织内HO-1表达明显增加(P<0.01)。结论和厚朴酚对LPS诱导的小鼠急性肺损伤具有潜在的保护作用,这种保护作用可能与IL-10的表达增加及HO-1的上调有关。 王贵佐 刘璐 张莹莹 陈芬芬 韩冬关键词:和厚朴酚 HO-1 IL-10 急性肺损伤 法桐花粉主要过敏原基因Pla a1重组表达及鉴定 被引量:2 2012年 目的:表达、纯化和鉴定法国梧桐花粉主要变应原基因Platanus acerifolia pollen allergen1(Pla a1)。方法:首先根据文献查找并在GenBank获取法国梧桐花粉主要变应原基因序列Pla a1,利用DNAStar软件进行密码子优化;合成全基因;将Pla a1与载体pET-44a连接后转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导并优化目的蛋白表达;利用亲和层析法纯化该外源表达蛋白;应用Western blot,利用法桐花粉过敏患者血清鉴定纯化后的目的蛋白的抗原性。结果:成功构建了pET44a-Pla a1阳性质粒;获得了法桐花粉主要变应原重组蛋白Pla a1;对该重组蛋白进行了亲和层析纯化;免疫印记法表明重组蛋白具有一定的抗原性。结论:首次利用密码子优化的方法获得融合Strep TagⅡ的法桐花粉过敏原重组蛋白Pla a1,为制备高纯度变应原、重组低致敏过敏原及变应原核酸疫苗奠定基础。 王贵佐 陶爱林 孙秀珍 李满祥 刘昀 邹泽红 吴媛媛关键词:密码子优化 纯化